葡萄病毒脱除技术研究进展 被引量：18

1

作者 胡国君 董雅凤 +3 位作者 张尊平 范旭东 任芳 朱红娟 《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期304-310,共7页

葡萄是我国的一种重要果树,在长期的无性繁殖过程中受扇叶病、卷叶病、皱木复合病和斑点病等多种病毒病的危害,给葡萄的产量和品质带来了严重的影响。在生产上,无病毒的繁殖材料是控制病毒病的主要途径。总结了茎尖培养、热处理、化学... 葡萄是我国的一种重要果树,在长期的无性繁殖过程中受扇叶病、卷叶病、皱木复合病和斑点病等多种病毒病的危害,给葡萄的产量和品质带来了严重的影响。在生产上,无病毒的繁殖材料是控制病毒病的主要途径。总结了茎尖培养、热处理、化学处理、体细胞胚再生、电疗法和超低温脱毒等方法的脱病毒原理及在葡萄病毒脱除中的应用效果,分析了不同方法所适合脱除的病毒种类。通过对上述研究进展的综述,以期为我国葡萄病毒脱除技术研究提供参考信息。 展开更多

关键词 葡萄 病毒 脱除

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葡萄试管苗热处理脱毒技术研究 被引量：10

2

作者 张尊平 范旭东 +3 位作者 胡国君 任芳 朱红娟 董雅凤 《中国果树》 北大核心 2013年第1期39-41,共3页

为加快培育葡萄优良品种无病毒苗木,提高脱毒效率,开展了葡萄试管苗热处理脱毒技术研究。将携带葡萄扇叶病毒(GFLV)、葡萄斑点病毒(GFkV)、沙地葡萄茎痘相关病毒(GRSPaV)、葡萄卷叶相关病毒-1(GLRaV-1)和葡萄卷叶相关病毒-2(GLRaV-2)的... 为加快培育葡萄优良品种无病毒苗木,提高脱毒效率,开展了葡萄试管苗热处理脱毒技术研究。将携带葡萄扇叶病毒(GFLV)、葡萄斑点病毒(GFkV)、沙地葡萄茎痘相关病毒(GRSPaV)、葡萄卷叶相关病毒-1(GLRaV-1)和葡萄卷叶相关病毒-2(GLRaV-2)的8个葡萄品种试管苗进行恒温热处理,对分离成活的62个茎尖进行RT-PCR和ELISA检测。结果显示,62个茎尖中,29个茎尖脱除了上述5种病毒,葡萄卷叶相关病毒-1、葡萄斑点病毒、葡萄扇叶病毒、葡萄卷叶相关病毒-2和沙地葡萄茎痘病毒的脱毒率分别为81.8%、80.0%、78.1%、75.0%和61.5%。采用试管苗热处理结合茎尖培养方法可获得良好的脱毒效果,适用于葡萄无病毒原种母本树的培育。 展开更多

关键词 葡萄 葡萄病毒 热处理 脱毒 茎尖培养

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苹果脱毒技术研究进展 被引量：4

3

作者 胡国君 董雅凤 +3 位作者 张尊平 范旭东 任芳 朱红娟 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期7-12,共6页

苹果(Malus pumila Mill.)普遍感染病毒。目前,培育无病毒原种母本树,建立用于繁殖接穗和营养系砧木的母本园,栽植无病毒苗木,是防治病毒病的根本措施。本文针对常见的4种苹果病毒及1种类病毒,综述了茎尖培养、热处理、化学处理、微茎... 苹果(Malus pumila Mill.)普遍感染病毒。目前,培育无病毒原种母本树,建立用于繁殖接穗和营养系砧木的母本园,栽植无病毒苗木,是防治病毒病的根本措施。本文针对常见的4种苹果病毒及1种类病毒,综述了茎尖培养、热处理、化学处理、微茎尖嫁接以及低温处理脱除苹果病毒方法的研究进展,分析了不同方法的应用效果,及所适合脱除的病毒种类,以期为我国苹果病毒脱除技术研究提供参考信息。 展开更多

关键词 苹果 病毒 脱除

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医用抗病毒剂脱除葡萄病毒的初步研究 被引量：1

4

作者 胡国君 董雅凤 +3 位作者 张尊平 范旭东 任芳 朱红娟 《山西农业科学》 2013年第6期607-610,共4页

以携带葡萄(Vitis spp.)斑点病毒(GFkV)、沙地葡萄茎痘伴随病毒(GRSPaV)、葡萄病毒A(GVA)、葡萄卷叶伴随病毒-1(GLRaV-1)、葡萄卷叶伴随病毒-2(GLRaV-2)、葡萄卷叶伴随病毒-3(GLRaV-3)和葡萄卷叶伴随病毒-6(GLRaV-6)等病毒的8个葡萄品... 以携带葡萄(Vitis spp.)斑点病毒(GFkV)、沙地葡萄茎痘伴随病毒(GRSPaV)、葡萄病毒A(GVA)、葡萄卷叶伴随病毒-1(GLRaV-1)、葡萄卷叶伴随病毒-2(GLRaV-2)、葡萄卷叶伴随病毒-3(GLRaV-3)和葡萄卷叶伴随病毒-6(GLRaV-6)等病毒的8个葡萄品种试管苗样品为材料,采用不同质量浓度的医用抗病毒剂利巴韦林注射液进行脱毒处理。结果发现,葡萄植株的死亡率较高,设置的4个质量浓度处理中,只有加入25 mg/L利巴韦林注射液处理的试管苗样品获得了再生植株。对分离成活的茎尖进行RT-PCR检测,结果表明,获得的5个葡萄品种的9株再生植株中,只有维多利亚的2株检测带有GRSPaV,其余均不带有所检病毒。 展开更多

关键词 葡萄 脱毒 抗病毒剂

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用于苹果树病毒鉴定的small RNA深度测序数据集 被引量：1

5

作者 胡国君 董雅凤 +2 位作者 张尊平 范旭东 任芳 《农业大数据学报》 2022年第2期25-29,共5页

病毒病是为害苹果的重要致病因子,开展病毒种类鉴定是防控苹果病毒病的首要任务。由于苹果长期通过嫁接的方式进行繁育,导致树体感染多种病毒,加之苹果病毒的浓度较低,序列变异较大,致使苹果病毒种类的鉴定尤为困难。此外,现有的分子检... 病毒病是为害苹果的重要致病因子,开展病毒种类鉴定是防控苹果病毒病的首要任务。由于苹果长期通过嫁接的方式进行繁育,导致树体感染多种病毒,加之苹果病毒的浓度较低,序列变异较大,致使苹果病毒种类的鉴定尤为困难。此外,现有的分子检测技术主要为聚合酶链式反应和分子杂交技术,这些技术基于已知病毒核苷酸序列为基础开展鉴定,而对于未知病毒,由于其核苷酸序列尚未测定,则无法采用这些分子技术进行鉴定。针对这一瓶颈,该文提供了一个自然生长的苹果树的small RNA (sRNA)深度测序的数据集,通过结合生物信息学方法对原始数据进行过滤、sRNA组装及Blast比对,可准确地分析和判断自然条件下病毒的种类,为苹果病毒的鉴定带来了新的突破,同时也为苹果无毒苗木的判定提供技术支撑。 展开更多

关键词 苹果 病毒 鉴定 small RNA测序 生物信息学

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我国葡萄扇叶衰退病相关病毒研究进展 被引量：2

6

作者 范旭东 胡国君 +5 位作者 陈绍莉 任芳 杜乃凡 战良 张尊平 董雅凤 《中国果树》 北大核心 2023年第9期1-5,共5页

葡萄扇叶衰退病(grapevine fanleaf degeneration disease,GFDD)是葡萄栽培中常见的病毒病害,在我国葡萄产区发生普遍,危害严重。引起该病的病毒种类有10余种,症状表现受葡萄品种、病毒种类、栽培条件等多种因素影响。由于高通量测序技... 葡萄扇叶衰退病(grapevine fanleaf degeneration disease,GFDD)是葡萄栽培中常见的病毒病害,在我国葡萄产区发生普遍,危害严重。引起该病的病毒种类有10余种,症状表现受葡萄品种、病毒种类、栽培条件等多种因素影响。由于高通量测序技术的发展与应用,我国鉴定发现了除葡萄扇叶病毒(grapevine fanleaf virus,GFLV)之外的3种GFDD相关病毒,即葡萄浆果内坏死病毒(grapevine berry inner necrosis virus,GINV)、灰比诺葡萄病毒(grapevine Pinot gris virus,GPGV)和葡萄蚕豆萎蔫病毒(grapevine fabavirus,GFabV)。系统综述了我国GFDD的主要病原及其侵染状况,可为该病害的精准防控提供参考。 展开更多

关键词 葡萄扇叶衰退病 葡萄扇叶病毒 葡萄浆果内坏死病毒 灰比诺葡萄病毒 葡萄蚕豆萎蔫病毒

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苹果试管苗携带病毒种类数量与脱除效率的关系

7

作者 胡国君 张尊平 +4 位作者 范旭东 任芳 翟秀丽 时晓燕 董雅凤 《中国果树》 北大核心 2022年第5期57-61,F0003,共6页

以感染不同种类和数量病毒的富嘎、维纳斯黄金、新2001富士苹果试管苗为材料,分别采用热处理(36℃)和热处理结合化学处理(36℃+25μg/mL病毒醚)脱毒。处理过程中,维纳斯黄金表现出良好的耐热性,富嘎耐热性较差,处理结束时,新2001富士2... 以感染不同种类和数量病毒的富嘎、维纳斯黄金、新2001富士苹果试管苗为材料,分别采用热处理(36℃)和热处理结合化学处理(36℃+25μg/mL病毒醚)脱毒。处理过程中,维纳斯黄金表现出良好的耐热性,富嘎耐热性较差,处理结束时,新2001富士2组脱毒处理植株株高和增殖系数显著低于对照组植株。对再生植株的成活率分析发现,维纳斯黄金平均成活率最高,为83.2%,富嘎和新2001富士的差别不大,分别为64.0%和59.2%。采用RT-PCR方法对再生植株进行病毒检测。结果显示,富嘎、维纳斯黄金的脱毒率较高,分别为94.7%、88.9%;新2001富士的较低,为46.2%;ACLSV、ASGV和ASPV的平均脱除率分别为56.1%、41.0%和63.9%。比较不同品种和不同病毒的脱除效率发现,苹果病毒的脱除效率与病毒的数量不存在明显的相关性,但与病毒的种类关系密切。 展开更多

关键词 苹果病毒 脱毒 热处理 热处理结合化学处理 脱除效率

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我国葡萄主栽区卷叶病相关病毒种类的检测分析 被引量：11

8

作者 裴光前 董雅凤 +2 位作者 张尊平 范旭东 任芳 《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期463-468,I0001,共7页

田间调查200个葡萄品种,结果82个品种表现葡萄卷叶病症状,其中欧亚种群表现葡萄卷叶病症状的品种最多,发病率最高,发病症状最重;欧美杂种发病率和严重度均比欧亚种群低;未发现美洲种群的品种表现葡萄卷叶病症状。从58株表现卷叶病的葡... 田间调查200个葡萄品种,结果82个品种表现葡萄卷叶病症状,其中欧亚种群表现葡萄卷叶病症状的品种最多,发病率最高,发病症状最重;欧美杂种发病率和严重度均比欧亚种群低;未发现美洲种群的品种表现葡萄卷叶病症状。从58株表现卷叶病的葡萄上采集休眠枝条进行卷叶病毒ELISA和RT-PCR检测,葡萄卷叶病毒-1,2,3,4,5和7(GLRaV-1,2,3,4,5和7)等6种葡萄卷叶病毒的检出率分别为20.7%,17.2%,62.1%,3.4%,5.2%和15.5%。回收PCR产物进行克隆和序列分析,并将测序结果提交至GeneBank。以葡萄卷叶病毒HSP70基因序列构建系统进化树分析其进化关系,GLRaV-1、3和7,GLRaV-2、4和5分别聚为2大类,其中GLRaV-1和3,GLRaV-4和5在各自的聚类中关系更近。 展开更多

关键词 葡萄卷叶病毒 田间调查 ELISA RT-PCR 进化树

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苹果坏死花叶病毒实时荧光定量PCR检测体系的建立 被引量：11

9

作者 胡国君 张尊平 +5 位作者 范旭东 任芳 马勉娣 张秀英 鲁兴凯 董雅凤 《中国果树》 北大核心 2021年第5期13-17,共5页

根据GenBank数据库已登录序列设计了12对苹果坏死花叶病毒(apple necrotic mosaic virus,ApNMV)的检测引物,通过引物筛选和体系优化,建立了以ApN1-F3/R3为引物的ApNMV的TB Green染料法实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR... 根据GenBank数据库已登录序列设计了12对苹果坏死花叶病毒(apple necrotic mosaic virus,ApNMV)的检测引物,通过引物筛选和体系优化,建立了以ApN1-F3/R3为引物的ApNMV的TB Green染料法实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)检测技术。该技术标准曲线循环阈值与模板浓度呈良好的线性关系,扩增效率为97.3%,相关系数为0.997,灵敏度是常规PCR的100倍。采用q PCR方法对60份田间苹果样品进行检测,结果显示,常规PCR对ApNMV的检出率为51.7%,而qPCR的检出率为56.7%。该技术适用于田间样品的检测。 展开更多

关键词 苹果 苹果坏死花叶病毒 实时荧光定量PCR 常规PCR

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葡萄卷叶伴随病毒2实时荧光定量RT-PCR技术的检测应用 被引量：4

10

作者 任芳 张尊平 +3 位作者 范旭东 胡国君 张梦妍 董雅凤 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期180-187,共8页

通过引物筛选和体系优化建立了葡萄卷叶伴随病毒2 Grapevine leafroll-associated virus 2(GLRaV-2)的SYBR GreenⅠ染料法实时荧光定量RT-PCR检测技术。该技术标准曲线扩增效率为102.2%,决定系数为0.999,最低检出限可达10-3稀释梯度,是... 通过引物筛选和体系优化建立了葡萄卷叶伴随病毒2 Grapevine leafroll-associated virus 2(GLRaV-2)的SYBR GreenⅠ染料法实时荧光定量RT-PCR检测技术。该技术标准曲线扩增效率为102.2%,决定系数为0.999,最低检出限可达10-3稀释梯度,是常规RT-PCR的100倍。对不同季节和不同部位葡萄样品的检出率普遍高于常规RT-PCR。春夏秋季样品检出率分别为67%、89%和86%,比常规RT-PCR检出率分别高42%、28%和17%。冬季休眠枝条检出率最高(100%),与常规RT-PCR相同。夏季老叶柄和卷须、秋季和冬季枝条等样品检测效果最好,检出率均为100%。对来自我国17个省38个品种的116份田间葡萄样品检测结果表明,qRT-PCR共检测到10个样品为阳性,检出率略高于常规RT-PCR。 展开更多

关键词 葡萄 葡萄卷叶伴随病毒2 实时荧光定量RT-PCR 常规RT-PCR 检测

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葡萄病毒B CP基因植物表达载体构建及烟草遗传转化 被引量：3

11

作者 任芳 张尊平 +3 位作者 范旭东 胡国君 李正男 董雅凤 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期11-16,30,共7页

葡萄病毒B Grapevine virus B(GVB)是葡萄皱木复合病中栓皮病的病原,为开展抗GVB转基因研究,本研究利用RT-PCR技术克隆GVB外壳蛋白(coat protein,CP)基因,与植物表达载体pRI 101-AN连接构建植物表达载体pRI-GVB CP。采用电击转化法将植... 葡萄病毒B Grapevine virus B(GVB)是葡萄皱木复合病中栓皮病的病原,为开展抗GVB转基因研究,本研究利用RT-PCR技术克隆GVB外壳蛋白(coat protein,CP)基因,与植物表达载体pRI 101-AN连接构建植物表达载体pRI-GVB CP。采用电击转化法将植物表达载体pRI-GVB CP导入农杆菌LBA4404,并利用农杆菌介导的叶盘转化法将外源基因导入西方烟‘37B’。共获得16个烟草再生株系,PCR检测其中3个株系为阳性,阳性株系播种获得的64株T_1代植株中有30株扩增到目的条带,阳性率为46.9%,表明目的基因GVB cp成功导入烟草并可成功遗传到子代。28株T_1代转基因植株接种病毒进行抗病性鉴定,其中有6株对接种病毒GVB具有抗性。 展开更多

关键词 葡萄病毒B 外壳蛋白基因 植物表达载体 烟草 遗传转化

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葡萄卷叶伴随病毒4和5简并引物和多重PCR检测 被引量：1

12

作者 范旭东 董雅凤 +2 位作者 张尊平 任芳 裴光前 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期95-97,114,共4页

研究建立了葡萄卷叶伴随病毒4和5(Grapevine leafroll associated virus 4and 5,GLRaV-4and 5)的简并引物及多重PCR检测方法。比较了单一PCR、多重PCR和简并引物检测方法的灵敏度,并对简并引物的特异性进行了分析。结果表明,采用简并引... 研究建立了葡萄卷叶伴随病毒4和5(Grapevine leafroll associated virus 4and 5,GLRaV-4and 5)的简并引物及多重PCR检测方法。比较了单一PCR、多重PCR和简并引物检测方法的灵敏度,并对简并引物的特异性进行了分析。结果表明,采用简并引物和多重PCR对这两种病毒进行检测,其灵敏度与单一PCR相同,且简并引物仅对葡萄卷叶伴随病毒4和5具有特异性。本研究建立的方法能够同时、快速、灵敏地检测上述2种葡萄卷叶病毒,提高了检测效率,降低了检测费用。 展开更多

关键词 葡萄卷叶伴随病毒4和5 多重RT-PCR 检测 简并引物

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5种苹果病毒多重PCR检测体系的建立 被引量：1

13

作者 胡国君 范旭东 +4 位作者 李军 任芳 孙喜陈 张尊平 董雅凤 《中国果树》 北大核心 2023年第10期79-83,88,共6页

苹果褪绿叶斑病毒(ACLSV)、苹果茎沟病毒(ASGV)、苹果茎痘病毒(ASPV)、苹果坏死花叶病毒(ApNMV)和苹果锈果类病毒(ASSVd)是影响我国苹果产业健康发展的重要病毒病害,建立快速、准确的检测方法是防控病毒病的基础。分别设计了ACLSV、ApNM... 苹果褪绿叶斑病毒(ACLSV)、苹果茎沟病毒(ASGV)、苹果茎痘病毒(ASPV)、苹果坏死花叶病毒(ApNMV)和苹果锈果类病毒(ASSVd)是影响我国苹果产业健康发展的重要病毒病害,建立快速、准确的检测方法是防控病毒病的基础。分别设计了ACLSV、ApNMV和ASSVd 3种病毒的检测引物ACL-F1/R1、ApN-F2/R2和ASS-F1/R1,片段的大小分别为1112、1025、213 bp。利用新设计和已报道的苹果病毒特异性引物,通过引物检测效果比较、组合筛选、用量优化及退火温度调试,建立了5种苹果病毒多重PCR检测体系。该检测体系的扩增片段大小分别为ACLSV1112 bp、ApNMV640 bp、ASGV449 bp、ASPV349 bp和ASSVd213 bp。利用多重PCR和单一PCR分别对50份田间苹果样品进行病毒检测,结果显示,各样品多重PCR检测与单一PCR检测结果一致,表明本研究建立的多重RT-PCR方法可准确、快速、高效地检测单一或复合侵染的5种苹果病毒。 展开更多

关键词 苹果 苹果褪绿叶斑病毒 苹果茎沟病毒 苹果茎痘病毒 苹果坏死花叶病毒 苹果锈果类病毒 多重PCR

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沙地葡萄茎痘伴随病毒双重巢式RT-PCR检测方法的建立与应用 被引量：1

14

作者 胡国君 张尊平 +4 位作者 范旭东 任芳 翟秀丽 时晓燕 董雅凤 《中国果树》 北大核心 2022年第8期39-43,共5页

根据GenBank数据库中的沙地葡萄茎痘伴随病毒(grapevine rupestris stem pitting-associated virus,GRSPaV)全基因组序列设计了2组巢式RT-PCR检测引物repF1/R1→repF2/R2和cpF1/R1→cpF2/R2,扩增片段分别为902 bp和438 bp。通过对第1轮... 根据GenBank数据库中的沙地葡萄茎痘伴随病毒(grapevine rupestris stem pitting-associated virus,GRSPaV)全基因组序列设计了2组巢式RT-PCR检测引物repF1/R1→repF2/R2和cpF1/R1→cpF2/R2,扩增片段分别为902 bp和438 bp。通过对第1轮PCR扩增中引物组合repF1/R1-cpF1/R1、dNTPs、Taq DNA聚合酶和cDNA用量的优化,以及第2轮PCR扩增中引物组合repF2/R2-cpF2/R2、dNTPs和Taq DNA聚合酶用量的优化,建立了GRSPaV双重巢式RT-PCR检测方法。采用该方法对109份葡萄样品进行检测,结果显示,2对普通PCR引物RSP 52/53和RSP 9F/9R的合计检出率为65.1%,2组单一巢式PCR引物repF1/R1→repF2/R2和cpF1/R1→cpF2/R2的检出率总和为93.6%,而双重巢式PCR引物组合repF1/R1-cpF1/R1→repF2/R2-cpF2/R2的检出率也达到93.6%。该技术在保证检测效率的基础上降低了检测成本,适用于大量田间样品的检测。 展开更多

关键词 葡萄 沙地葡萄茎痘伴随病毒 巢式RT-PCR 双重巢式RT-PCR

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发展葡萄无毒化栽培 控制病毒病危害 被引量：6

15

作者 董雅凤 刘凤之 +2 位作者 张尊平 王宝亮 张少瑜 《中外葡萄与葡萄酒》 2007年第3期37-41,共5页

病毒病是影响葡萄生长发育、产量和品质的重要因素,栽培无病毒苗木是控制葡萄病毒病危害的根本措施。本文简要论述了世界葡萄病毒病研究与无毒化栽培概况、我国葡萄病毒病发生状况、葡萄病毒病的危害、无病毒苗木的优越性、我国发展葡... 病毒病是影响葡萄生长发育、产量和品质的重要因素,栽培无病毒苗木是控制葡萄病毒病危害的根本措施。本文简要论述了世界葡萄病毒病研究与无毒化栽培概况、我国葡萄病毒病发生状况、葡萄病毒病的危害、无病毒苗木的优越性、我国发展葡萄无毒化栽培所具备的条件以及发展葡萄无毒化栽培存在的问题。 展开更多

关键词 葡萄 病毒病 危害 无毒化栽培

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葡萄病毒及类似病害指示植物鉴定初报 被引量：4

16

作者 张尊平 董雅凤 +1 位作者 范旭东 裴光前 《中外葡萄与葡萄酒》 2010年第1期22-24,共3页

葡萄指示植物可以鉴定多种葡萄病毒及类似病害。采用绿枝嫁接技术分别在指示植物110R、Kober5BB、河岸葡萄、沙地葡萄圣乔治和LN33上嫁接18个葡萄样品。结果表明,在河岸葡萄上观察到脉斑驳病典型症状,在110R上观察到脉坏死病典型症状,... 葡萄指示植物可以鉴定多种葡萄病毒及类似病害。采用绿枝嫁接技术分别在指示植物110R、Kober5BB、河岸葡萄、沙地葡萄圣乔治和LN33上嫁接18个葡萄样品。结果表明,在河岸葡萄上观察到脉斑驳病典型症状,在110R上观察到脉坏死病典型症状,在沙地葡萄圣乔治上观察到斑点病和扇叶病典型症状,在Kober5BB上观察到叶片黄斑和皱缩症状,在LN33上观察到卷叶病症状。其中河岸葡萄显症最早,嫁接后3个月即表现症状,其余则在第2年春季开始表现症状。 展开更多

关键词 葡萄病毒病 病毒类似病害 指示植物 鉴定

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4种葡萄类病毒检测及序列分析 被引量：5

17

作者 范旭东 董雅凤 +1 位作者 张尊平 任芳 《中外葡萄与葡萄酒》 2011年第3期13-17,共5页

采用苹果锈果类病毒属(Apscaviroid)保守区域设计的通用引物和4种葡萄类病毒特异引物,对采自辽宁、山东、新疆、甘肃和宁夏的48个葡萄样品进行RT-PCR检测及序列分析。结果表明,葡萄黄斑类病毒1(Grapevine yellow speckle viroid 1,GYSV... 采用苹果锈果类病毒属(Apscaviroid)保守区域设计的通用引物和4种葡萄类病毒特异引物,对采自辽宁、山东、新疆、甘肃和宁夏的48个葡萄样品进行RT-PCR检测及序列分析。结果表明,葡萄黄斑类病毒1(Grapevine yellow speckle viroid 1,GYSVd1)、葡萄黄斑类病毒2(Grapevine yellow speckle viroid 2,GYSVd2)、澳大利亚葡萄类病毒(Australian grapevine viroid,AGVd)和啤酒花矮化类病毒(Hop stunt viroid,HSVd)检出率分别为41.7%、22.9%、75%和83.3%。通用引物能够检测出大部分样品中的GYSVd1、GYSVd2、AGVd。序列分析结果显示,中国辽宁兴城GYSVd1分离物(GU170805)属于TypeⅠ,与澳大利亚TypeⅠ分离物同源性为99%,与澳大利亚及日本TypeⅡ分离物同源性为97%,与中国GYSVd3分离物及美国、日本TypeⅢ分离物同源性仅为89%,而与GYSVd2分离物同源性均在80%以下。GYSVd2扩增产物(HM211853)与其余分离物的相似性在97%以上,与两个北京分离物DQ377131和DQ377129最为相似,相似性为99%。辽宁AGVd分离物(HM211854)与其他分离物同源性都在97%以上。山东HSVd分离物(HM357802)与北京、日本葡萄分离物的同源性均在98%以上,与德国葡萄分离物同源性为97%,与马铃薯、啤酒花、柑橘等其他作物上的分离物同源性为97%以下。 展开更多

关键词 葡萄类病毒 RT-PCR检测 序列分析

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葡萄病毒病及其防治 被引量：2

18

作者 董雅凤 张尊平 +2 位作者 范旭东 任芳 裴光前 《果树实用技术与信息》 2010年第6期30-32,共3页

葡萄是我国的主栽果树，近年来，生产规模迅速扩大，2007年栽培面积达43．84万公顷、产量达669．68万吨，分别比2000年增长了54．9％和104％。随着我国葡萄产业的迅速发展。葡萄栽培面积和苗木繁育数量急剧增加，与此同时，主要通过苗... 葡萄是我国的主栽果树，近年来，生产规模迅速扩大，2007年栽培面积达43．84万公顷、产量达669．68万吨，分别比2000年增长了54．9％和104％。随着我国葡萄产业的迅速发展。葡萄栽培面积和苗木繁育数量急剧增加，与此同时，主要通过苗木和繁殖材料传播的嫁接传染性病害也进一步扩展蔓延，危害日益严重。 展开更多

关键词 葡萄产业 病毒病 防治 栽培面积 苗木繁育 传染性病害 生产规模 繁殖材料

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苹果优新品种无病毒母本树的培育

19

作者 董雅凤 张尊平 +2 位作者 范旭东 李丽丽 裴光前 《浙江农业科学》 2009年第3期469-471,共3页

采用盆苗或试管苗热处理方法对昂林等16个苹果优新品种进行脱毒处理,采用木本指示植物2重芽接法和RT-PCR技术检测ASGV、ASPV和ACLSV 3种病毒,共获得11个苹果品种35株无病毒母本树,其中,盆苗热处理平均脱毒株率为46.1%,试管苗热处理平均... 采用盆苗或试管苗热处理方法对昂林等16个苹果优新品种进行脱毒处理,采用木本指示植物2重芽接法和RT-PCR技术检测ASGV、ASPV和ACLSV 3种病毒,共获得11个苹果品种35株无病毒母本树,其中,盆苗热处理平均脱毒株率为46.1%,试管苗热处理平均脱毒株率为79.2%。 展开更多

关键词 苹果无病毒母本树 脱毒 检测

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基于RT-PCR检测对6个香味葡萄品种感染病毒状况的分析 被引量：6

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作者 李晨 范旭东 +4 位作者 张尊平 胡国君 任芳 张宝东 董雅凤 《中国果树》 北大核心 2021年第2期66-69,共4页

为明确我国6个香味葡萄品种感染病毒的状况,2018—2019年采用RT-PCR方法,对来源于13个省(市、自治区)的212个样品进行了14种葡萄病毒的检测。结果显示:‘阳光玫瑰’‘玫瑰香’‘巨峰’‘夏黑’‘水晶葡萄’‘着色香’的带毒株率分别为93... 为明确我国6个香味葡萄品种感染病毒的状况,2018—2019年采用RT-PCR方法,对来源于13个省(市、自治区)的212个样品进行了14种葡萄病毒的检测。结果显示:‘阳光玫瑰’‘玫瑰香’‘巨峰’‘夏黑’‘水晶葡萄’‘着色香’的带毒株率分别为93.22%、67.74%、82.98%、63.33%、27.27%、43.48%;以上各品种检出的病毒种类数分别为13、10、10、8、3、3种,其中分布较广的为沙地葡萄茎痘相关病毒(GRSPaV)、葡萄斑点病毒(GFkV)和葡萄卷叶相关病毒3(GLRaV-3)。 展开更多

关键词 香味葡萄 葡萄病毒 病毒检测 RT-PCR

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