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中华蜜蜂感觉神经元膜蛋白基因克隆、组织表达分析及原核表达
被引量：
6
1
作者
胡颖颖
徐书法
+3 位作者
李薇
Abebe Jenberie WUBIE
国占宝
周婷
《昆虫学报》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第1期9-17,共9页
为明确中华蜜蜂Apis cerana cerana嗅觉形成中重要功能因子的信号转导通路,本研究利用RT-PCR方法,克隆了中华蜜蜂感觉神经元膜蛋白(sensory neuron membrane protein,SNMP)基因编码区,GenBank登录号为KC012595,命名为AccSNMP1。序列分...
为明确中华蜜蜂Apis cerana cerana嗅觉形成中重要功能因子的信号转导通路,本研究利用RT-PCR方法,克隆了中华蜜蜂感觉神经元膜蛋白(sensory neuron membrane protein,SNMP)基因编码区,GenBank登录号为KC012595,命名为AccSNMP1。序列分析表明,该编码区开放阅读框长1563bp,编码520个氨基酸,推测的编码蛋白的相对分子量和等电点分别为58.02kD和5.83。同源性比较发现,中华蜜蜂AccSNMP1与其他昆虫感觉神经元膜蛋白基因同源性差异很大,在氨基酸水平上与西方蜜蜂Apis mellifera SNMP基因一致性达99.2%,与熊蜂Bombus impatiens SNMP基因一致性达90.9%,而与赤拟谷盗Tribolium castaneum SNMP基因一致性仅为22.7%。系统发育树显示中华蜜蜂与西方蜜蜂遗传距离最近。实时荧光定量PCR结果分析表明,AccSNMP1在触角中表达量最高,在足中表达量较高,与胸、腹、头(去除触角和喙)、喙中表达量相比差异显著(P<0.05)。构建原核表达载体pEASY-E1-AccSNMP1,经IPTG诱导,中华蜜蜂感觉神经元膜蛋白在大肠杆菌Escherichia coli BL21(DE3)中高效表达。结果为进一步研究AccSNMP1在中华蜜蜂体内的作用机理奠定了基础。
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关键词
中华蜜蜂
感觉神经元膜蛋白
基因克隆
组织表达模式
原核表达
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职称材料
中华蜜蜂囊状幼虫病毒北京分离株VP1蛋白基因序列特征及原核表达
被引量：
2
2
作者
李薇
黄家兴
+4 位作者
Abebe Jenberie WUBIE
薛菲
国占宝
周婷
徐书法
《昆虫学报》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第4期495-502,共8页
【目的】研究中华蜜蜂囊状幼虫病毒(Chinese sacbrood virus,CSBV)VP1蛋白的分子进化特征及遗传多样性。【方法】利用RT-PCR方法,克隆了8株CSBV北京分离株VP1蛋白的基因编码区。【结果】序列分析表明,VP1蛋白基因编码区开放阅读框长945 ...
【目的】研究中华蜜蜂囊状幼虫病毒(Chinese sacbrood virus,CSBV)VP1蛋白的分子进化特征及遗传多样性。【方法】利用RT-PCR方法,克隆了8株CSBV北京分离株VP1蛋白的基因编码区。【结果】序列分析表明,VP1蛋白基因编码区开放阅读框长945 bp,编码315个氨基酸,推测编码蛋白的相对分子量和等电点分别为35.42 kDa和9.23,具有亲水性和免疫原性。序列同源性分析表明,不同年份CSBV北京分离株VP1蛋白氨基酸序列间差异较小,仅个别氨基酸存在差异。北京分离株与辽宁分离株及越南分离株VP1核苷酸序列一致性达93%,与印度及韩国分离株VP1核苷酸序列一致性达92%,与英国分离株VP1核苷酸序列一致性最低,为88%。序列分析同时表明,CSBV北京分离株VP1蛋白序列存在特有的序列特征,同其他地区分离株比较,北京分离株VP1蛋白序列中存在着氨基酸的插入突变。序列替换率分析表明,亚洲型分离株间序列替换率低于亚洲分离株与欧洲分离株间的替换率。构建原核表达载体pEASY-E1-VP1,经IPTG诱导,CSBV VP1蛋白在大肠杆菌Escherichia coli BL21(DE3)pLysS菌株中表达。【结论】本研究提示CSBV不同分离株基因序列存在变异,结果为进一步研究CSBV致病性分化的分子机理奠定了基础。
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关键词
中华蜜蜂
囊状幼虫病毒
VP1蛋白
系统进化
原核表达
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职称材料
题名
中华蜜蜂感觉神经元膜蛋白基因克隆、组织表达分析及原核表达
被引量：
6
1
作者
胡颖颖
徐书法
李薇
Abebe Jenberie WUBIE
国占宝
周婷
机构
中国农业科学院蜜蜂研究所、农业部授粉昆虫生物学重点实验室
出处
《昆虫学报》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第1期9-17,共9页
基金
国家自然科学基金项目(31072093)
农业部引进国外先进技术项目(2012-Z6)
+1 种基金
国家蜂产业技术体系项目(nycytx-43-kxj6)
中国农业科学院基本业务费项目(2008MF-1)
文摘
为明确中华蜜蜂Apis cerana cerana嗅觉形成中重要功能因子的信号转导通路,本研究利用RT-PCR方法,克隆了中华蜜蜂感觉神经元膜蛋白(sensory neuron membrane protein,SNMP)基因编码区,GenBank登录号为KC012595,命名为AccSNMP1。序列分析表明,该编码区开放阅读框长1563bp,编码520个氨基酸,推测的编码蛋白的相对分子量和等电点分别为58.02kD和5.83。同源性比较发现,中华蜜蜂AccSNMP1与其他昆虫感觉神经元膜蛋白基因同源性差异很大,在氨基酸水平上与西方蜜蜂Apis mellifera SNMP基因一致性达99.2%,与熊蜂Bombus impatiens SNMP基因一致性达90.9%,而与赤拟谷盗Tribolium castaneum SNMP基因一致性仅为22.7%。系统发育树显示中华蜜蜂与西方蜜蜂遗传距离最近。实时荧光定量PCR结果分析表明,AccSNMP1在触角中表达量最高,在足中表达量较高,与胸、腹、头(去除触角和喙)、喙中表达量相比差异显著(P<0.05)。构建原核表达载体pEASY-E1-AccSNMP1,经IPTG诱导,中华蜜蜂感觉神经元膜蛋白在大肠杆菌Escherichia coli BL21(DE3)中高效表达。结果为进一步研究AccSNMP1在中华蜜蜂体内的作用机理奠定了基础。
关键词
中华蜜蜂
感觉神经元膜蛋白
基因克隆
组织表达模式
原核表达
Keywords
Apis cerana cerana
sensory neuron membrane protein
gene cloning
tissue expression profile
prokaryotic expression
分类号
Q966 [生物学—昆虫学]
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职称材料
题名
中华蜜蜂囊状幼虫病毒北京分离株VP1蛋白基因序列特征及原核表达
被引量：
2
2
作者
李薇
黄家兴
Abebe Jenberie WUBIE
薛菲
国占宝
周婷
徐书法
机构
中国农业科学院蜜蜂研究所、农业部授粉昆虫生物学重点实验室
出处
《昆虫学报》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第4期495-502,共8页
基金
国家科技支撑计划课题(2011BAD33B04)
农业部“948”计划项目(2012-Z6)
国家自然科学基金项目(31072093)
文摘
【目的】研究中华蜜蜂囊状幼虫病毒(Chinese sacbrood virus,CSBV)VP1蛋白的分子进化特征及遗传多样性。【方法】利用RT-PCR方法,克隆了8株CSBV北京分离株VP1蛋白的基因编码区。【结果】序列分析表明,VP1蛋白基因编码区开放阅读框长945 bp,编码315个氨基酸,推测编码蛋白的相对分子量和等电点分别为35.42 kDa和9.23,具有亲水性和免疫原性。序列同源性分析表明,不同年份CSBV北京分离株VP1蛋白氨基酸序列间差异较小,仅个别氨基酸存在差异。北京分离株与辽宁分离株及越南分离株VP1核苷酸序列一致性达93%,与印度及韩国分离株VP1核苷酸序列一致性达92%,与英国分离株VP1核苷酸序列一致性最低,为88%。序列分析同时表明,CSBV北京分离株VP1蛋白序列存在特有的序列特征,同其他地区分离株比较,北京分离株VP1蛋白序列中存在着氨基酸的插入突变。序列替换率分析表明,亚洲型分离株间序列替换率低于亚洲分离株与欧洲分离株间的替换率。构建原核表达载体pEASY-E1-VP1,经IPTG诱导,CSBV VP1蛋白在大肠杆菌Escherichia coli BL21(DE3)pLysS菌株中表达。【结论】本研究提示CSBV不同分离株基因序列存在变异,结果为进一步研究CSBV致病性分化的分子机理奠定了基础。
关键词
中华蜜蜂
囊状幼虫病毒
VP1蛋白
系统进化
原核表达
Keywords
Apis cerana cerana
sacbrood virus （SBV）
VP1 protein
phylogeny
prokaryotic expression
分类号
Q965.8 [生物学—昆虫学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
中华蜜蜂感觉神经元膜蛋白基因克隆、组织表达分析及原核表达
胡颖颖
徐书法
李薇
Abebe Jenberie WUBIE
国占宝
周婷
《昆虫学报》
CAS
CSCD
北大核心
2013
6
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职称材料
2
中华蜜蜂囊状幼虫病毒北京分离株VP1蛋白基因序列特征及原核表达
李薇
黄家兴
Abebe Jenberie WUBIE
薛菲
国占宝
周婷
徐书法
《昆虫学报》
CAS
CSCD
北大核心
2014
2
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