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柑桔转基因研究进展 被引量:5
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作者 彭爱红 何永睿 +5 位作者 许兰珍 邹修平 刘小丰 姚利晓 雷天刚 陈善春 《热带作物学报》 CSCD 2011年第7期1381-1387,共7页
柑桔基因工程育种因其具有周期短、效率高、可控性强等优点而成为柑桔育种的重要内容之一。本文就柑桔转基因研究的品种及外植体、柑桔转基因研究所采用的方法、导入柑桔的外源基因进行了综述,最后提出了柑桔遗传转化中存在的问题并对... 柑桔基因工程育种因其具有周期短、效率高、可控性强等优点而成为柑桔育种的重要内容之一。本文就柑桔转基因研究的品种及外植体、柑桔转基因研究所采用的方法、导入柑桔的外源基因进行了综述,最后提出了柑桔遗传转化中存在的问题并对柑桔转基因研究进行了展望。 展开更多
关键词 柑桔 转基因 育种
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CjFRO2在转基因枳中的整合与表达 被引量:2
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作者 刘小丰 彭爱红 +4 位作者 许兰珍 雷天刚 姚利晓 何永睿 陈善春 《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期808-813,共6页
三价铁螯合物还原酶(Ferric-chelator reductase,FCR)在植物对三价铁的吸收过程中起着关键作用,导入外源三价铁螯合物还原酶基因是改良植物耐缺铁能力的有效途径。香橙(Citrus junos Sieb.ex Tanaka)是目前表现最好的柑橘耐缺铁砧木之一... 三价铁螯合物还原酶(Ferric-chelator reductase,FCR)在植物对三价铁的吸收过程中起着关键作用,导入外源三价铁螯合物还原酶基因是改良植物耐缺铁能力的有效途径。香橙(Citrus junos Sieb.ex Tanaka)是目前表现最好的柑橘耐缺铁砧木之一,在铁胁迫时,香橙三价铁螯合物还原酶基因(CjFRO2)在根尖表皮细胞中高效表达,根系三价铁还原活性显著增强。以枳[Poncirus trifoliata(L.)Raf.]上胚轴为材料,利用根癌农杆菌介导法将CaMV 35S-CjFRO2基因表达单元导入枳基因组中,拟通过CjFRO2基因在转基因枳中的组成型表达,提高转基因枳的铁吸收能力。经过PCR检测,Southern杂交分析,获得4个单拷贝的转CjFRO2基因枳株系PF2、PF3、PF5和PF8。Real-TimePCR分析表明,CjFRO2基因在4个转基因枳株系中都能有效表达,并在其无性繁殖后代中也能够稳定表达。为培育耐缺铁优良柑橘砧木新品种奠定了基础。 展开更多
关键词 香橙 三价铁螯合物还原酶基因 Southern杂交分析 Real-TimePCR表达分析
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柑橘转基因成分多重PCR检测体系的建立 被引量:2
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作者 李政利 彭爱红 +3 位作者 邹修平 何永睿 姚利晓 陈善春 《安徽农业科学》 CAS 2012年第16期8845-8849,共5页
[目的]建立柑橘转基因成分的多重PCR检测体系。[方法]根据GenBank中pBI121质粒序列和柑橘(Citrus.)Actin基因序列,分别设计CaMV35S启动子、NOS启动子、NOS终止子特异引物和Actin基因的特异引物,建立能同时检测出4种序列的多重PCR检测体... [目的]建立柑橘转基因成分的多重PCR检测体系。[方法]根据GenBank中pBI121质粒序列和柑橘(Citrus.)Actin基因序列,分别设计CaMV35S启动子、NOS启动子、NOS终止子特异引物和Actin基因的特异引物,建立能同时检测出4种序列的多重PCR检测体系,同时通过正交试验确定该体系的最佳引物浓度和比例及PCR反应体系中各因素的浓度及反应程序,并对该方法的灵敏度进行验证。[结果]试验得到的最佳MPCR反应体系为:10×buffer 2.5μl,25 mmol/L MgCl22.0μl;dNTP Mixture(2.5 mmol/L each)2.0μl,10μmol/L的Actin基因、35S启动子、NOS启动子、NOS终止子引物分别加入1.0、1.0、1.5、0.5μl,模板DNA 0.1μg,Taq DNA聚合酶1.25U,加ddH2O至25μl。PCR反应程序为:94℃预变性5 min;94℃30 s,64.1℃45 s,72℃50 s,31个循环;72℃10 min。试验中,经正交优化后的4重PCR反应灵敏度达0.1%。[结论]该研究建立的MPCR检测体系,理论上已能满足柑橘或其深加工产品的转基因成分检测。 展开更多
关键词 多重PCR 正交试验 检测 转基因成分
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