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题名大豆种子蛋白质组样品制备方法研究
被引量：3
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作者
林杨杰
赵明
杨生超
潘映红
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机构
云南农业大学农学与生物技术学院
中国农业科学院国家农作物基因资源与基因改良重大科学工程
中国农业科学院作物科学研究所
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出处
《大豆科学》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第5期810-817,共8页
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基金
中国农业科学院科技创新工程(作物分子标记技术及其应用科研创新团队)
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文摘
以中黄13大豆成熟种子为材料,采用苯酚甲醇醋酸铵法、三氯乙酸丙酮法和尿素硫脲法进行了蛋白质初提与复提,并利用纳升级液相色谱串联质谱技术(Nano LC-MS/MS)分析比较了尿素硫脲法初提和尿素硫脲法初提后苯酚甲醇醋酸铵法复提的样品,以及一维电泳预分离的尿素硫脲法初提样品,旨在构建能有效提高蛋白质提取率和鉴定率的样品制备方法。结果表明:尿素硫脲法初提结合苯酚甲醇醋酸铵法复提的蛋白得率最高,分别达到29.18%与4.08%;尿素硫脲法初提与尿素硫脲法初提后苯酚甲醇醋酸铵法复提样品中共鉴定到2 246个蛋白质组,初提和复提样品之间差异十分明显;每次独立制备的尿素硫脲法初提样品平均可鉴定到1 167个蛋白质组,经一维电泳预分离后平均可鉴定到1 868个蛋白质组。研究表明,采用适当的蛋白质样品制备和预分离方法,能有效提高大豆种子蛋白质的提取率和鉴定率。
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关键词
大豆种子
蛋白质组学
样品制备
纳升级液相色谱串联质谱
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Keywords
Soybean seed
Proteomics
Sample preparation
Nano LC-MS/MS
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分类号
S565.1
[农业科学—作物学]
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