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柑桔转基因研究进展
被引量:
5
1
作者
彭爱红
何永睿
+5 位作者
许兰珍
邹修平
刘小丰
姚利晓
雷天刚
陈善春
《热带作物学报》
CSCD
2011年第7期1381-1387,共7页
柑桔基因工程育种因其具有周期短、效率高、可控性强等优点而成为柑桔育种的重要内容之一。本文就柑桔转基因研究的品种及外植体、柑桔转基因研究所采用的方法、导入柑桔的外源基因进行了综述,最后提出了柑桔遗传转化中存在的问题并对...
柑桔基因工程育种因其具有周期短、效率高、可控性强等优点而成为柑桔育种的重要内容之一。本文就柑桔转基因研究的品种及外植体、柑桔转基因研究所采用的方法、导入柑桔的外源基因进行了综述,最后提出了柑桔遗传转化中存在的问题并对柑桔转基因研究进行了展望。
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关键词
柑桔
转基因
育种
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职称材料
CjFRO2在转基因枳中的整合与表达
被引量:
2
2
作者
刘小丰
彭爱红
+4 位作者
许兰珍
雷天刚
姚利晓
何永睿
陈善春
《果树学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第5期808-813,共6页
三价铁螯合物还原酶(Ferric-chelator reductase,FCR)在植物对三价铁的吸收过程中起着关键作用,导入外源三价铁螯合物还原酶基因是改良植物耐缺铁能力的有效途径。香橙(Citrus junos Sieb.ex Tanaka)是目前表现最好的柑橘耐缺铁砧木之一...
三价铁螯合物还原酶(Ferric-chelator reductase,FCR)在植物对三价铁的吸收过程中起着关键作用,导入外源三价铁螯合物还原酶基因是改良植物耐缺铁能力的有效途径。香橙(Citrus junos Sieb.ex Tanaka)是目前表现最好的柑橘耐缺铁砧木之一,在铁胁迫时,香橙三价铁螯合物还原酶基因(CjFRO2)在根尖表皮细胞中高效表达,根系三价铁还原活性显著增强。以枳[Poncirus trifoliata(L.)Raf.]上胚轴为材料,利用根癌农杆菌介导法将CaMV 35S-CjFRO2基因表达单元导入枳基因组中,拟通过CjFRO2基因在转基因枳中的组成型表达,提高转基因枳的铁吸收能力。经过PCR检测,Southern杂交分析,获得4个单拷贝的转CjFRO2基因枳株系PF2、PF3、PF5和PF8。Real-TimePCR分析表明,CjFRO2基因在4个转基因枳株系中都能有效表达,并在其无性繁殖后代中也能够稳定表达。为培育耐缺铁优良柑橘砧木新品种奠定了基础。
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关键词
香橙
三价铁螯合物还原酶基因
枳
Southern杂交分析
Real-TimePCR表达分析
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职称材料
柑橘转基因成分多重PCR检测体系的建立
被引量:
2
3
作者
李政利
彭爱红
+3 位作者
邹修平
何永睿
姚利晓
陈善春
《安徽农业科学》
CAS
2012年第16期8845-8849,共5页
[目的]建立柑橘转基因成分的多重PCR检测体系。[方法]根据GenBank中pBI121质粒序列和柑橘(Citrus.)Actin基因序列,分别设计CaMV35S启动子、NOS启动子、NOS终止子特异引物和Actin基因的特异引物,建立能同时检测出4种序列的多重PCR检测体...
[目的]建立柑橘转基因成分的多重PCR检测体系。[方法]根据GenBank中pBI121质粒序列和柑橘(Citrus.)Actin基因序列,分别设计CaMV35S启动子、NOS启动子、NOS终止子特异引物和Actin基因的特异引物,建立能同时检测出4种序列的多重PCR检测体系,同时通过正交试验确定该体系的最佳引物浓度和比例及PCR反应体系中各因素的浓度及反应程序,并对该方法的灵敏度进行验证。[结果]试验得到的最佳MPCR反应体系为:10×buffer 2.5μl,25 mmol/L MgCl22.0μl;dNTP Mixture(2.5 mmol/L each)2.0μl,10μmol/L的Actin基因、35S启动子、NOS启动子、NOS终止子引物分别加入1.0、1.0、1.5、0.5μl,模板DNA 0.1μg,Taq DNA聚合酶1.25U,加ddH2O至25μl。PCR反应程序为:94℃预变性5 min;94℃30 s,64.1℃45 s,72℃50 s,31个循环;72℃10 min。试验中,经正交优化后的4重PCR反应灵敏度达0.1%。[结论]该研究建立的MPCR检测体系,理论上已能满足柑橘或其深加工产品的转基因成分检测。
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关键词
多重PCR
正交试验
检测
转基因成分
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职称材料
题名
柑桔转基因研究进展
被引量:
5
1
作者
彭爱红
何永睿
许兰珍
邹修平
刘小丰
姚利晓
雷天刚
陈善春
机构
中国农业科学院柑桔研究所国家柑桔工程技术研究中心国家柑桔品种改良中心
出处
《热带作物学报》
CSCD
2011年第7期1381-1387,共7页
基金
重庆市重大科技专项(No.CSTC2007AB1040)
西南大学基本科研业务费专项资金项目(No.XDJK2009C132)
文摘
柑桔基因工程育种因其具有周期短、效率高、可控性强等优点而成为柑桔育种的重要内容之一。本文就柑桔转基因研究的品种及外植体、柑桔转基因研究所采用的方法、导入柑桔的外源基因进行了综述,最后提出了柑桔遗传转化中存在的问题并对柑桔转基因研究进行了展望。
关键词
柑桔
转基因
育种
Keywords
Citrus
Transgene
Breeding
分类号
S666 [农业科学—果树学]
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职称材料
题名
CjFRO2在转基因枳中的整合与表达
被引量:
2
2
作者
刘小丰
彭爱红
许兰珍
雷天刚
姚利晓
何永睿
陈善春
机构
中国农业科学院柑桔研究所国家柑桔工程技术研究中心国家柑桔品种改良中心
出处
《果树学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第5期808-813,共6页
基金
长江学者和创新团队发展计划项目(PCSIRT)
国家高科技研究发展计划项目(863)(2011AA100205)
+2 种基金
柑桔产业技术体系(CARS-27)
农业部"引进国际先进农业科学技术"项目("948"计划)
中央高校基本科研业务费专项(XDJK2009C136)
文摘
三价铁螯合物还原酶(Ferric-chelator reductase,FCR)在植物对三价铁的吸收过程中起着关键作用,导入外源三价铁螯合物还原酶基因是改良植物耐缺铁能力的有效途径。香橙(Citrus junos Sieb.ex Tanaka)是目前表现最好的柑橘耐缺铁砧木之一,在铁胁迫时,香橙三价铁螯合物还原酶基因(CjFRO2)在根尖表皮细胞中高效表达,根系三价铁还原活性显著增强。以枳[Poncirus trifoliata(L.)Raf.]上胚轴为材料,利用根癌农杆菌介导法将CaMV 35S-CjFRO2基因表达单元导入枳基因组中,拟通过CjFRO2基因在转基因枳中的组成型表达,提高转基因枳的铁吸收能力。经过PCR检测,Southern杂交分析,获得4个单拷贝的转CjFRO2基因枳株系PF2、PF3、PF5和PF8。Real-TimePCR分析表明,CjFRO2基因在4个转基因枳株系中都能有效表达,并在其无性繁殖后代中也能够稳定表达。为培育耐缺铁优良柑橘砧木新品种奠定了基础。
关键词
香橙
三价铁螯合物还原酶基因
枳
Southern杂交分析
Real-TimePCR表达分析
Keywords
Citrus junos
Ferric-chelated Reductase
Poncirus trifoliata
Southern blot analysis
Real-Time PCR analysis
分类号
S666.4 [农业科学—果树学]
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职称材料
题名
柑橘转基因成分多重PCR检测体系的建立
被引量:
2
3
作者
李政利
彭爱红
邹修平
何永睿
姚利晓
陈善春
机构
西南大学园艺园林
学院
中国农业科学院柑桔研究所国家柑桔工程技术研究中心国家柑桔品种改良中心
出处
《安徽农业科学》
CAS
2012年第16期8845-8849,共5页
基金
重庆市重点实验室专项(CSTC)
"863"科技部农村领域国家科技计划课题(2011AA100205)
+1 种基金
农业部/公益性行业(农业)科研专项(201003067)
教育部科学技术研究重点项目(109131)
文摘
[目的]建立柑橘转基因成分的多重PCR检测体系。[方法]根据GenBank中pBI121质粒序列和柑橘(Citrus.)Actin基因序列,分别设计CaMV35S启动子、NOS启动子、NOS终止子特异引物和Actin基因的特异引物,建立能同时检测出4种序列的多重PCR检测体系,同时通过正交试验确定该体系的最佳引物浓度和比例及PCR反应体系中各因素的浓度及反应程序,并对该方法的灵敏度进行验证。[结果]试验得到的最佳MPCR反应体系为:10×buffer 2.5μl,25 mmol/L MgCl22.0μl;dNTP Mixture(2.5 mmol/L each)2.0μl,10μmol/L的Actin基因、35S启动子、NOS启动子、NOS终止子引物分别加入1.0、1.0、1.5、0.5μl,模板DNA 0.1μg,Taq DNA聚合酶1.25U,加ddH2O至25μl。PCR反应程序为:94℃预变性5 min;94℃30 s,64.1℃45 s,72℃50 s,31个循环;72℃10 min。试验中,经正交优化后的4重PCR反应灵敏度达0.1%。[结论]该研究建立的MPCR检测体系,理论上已能满足柑橘或其深加工产品的转基因成分检测。
关键词
多重PCR
正交试验
检测
转基因成分
Keywords
Multiplex PCR
Orthogonal test
Detection
Genetically modified ingredients
分类号
S188.1 [农业科学—农业基础科学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
柑桔转基因研究进展
彭爱红
何永睿
许兰珍
邹修平
刘小丰
姚利晓
雷天刚
陈善春
《热带作物学报》
CSCD
2011
5
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
CjFRO2在转基因枳中的整合与表达
刘小丰
彭爱红
许兰珍
雷天刚
姚利晓
何永睿
陈善春
《果树学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011
2
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
柑橘转基因成分多重PCR检测体系的建立
李政利
彭爱红
邹修平
何永睿
姚利晓
陈善春
《安徽农业科学》
CAS
2012
2
在线阅读
下载PDF
职称材料
已选择
0
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引用分析
参考文献
引证文献
统计分析
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