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毛皮动物新冠病毒监测简报 被引量:3
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作者 曹海旭 胡博 +7 位作者 张海玲 李双双 李虹晔 赵传芳 廉士珍 刘昊 鲁荣光 白雪 《中国动物检疫》 CAS 2020年第12期1-2,共2页
2019新型冠状病毒病(COVID-19)给公共卫生安全带来巨大危害,但目前引起该病的新型冠状病毒(SARS-CoV-2)来源还未有定论。现有证据显示,SARS-CoV-2与分离自蝙蝠和穿山甲的SARS-CoV-2病毒株同源性相近,表明蝙蝠和穿山甲可能作为SARS-CoV-... 2019新型冠状病毒病(COVID-19)给公共卫生安全带来巨大危害,但目前引起该病的新型冠状病毒(SARS-CoV-2)来源还未有定论。现有证据显示,SARS-CoV-2与分离自蝙蝠和穿山甲的SARS-CoV-2病毒株同源性相近,表明蝙蝠和穿山甲可能作为SARS-CoV-2的中间宿主存在。目前,丹麦、荷兰和美国等国家已有人工饲养水貂及饲养场工作人员感染SARS-CoV-2的报道。试验研究显示,SARS-CoV-2可在雪貂上呼吸道复制,且雪貂对SARS-CoV-2高度易感,表明雪貂可作为一种SARS-CoV-2感染和传播的动物模型。2020年2—7月,本课题组对山东、吉林、辽宁、黑龙江等毛皮动物主要养殖省份的水貂样品进行SARS-CoV-2病原及抗体监测。利用WHO推荐的real-time RT-PCR检测方法,对328份水貂内脏组织及咽拭子样品进行检测,结果所有样品均为SARS-CoV-2阴性;采用北京万泰生物药业有限公司提供的SARS-CoV-2抗体检测ELISA试剂盒,对35份水貂血清样品进行抗体检测,结果样品中抗SARS-CoV-2抗体均为阴性。由于国内养殖多为密集型庭院养殖,养殖人员与水貂密切接触,且国外已有养殖场水貂大规模感染SARS-CoV-2的先例,为保障毛皮动物行业健康发展,此次监测重点对我国北方地区毛皮动物养殖场进行采样,结果并未发现毛皮动物携带SARS-CoV-2和针对SARS-CoV-2的抗体。这可能与目前我国人群的低SARS-CoV-2感染率和未有养殖场工人感染有关。本实验室已建立了检测毛皮动物及宠物的SARS-CoV-2抗原及抗体检测方法,在目前全球COVID-19疫情的严峻形势下,未来仍需对毛皮动物及宠物进行长期的SARS-CoV-2流行病学监测。 展开更多
关键词 SARS-CoV-2 毛皮动物 RT-PCR ELISA
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犬细小病毒与宿主互作及跨种传播机制研究概况 被引量:5
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作者 鲁荣光 刘维全 闫喜军 《动物医学进展》 北大核心 2020年第11期113-116,共4页
犬细小病毒(CPV)作为一种有着详细信息记载的病毒,一直以来是研究病毒遗传进化和跨种属传播机制的理想的模式病毒。研究表明,点突变CPV VP2蛋白第300位氨基酸残基即可改变CPV的宿主范围,论文通过对CPV病原学、CPV与其宿主细胞相互作用... 犬细小病毒(CPV)作为一种有着详细信息记载的病毒,一直以来是研究病毒遗传进化和跨种属传播机制的理想的模式病毒。研究表明,点突变CPV VP2蛋白第300位氨基酸残基即可改变CPV的宿主范围,论文通过对CPV病原学、CPV与其宿主细胞相互作用和突破种间屏障机制等方面进行综述,为进一步阐明CPV跨种传播机制等问题奠定基础。 展开更多
关键词 犬细小病毒 跨种传播 机制
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犬瘟热病毒N和H蛋白拮抗IFN-β信号通路的研究 被引量:3
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作者 龚成燕 李连峰 +2 位作者 陈杰 胡博 赵建军 《特产研究》 2021年第2期1-7,共7页
为研究犬瘟热病毒(Canine distemper virus, CDV)不同毒株N、H蛋白调控宿主β-干扰素(IFN-β)表达的作用,将CDV野毒株LN(10)1、SD(14)7和疫苗株CDV3感染提前转染了pGL3-IFN-β报告基因质粒和pRL-TK内参质粒的MDCK细胞,分别在感染0 h、8 ... 为研究犬瘟热病毒(Canine distemper virus, CDV)不同毒株N、H蛋白调控宿主β-干扰素(IFN-β)表达的作用,将CDV野毒株LN(10)1、SD(14)7和疫苗株CDV3感染提前转染了pGL3-IFN-β报告基因质粒和pRL-TK内参质粒的MDCK细胞,分别在感染0 h、8 h、12 h和24 h后通过双荧光素酶报告系统检测试剂盒测定IFN-β启动子的活性。将CDV野毒株LN(10)1、SD(14)7和疫苗株CDV3 N和H基因克隆到pCI真核表达载体。重组表达质粒分别转染HEK293T细胞,应用Western blot检测蛋白能否正确表达。将N和H蛋白重组表达质粒连同pGL3-IFN-β报告基因质粒和pRL-TK内参质粒共转染至HEK293T细胞后,经Poly(I:C)刺激细胞,利用双荧光素酶报告系统检测系统测定IFN-β启动子活性。结果显示3种不同毒力的CDV在感染MDCK细胞后,只有CDV 3疫苗株感染后能观察到IFN-β启动子短暂激活。Western blot实验证实,3种毒株N和H蛋白在HEK293T细胞中均能正确表达。双荧光素酶报告系统对IFN-β启动子检测活性结果显示,Poly(I:C)成功激活了IFN-β信号通路,而这种激活作用在表达CDV不同毒株的N或H蛋白时均受到显著抑制(P <0.01),但不同毒株N或H蛋白对IFN-β信号通路的调控与CDV毒力无关。本研究证实了CDV野毒株和疫苗株N、H蛋白可抑制宿主IFN-β信号通路,为进一步研究CDV与宿主分子互作奠定基础。 展开更多
关键词 犬瘟热病毒 N蛋白 H蛋白 IFN-Β 双荧光素酶报告系统
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犬细小病毒CPV-2c型亚洲株分离鉴定及VP2基因序列分析 被引量:2
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作者 李昀真 李双双 +7 位作者 丛培强 曹海旭 鲁荣光 廉士珍 张海玲 李虹晔 胡博 白雪 《特产研究》 2024年第2期1-6,共6页
为探明北京某犬场犬的死亡原因,从患有肠道出血的犬肛拭子中分离出1株犬细小病毒,试验通过PCR、血凝和间接免疫荧光试验方法对毒株进行鉴定,并对VP2基因进行克隆测序和序列分析,确定其遗传分支。结果表明,该分离株属于犬细小病毒CPV-2c... 为探明北京某犬场犬的死亡原因,从患有肠道出血的犬肛拭子中分离出1株犬细小病毒,试验通过PCR、血凝和间接免疫荧光试验方法对毒株进行鉴定,并对VP2基因进行克隆测序和序列分析,确定其遗传分支。结果表明,该分离株属于犬细小病毒CPV-2c型,命名为CPV-BJ21株。应用犬细小病毒单克隆抗体进行间接免疫荧光检测,结果为阳性;基因序列分析表明,分离株与犬细小病毒为同一进化分支,VP2基因核苷酸序列与中国四川的CPV-2c(MH476581.1)同源性达99%,与亚洲分离的犬细小病毒之间亲缘关系较近。VP2氨基酸序列在第A5G、S297A、D426E位出现了氨基酸突变;在F81细胞上传3代后,病毒液的血凝效价稳定于210。本研究可为犬细小病毒的流行情况及新疫苗的研究提供参考依据。 展开更多
关键词 犬细小病毒 分离鉴定 VP2基因 遗传进化分析
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狐狸流产胎儿体内肺炎克雷伯菌的分离鉴定及耐药性分析 被引量:2
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作者 王奇林 曹润来 +3 位作者 王威阳 张博 刘志杰 王晓旭 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期3640-3648,共9页
旨在了解狐狸流产的病因。本研究对河北省某狐狸养殖场流产胎儿进行解剖、病原分离培养、16S rRNA测序、毒力基因检测、血清型检测、药敏试验及致病性试验。结果显示,从狐狸流产胎儿体内分离获得6株肺炎克雷伯菌,检测出12种毒力基因(wab... 旨在了解狐狸流产的病因。本研究对河北省某狐狸养殖场流产胎儿进行解剖、病原分离培养、16S rRNA测序、毒力基因检测、血清型检测、药敏试验及致病性试验。结果显示,从狐狸流产胎儿体内分离获得6株肺炎克雷伯菌,检测出12种毒力基因(wabG、fimH、ent、icuA、icuB、mrkA、ycf、ecp、uge、ureA、iroB和ybtA)和3种血清型(K20、K54和K57),其中,K57为本次检测过程的优势血清型;经K-B药敏纸片法分析,发现本次分离获得的肺炎克雷伯菌对氨基糖苷类、头孢菌素类、喹诺酮、多肽类等抗菌药物存在中度或高度敏感,对大环内酯类、四环素类、青霉素类等抗菌药物存在多重耐药;经致病性试验分析,本次分离获得的肺炎克雷伯菌对小鼠具有一定的致病性,半数致死量(LD_(50))为1.2×10^(7)CFU·mL^(-1)。基于此,本研究分离得到的肺炎克雷伯菌具有一定的致病性和耐药性,且携带多种毒力基因,可能是诱发狐狸胎儿流产、死亡的因素之一,为狐狸胎儿流产的防控及诊断提供思路。 展开更多
关键词 狐狸 肺炎克雷伯菌 毒力基因 分离鉴定
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梅花鹿主要传染病研究进展
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作者 曹润来 王奇林 +2 位作者 王威阳 王晓旭 刘志杰 《特产研究》 2025年第6期170-181,共12页
梅花鹿传染病是梅花鹿高死亡率和淘汰率的主要原因之一,其中梅花鹿人畜共患病更是威胁健康养殖、产品安全和公共卫生安全的重要因素。本文对近十年有关梅花鹿传染病,包括病毒、细菌、寄生虫等进行全面综述,旨在梳理梅花鹿传染病的基本... 梅花鹿传染病是梅花鹿高死亡率和淘汰率的主要原因之一,其中梅花鹿人畜共患病更是威胁健康养殖、产品安全和公共卫生安全的重要因素。本文对近十年有关梅花鹿传染病,包括病毒、细菌、寄生虫等进行全面综述,旨在梳理梅花鹿传染病的基本情况和发展趋势,为从业人员更好地了解、认识梅花鹿传染病,采取有效防控措施、防止传染病的发生提供科学指导。 展开更多
关键词 梅花鹿 传染病 病原体
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水貂肺炎克雷伯菌的分离鉴定及耐药性分析 被引量:13
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作者 陈强 程悦宁 +7 位作者 冯秋菊 郭利 张淑琴 谭斌 易立 赵权 程世鹏 孙娜 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2022年第2期700-708,共9页
【目的】肺炎克雷伯菌是人畜共患的条件致病菌,是引起水貂肺炎的常见病原菌之一。试验主要对吉林省某水貂养殖场送检的6只患有肺炎的病死水貂进行细菌分离鉴定及耐药性分析,为指导临床合理用药提供依据。【方法】通过分离纯化方法从样... 【目的】肺炎克雷伯菌是人畜共患的条件致病菌,是引起水貂肺炎的常见病原菌之一。试验主要对吉林省某水貂养殖场送检的6只患有肺炎的病死水貂进行细菌分离鉴定及耐药性分析,为指导临床合理用药提供依据。【方法】通过分离纯化方法从样品中分离菌株并进行PCR鉴定,应用多位点序列分型技术(MLST)进行菌株ST分型。通过感染小鼠了解菌株的致病性,PCR检测血清型及毒力基因的携带情况;运用琼脂稀释法检测分离菌株对18种药物的敏感性,并通过PCR检测分离菌株耐药基因的携带情况。【结果】分离得到的6株菌株经PCR鉴定为肺炎克雷伯菌;MLST分析结果表明6株菌株分别有6种ST型,分别为:ST2594、ST1782、ST2844、ST2330、ST86和ST661。致病性分析结果显示,6株菌株均可引起小鼠死亡,共检测出6种毒力基因,未检测到毒力较强的血清型。药敏试验结果显示,6株肺炎克雷伯菌对头孢他啶、头孢曲松、亚胺培南、美罗培南、阿米卡星较敏感,对链霉素、庆大霉素、卡那霉素、青霉素、氨苄西林、环丙沙星、恩诺沙星、左氧氟沙星、多西环素和氟苯尼考较耐药。耐药基因检测结果显示,6株菌株共检测出bla_(SHV)、bla_(TEM-1)、bla_(CTX-M-1G)、aadA1、aac(3’)-Ⅳ、aac(3’)-Ⅱc、aph(4’)-Ⅰa、aph(3’)-Ⅶ、aph(3’)-Ⅳ、aph(2’)-Ⅰb、rmtB、qnrB、qnrD、qnrS、qepA、oqxAB、floR和mcr-118种耐药基因。【结论】分离到的6株肺炎克雷伯菌株为不同的种系进化,并具有较强的致病性和耐药性,为临床用药治疗带来困难。 展开更多
关键词 水貂 肺炎克雷伯菌 药物敏感性 耐药基因
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水貂出血性肺炎大肠杆菌毒力基因测定和H基因分型 被引量:2
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作者 张海威 程悦宁 +5 位作者 王晓旭 周玉成 乔连江 周曼莉 程世鹏 杨艳玲 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2022年第1期141-149,共9页
为了分离鉴定引起水貂出血性肺炎的大肠杆菌,并对其致病性、血清型和毒力基因进行鉴定。本研究主要通过细菌分离鉴定试验对具有典型肺炎症状的死亡水貂的病原体进行分离,利用16S rRNA对进行细菌鉴定,并通过PCR方法对分离细菌的血清型和... 为了分离鉴定引起水貂出血性肺炎的大肠杆菌,并对其致病性、血清型和毒力基因进行鉴定。本研究主要通过细菌分离鉴定试验对具有典型肺炎症状的死亡水貂的病原体进行分离,利用16S rRNA对进行细菌鉴定,并通过PCR方法对分离细菌的血清型和毒力基因进行检测,分析分离菌对动物的致病性。结果显示:28例水貂肺炎病例中分离出8株大肠杆菌,分离率为26.6%;H血清型分析显示:8株大肠杆菌的H基因型分别为H5、H11、H16、H25,其中H11为主要基因型,比率为50%(4/8);共有4种大肠杆菌的主要毒力基因,分别是iutA、papC、irp2、fyuA,其中H11血清型菌株含有iutA、irp2和fyuA 3种主要毒力基因。通过本研究我们明确了引起水貂肺炎的大肠杆菌主要血清型为H11,主要的毒力基因为iutA、papC、irp2和fyuA。 展开更多
关键词 水貂出血性肺炎 大肠杆菌 H基因分型 毒力基因检测
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狂犬病、犬瘟热和犬细小病毒病三联灭活疫苗免疫效果评价 被引量:2
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作者 龚成燕 陈杰 +4 位作者 潘虹军 罗国良 刘梦佳 胡博 赵建军 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2023年第3期82-90,共9页
狂犬病、犬瘟热和犬细小病毒病是当前危害养犬业的三种重要传染病。为探讨狂犬病毒(RABV)、犬瘟热病毒(CDV)和犬细小病毒(CPV)灭活制备三联灭活疫苗的可行性,将该3种病毒HEP-Flury株、LN(10)1株和JL(18)1-Beagle株分别在BHK-21、Vero/Do... 狂犬病、犬瘟热和犬细小病毒病是当前危害养犬业的三种重要传染病。为探讨狂犬病毒(RABV)、犬瘟热病毒(CDV)和犬细小病毒(CPV)灭活制备三联灭活疫苗的可行性,将该3种病毒HEP-Flury株、LN(10)1株和JL(18)1-Beagle株分别在BHK-21、Vero/DogSLAM(VDS)和F81细胞培养,经β-丙内酯灭活剂灭活后,分别与三种不同类型免疫佐剂(MONTANIDE GEL 02、ADJ-801(W)、Al(OH)3)配制成三联灭活疫苗。疫苗经三次免疫比格犬后,通过测定动物血清抗体水平和攻毒保护情况评价其免疫效果。实验结果显示,不同佐剂的三联灭活疫苗对增强比格犬RABV、CDV和CPV血清抗体应答反应效果不同。其中ADJ-801(W)佐剂能显著提高针对RABV、CDV和CPV三种病毒的抗体水平,疫苗三次免疫比格犬后血清抗体效价分别为7.4 EU/mL、1∶50和1∶1024;而Al(OH)3佐剂效果较差,三免后抗体效价分别为4.01 EU/mL、1∶6和1∶256。疫苗三次免疫后,分别应用强毒CDV SD(14)7株和CPVJL(18)1-Beagle株对比格犬进行攻毒实验,实验结果显示,ADJ-801(W)组对SD(14)7和JL(18)1-Beagle攻毒保护率均为100%,MONTANIDE GEL 02组攻毒保护率均为60%,而Al(OH)3组攻毒保护率均为0,表明ADJ-801(W)佐剂制备的狂犬病、犬瘟热和犬细小病毒病三联灭活疫苗对比格犬提供较好的免疫保护作用。本研究为犬狂犬病、犬瘟热和犬细小病毒病三联灭活疫苗的研制奠定了基础。 展开更多
关键词 狂犬病病毒 犬瘟热病毒 犬细小病毒 灭活疫苗 佐剂
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一株犬瘟热病毒H基因T193I突变株的分离鉴定及序列分析
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作者 李虹晔 李双双 +5 位作者 石亮 张海玲 廉士珍 曹海旭 白雪 胡博 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2023年第6期45-52,共8页
为对吉林省地区犬瘟热病毒(CDV)流行发病情况调查,本研究从吉林省长春市、吉林市、四平市的养犬场、毛皮动物养殖场、宠物医院共收集12份经胶体金试纸条检测为CDV阳性的肺部样品,利用Vero/DogSLAM细胞进行病毒分离培养,并对分离的病毒经... 为对吉林省地区犬瘟热病毒(CDV)流行发病情况调查,本研究从吉林省长春市、吉林市、四平市的养犬场、毛皮动物养殖场、宠物医院共收集12份经胶体金试纸条检测为CDV阳性的肺部样品,利用Vero/DogSLAM细胞进行病毒分离培养,并对分离的病毒经PCR鉴定、间接免疫荧光试验确定该病的致病病原,并对该病毒分型鉴定和H基因的遗传进化分析,并且选取1株犬源CDV病毒感染6只2~3月龄的幼犬进行动物回归试验,每天观察试验犬的临床症状、测量体温、采集眼鼻、肛拭子,拭子经PCR检测CDV的粪便排毒情况。结果显示,有1株犬源样品在Vero/DogSLAM细胞上盲传第4代出现明显的CPE,毒价达104.56 TCID50/mL,经PCR鉴定结果表明分离出1株犬源CDV,命名MHK-04;病毒的分型鉴定结果表明,分离的MHK-04为Asia-I型;对MHK-04毒株的H基因的同源性分析结果表明,MHK-04株为Asia-I型,与广东分离株GD1818株的同源性最高,与疫苗株(Onderstepoort和CDV3)差异较大,核苷酸同源率均为90.1%,氨基酸同源率分别为90.0%和90.1%;经SWISS-MODEL预测H蛋白三维立体模型结果表明,MHK-04株H蛋白氨基酸序列T193I突变位点,位于H蛋白的外部结构中β6S4位,是其起始位点,推测T193I点突变与H蛋白的构像改变及SLAM受体亲和力有关,有待进一步验证;动物回归试验结果显示,MHK-04毒株在感染幼犬后,幼犬出现犬瘟热发病症状,体温在第4 d升高到41.4℃,并出现排毒现象。本研究为了解吉林地区CDV的流行规律及疾病的诊断、防治提供参考。 展开更多
关键词 犬瘟热 分离鉴定 突变株 动物试验
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