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双价抗虫基因植物表达载体的构建及其在烟草中的表达 被引量:12
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作者 王志斌 郭三堆 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 1999年第11期1-6,共6页
利用人工合成及密码子优化后的雪花莲凝集素 (GNA) 基因, 与人工合成的GFM cryIA构建了双价基因中间载体。双价基因进一步亚克隆到植物表达载体pBI121.1上, 获得了带有两个抗虫基因cryIA及GNA基因的高... 利用人工合成及密码子优化后的雪花莲凝集素 (GNA) 基因, 与人工合成的GFM cryIA构建了双价基因中间载体。双价基因进一步亚克隆到植物表达载体pBI121.1上, 获得了带有两个抗虫基因cryIA及GNA基因的高效植物表达载体pGW4BAI, 在载体中两基因的5′端、3′端各加入与在植物中能增强基因转录和翻译有关的调控元件。通过根癌农杆菌介导叶盘法转化烟草K326, 获得28株卡那霉素抗性植株, 随机抽取17株经PCR及进一步Southern 印迹检测,证实了双价抗虫基因在烟草基因组中的整合。转基因烟草杀棉铃虫试验表明40% 的转基因烟草植株对棉铃虫具有高抗性; 抑制蚜虫试验表明有效降低了蚜虫繁殖率, 转基因植株抑制蚜口密度为30% ~85% 不等, 并且获得了数株兼抗棉铃虫及蚜虫效果均良好的转基因烟草植株。 展开更多
关键词 烟草 CRYIA 雪花莲凝集素 抗虫性 蚜虫
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