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宿主细胞erp57基因敲除抑制流感病毒复制的研究
被引量：
1
1
作者
胡丹
王斌
+4 位作者
冷有龙
王玉杰
于群
郑永辉
范春玲
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第6期429-433,共5页
ERp57是细胞内质网内的蛋白二硫键异构酶家族成员,可以催化蛋白二硫键的合成以促进蛋白折叠。为研究erp57基因敲除对流感病毒复制的影响,本研究通过CRISPR/Cas9技术构建了erp57基因的向导RNA(g RNA)敲除质粒p GEM-erp57g RNA,并将其与p ...
ERp57是细胞内质网内的蛋白二硫键异构酶家族成员,可以催化蛋白二硫键的合成以促进蛋白折叠。为研究erp57基因敲除对流感病毒复制的影响,本研究通过CRISPR/Cas9技术构建了erp57基因的向导RNA(g RNA)敲除质粒p GEM-erp57g RNA,并将其与p Cas9-EGFP共转染至人肺腺癌细胞A549中,采用流式分选及限制性稀释的方法筛选单细胞克隆株,通过靶基因组测序及western blot检测,筛选获得了erp57基因敲除的A549细胞系。erp57基因敲除细胞系与野生型细胞生长动力学无显著差异。此外,将H1N1亚型流感病毒分别感染野生型和erp57基因敲除细胞系以测定erp57基因敲除对流感病毒复制水平的影响。结果显示流感病毒在erp57基因敲除细胞中的复制显著地受到了抑制,表明ERp57是流感病毒复制过程中的一个关键蛋白。本研究为开发新的抗流感病毒手段提供了相关的实验依据。
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关键词
erp57
CRISPR/Cas9系统
基因敲除
流感病毒
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职称材料
题名
宿主细胞erp57基因敲除抑制流感病毒复制的研究
被引量：
1
1
作者
胡丹
王斌
冷有龙
王玉杰
于群
郑永辉
范春玲
机构
黑龙江八一农垦
大学
动物科技
学院
中国农业科学院哈尔滨兽医研究所-美国密歇根州立大学天然免疫联合实验室/兽医生物技术国家重点实验室
出处
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第6期429-433,共5页
基金
国家自然科学基金(31502089)
黑龙江八一农垦大学研究生创新科研项目(YJSCX2015-Y26)
+1 种基金
黑龙江省教育厅科学技术研究项目(12541582)
兽医生物技术国家重点实验室自主课题(SKLVBP2015012)
文摘
ERp57是细胞内质网内的蛋白二硫键异构酶家族成员,可以催化蛋白二硫键的合成以促进蛋白折叠。为研究erp57基因敲除对流感病毒复制的影响,本研究通过CRISPR/Cas9技术构建了erp57基因的向导RNA(g RNA)敲除质粒p GEM-erp57g RNA,并将其与p Cas9-EGFP共转染至人肺腺癌细胞A549中,采用流式分选及限制性稀释的方法筛选单细胞克隆株,通过靶基因组测序及western blot检测,筛选获得了erp57基因敲除的A549细胞系。erp57基因敲除细胞系与野生型细胞生长动力学无显著差异。此外,将H1N1亚型流感病毒分别感染野生型和erp57基因敲除细胞系以测定erp57基因敲除对流感病毒复制水平的影响。结果显示流感病毒在erp57基因敲除细胞中的复制显著地受到了抑制,表明ERp57是流感病毒复制过程中的一个关键蛋白。本研究为开发新的抗流感病毒手段提供了相关的实验依据。
关键词
erp57
CRISPR/Cas9系统
基因敲除
流感病毒
Keywords
erp57
CRISPR/Cas9 system
gene knockout
influenza virus
分类号
S852.65 [农业科学—基础兽医学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
宿主细胞erp57基因敲除抑制流感病毒复制的研究
胡丹
王斌
冷有龙
王玉杰
于群
郑永辉
范春玲
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2016
1
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