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生物技术与制药: 1; 作者孟庆文李媛 +1 位作者金红于康震《草食家畜》 2001年第S2期63-64,92,共3页; 关键词基因组学医药生物技术功能性重点实验室基因疗法蛋白质组学中国农业科学院哈尔滨兽医研究所临床试验; 在线阅读下载PDF 职称材料

鸡IL-2基因的克隆及序列测定被引量：15: 2; 作者陈奖励王欢 +4 位作者宋英晖宋秀龙陈红岩姜永厚卢景良《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2000年第4期11-13,共3页; 应用逆转录多聚酶链反应 (RT- PCR)技术 ,参照 Sundick发表的鸡白细胞介素 2 (IL- 2 ) c DNA基因序列 ,利用自行设计合成的 1对引物 ,从 Con A活化的 5周龄 HWL - SPF鸡脾细胞中 ,扩增出长 4 4 5bp的鸡IL- 2 c DNA基因 ,以 p UC119为载... 展开更多; 关键词鸡IL-2 分子克隆 RT-PCR 免疫传剂预防接种; 在线阅读下载PDF 职称材料

猪肺炎支原体P52蛋白的原核表达及抗血清制备被引量：4: 3; 作者曹培丽李媛 +3 位作者陈超郭丹辛九庆李继昌《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第7期572-576,共5页; 为表达猪肺炎支原体(Mhp)P52蛋白及制备其血清,本实验利用PCR从MhpJ株扩增P52基因,克隆到表达载体pET-30a中,获得重组质粒pET-P52,经IPTG诱导,通过SDS-PAGE和westernblot检测重组蛋白表达及其免疫学活性。以该重组蛋白为抗原免疫兔制备... 展开更多; 关键词猪肺炎支原体 P52蛋白原核表达抗血清; 在线阅读下载PDF 职称材料

基因免疫制备牛分枝杆菌MPB64抗原单克隆抗体被引量：3: 4; 作者刘建东刘思国 +4 位作者王春来宫强王勇迟磊赵昆《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第11期870-873,共4页; 为了建立针对牛分枝杆菌分泌抗原MPB64的检测手段,制备该抗原的单克隆抗体,构建真核表达载体pcDNA-mpb64,以原核表达并纯化的融合蛋白H-MPB64包被ELISA板,建立单克隆抗体检测方法。利用基因免疫方法免疫BALB/c小鼠,通过杂交瘤技术筛选... 展开更多; 关键词牛分枝杆菌MPB64蛋白基因免疫单克隆抗体; 在线阅读下载PDF 职称材料

赤羽病毒G1基因的真核表达及抗原性检测被引量：2: 5; 作者徐树兰童铁钢 +4 位作者白宇王群张维军孙庆歌吴东来《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期440-444,共5页; 通过RT-PCR获得赤羽病毒(AKAV)OBE-1株的G1基因,克隆至pMD18-T载体。经测序鉴定正确后,将该片段作为目的基因亚克隆至Bac-to-Bac杆状病毒表达系统中的pFastBacHTA转移载体质粒中,利用Tn7转座子与穿梭载体BacmidDNA同源重组,获得了重组... 展开更多; 关键词赤羽病毒 G1基因表达; 在线阅读下载PDF 职称材料

正链RNA病毒感染性克隆的构建策略及影响因素被引量：1: 6; 作者申识川冯力 +1 位作者时洪艳陈建飞《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第8期134-139,共6页; 利用全长cDNA构建感染性克隆是拯救RNA病毒的基础和关键,也是反向遗传技术的核心。文章综述了构建正链RNA病毒感染性克隆的基本思路和关键技术,总结了影响克隆感染性的因素,并对感染性克隆技术的应用做一简述。; 关键词正链RNA病毒感染性克隆构建影响因素; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名生物技术与制药: 1; 作者孟庆文李媛金红于康震; 机构中国农业科学院哈尔滨兽医研究所国家兽医生物技术重点实验室; 出处《草食家畜》 2001年第S2期63-64,92,共3页; 关键词基因组学医药生物技术功能性重点实验室基因疗法蛋白质组学中国农业科学院哈尔滨兽医研究所临床试验; 分类号 TQ460 [化学工程—制药化工]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名鸡IL-2基因的克隆及序列测定被引量：15: 2; 作者陈奖励王欢宋英晖宋秀龙陈红岩姜永厚卢景良; 机构中国农业科学院哈尔滨兽医研究所国家兽医生物技术重点实验室首都医科大学神经科学研究所; 出处《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2000年第4期11-13,共3页; 文摘应用逆转录多聚酶链反应 (RT- PCR)技术 ,参照 Sundick发表的鸡白细胞介素 2 (IL- 2 ) c DNA基因序列 ,利用自行设计合成的 1对引物 ,从 Con A活化的 5周龄 HWL - SPF鸡脾细胞中 ,扩增出长 4 4 5bp的鸡IL- 2 c DNA基因 ,以 p UC119为载体 ,克隆了扩增片段 ,经酶切鉴定及 DNA序列测定 ,确认为鸡 IL- 2基因 ,该序列与 Sundick报道的结果一致。对氨基酸的比较发现 ,鸡 IL - 2与牛 IL - 2和 IL - 15之间分别存在着 2 4 %及4 4 %的同源性 ,该基因系国内首次获得经序列测定证实的鸡 IL- 2 c DNA基因 ,这为今后进一步进行鸡 IL-; 关键词鸡IL-2 分子克隆 RT-PCR 免疫传剂预防接种; Keywords Chicken Interleukin-2 molecular cloning cDNA; 分类号 S852.42 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名猪肺炎支原体P52蛋白的原核表达及抗血清制备被引量：4: 3; 作者曹培丽李媛陈超郭丹辛九庆李继昌; 机构东北农业大学动物医学院中国农业科学院哈尔滨兽医研究所国家兽医生物技术重点实验室/动物细菌病研究室; 出处《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第7期572-576,共5页; 基金农业部院所长基金项目(2007); 文摘为表达猪肺炎支原体(Mhp)P52蛋白及制备其血清,本实验利用PCR从MhpJ株扩增P52基因,克隆到表达载体pET-30a中,获得重组质粒pET-P52,经IPTG诱导,通过SDS-PAGE和westernblot检测重组蛋白表达及其免疫学活性。以该重组蛋白为抗原免疫兔制备抗血清,采用间接ELISA检测抗血清效价,并利用抗血清通过间接免疫荧光检测P52基因在AD-293细胞中的表达情况。结果表明,PCR扩增目的基因为1202bp,SDS-PAGE检测重组蛋白大小约52ku,其表达量占菌体总蛋白的28%。Westernblot检测表明,目的蛋白能与Mhp阳性血清发生特异性反应,具有良好的免疫活性。间接免疫荧光检测到P52基因在AD-293细胞中表达。本研究为构建P52蛋白腺病毒载体疫苗奠定了基础。; 关键词猪肺炎支原体 P52蛋白原核表达抗血清; Keywords Mycoplasma hyopneumoniae P52 protein prokaryotic expression antisera; 分类号 S852.62 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名基因免疫制备牛分枝杆菌MPB64抗原单克隆抗体被引量：3: 4; 作者刘建东刘思国王春来宫强王勇迟磊赵昆; 机构中国农业科学院哈尔滨兽医研究所国家兽医生物技术重点实验室/动物细菌病研究室东北农业大学; 出处《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第11期870-873,共4页; 文摘为了建立针对牛分枝杆菌分泌抗原MPB64的检测手段,制备该抗原的单克隆抗体,构建真核表达载体pcDNA-mpb64,以原核表达并纯化的融合蛋白H-MPB64包被ELISA板,建立单克隆抗体检测方法。利用基因免疫方法免疫BALB/c小鼠,通过杂交瘤技术筛选出针对牛分枝杆菌分泌蛋白MPB64的单克隆抗体一株,并制备了腹水,经鉴定腹水效价达到1∶10240,采用硫酸铵沉淀法纯化腹水,纯化抗体效价为1∶8000,为今后研制分枝杆菌鉴定技术奠定基础。; 关键词牛分枝杆菌MPB64蛋白基因免疫单克隆抗体; Keywords Mycobacterium boris gene immunization McAb; 分类号 S852.43 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名赤羽病毒G1基因的真核表达及抗原性检测被引量：2: 5; 作者徐树兰童铁钢白宇王群张维军孙庆歌吴东来; 机构中国农业科学院哈尔滨兽医研究所国家兽医生物技术重点实验室人畜共患病室; 出处《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期440-444,共5页; 文摘通过RT-PCR获得赤羽病毒(AKAV)OBE-1株的G1基因,克隆至pMD18-T载体。经测序鉴定正确后,将该片段作为目的基因亚克隆至Bac-to-Bac杆状病毒表达系统中的pFastBacHTA转移载体质粒中,利用Tn7转座子与穿梭载体BacmidDNA同源重组,获得了重组杆状病毒DNA,用CELLFECTIN介导其转染Sf9昆虫细胞,获得重组杆状病毒BAC-G1P1。SDS-PAGE结果表明,感染BAC-G1P1后的Sf9昆虫细胞表达可溶形式的120ku目的蛋白,其大小与预期相符。Western blot和间接免疫荧光试验显示表达产物具有良好的免疫学活性。; 关键词赤羽病毒 G1基因表达; Keywords Akabane virus glycoprotein GI gene expression; 分类号 S852.659.5 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名正链RNA病毒感染性克隆的构建策略及影响因素被引量：1: 6; 作者申识川冯力时洪艳陈建飞; 机构东北农业大学生命科学学院中国农业科学院哈尔滨兽医研究所; 出处《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第8期134-139,共6页; 文摘利用全长cDNA构建感染性克隆是拯救RNA病毒的基础和关键,也是反向遗传技术的核心。文章综述了构建正链RNA病毒感染性克隆的基本思路和关键技术,总结了影响克隆感染性的因素,并对感染性克隆技术的应用做一简述。; 关键词正链RNA病毒感染性克隆构建影响因素; Keywords positive-strand RNA virus construction of infectious clone influence factors; 分类号 S601 [农业科学—园艺学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	生物技术与制药	孟庆文李媛金红于康震	《草食家畜》	2001	0	在线阅读下载PDF 职称材料
2	鸡IL-2基因的克隆及序列测定	陈奖励王欢宋英晖宋秀龙陈红岩姜永厚卢景良	《中国兽医杂志》 CAS 北大核心	2000	15	在线阅读下载PDF 职称材料
3	猪肺炎支原体P52蛋白的原核表达及抗血清制备	曹培丽李媛陈超郭丹辛九庆李继昌	《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心	2009	4	在线阅读下载PDF 职称材料
4	基因免疫制备牛分枝杆菌MPB64抗原单克隆抗体	刘建东刘思国王春来宫强王勇迟磊赵昆	《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心	2007	3	在线阅读下载PDF 职称材料
5	赤羽病毒G1基因的真核表达及抗原性检测	徐树兰童铁钢白宇王群张维军孙庆歌吴东来	《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心	2008	2	在线阅读下载PDF 职称材料
6	正链RNA病毒感染性克隆的构建策略及影响因素	申识川冯力时洪艳陈建飞	《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2009	1	在线阅读下载PDF 职称材料