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一株人源H1N1亚型猪流感病毒的进化分析与生物学特性研究被引量：16: 1; 作者唐续杨焕良 +8 位作者鄢明华李秀丽陈艳孟沙沙尹航辛晓光步志高乔传玲陈化兰《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期270-273,336,共5页; 为了解猪流感病毒(SIV)的变异情况,我们2009年11月从河北某养殖场采集呈流感症状的猪鼻拭子40份,接种10日龄SPF鸡胚,分离到一株猪流感病毒,通过RT-PCR和血凝抑制试验鉴定为H1N1亚型,命名为A/swine/Hebei/15/2009(H1N1),其全基因序列测... 展开更多; 关键词猪流感病毒人源H1N1亚型遗传演化分析抗原性分析致病性; 在线阅读下载PDF 职称材料

蛋白质组学主要实验技术的研究进展被引量：1: 2; 作者蔡冬冬王秀荣 +5 位作者石霖武嘉男陶乐蒙王馥梅包红梅陈化兰《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第7期680-683,共4页; 关键词蛋白质组学实验技术人类基因组计划后基因组时代相对稳定性基因组编码生命现象基因数量; 在线阅读下载PDF 职称材料

流感病毒抗原表位的研究进展被引量：1: 3; 作者孙晓东熊永忠 +1 位作者陈化兰王秀荣《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2011年第6期193-196,共4页; 流感病毒抗原表位的研究,不仅是对流感病毒致病机理和机体免疫系统反应的探究,还能很好地指导对流感的防治。作者从抗原表位的特点,流感病毒抗原表位的特点、研究进展及流感病毒抗原表位疫苗的应用几个方面进行了综述。; 关键词流感病毒抗原表位表位疫苗; 在线阅读下载PDF 职称材料

不对称RT-PCR结合芯片技术鉴别4种禽病的初步研究被引量：7: 4; 作者陶启蒙王秀荣 +4 位作者武嘉男石霖李雁冰包红梅陈化兰《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第12期954-958,共5页; 本研究结合非对称RT-PCR和基因芯片两种技术,构建可同时区分AIV的H5、H7、H9血凝素亚型和N1、N2神经氨酸酶亚型以及鸡传染性支气管炎病、新城疫病、鸡传染性法氏囊病的基因芯片。分别T/A克隆部分禽流感病毒的M基因,H5、H7、H9亚型HA基因... 展开更多; 关键词不对称PCR 基因芯片禽病禽流感亚型鉴别; 在线阅读下载PDF 职称材料

甲型H1N1流感病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立被引量：7: 5; 作者尹航杨焕良 +5 位作者陈艳孟沙沙刘丽萍辛晓光陈化兰乔传玲《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期36-39,共4页; 为建立快速检测甲型H1N1流感病毒[Influenza A(H1N1)pdm09]的TaqMan荧光定量PCR方法,本研究根据甲型H1N1流感病毒血凝素(HA)基因保守序列,设计并合成了特异性引物和TaqMan MGB探针,采用实时荧光定量PCR技术检测甲型H1N1流感病毒。使用... 展开更多; 关键词猪流感病毒 H1N1亚型 TAQMAN MGB探针实时荧光定量PCR; 在线阅读下载PDF 职称材料

AA肉鸡免疫禽流感油乳剂灭活疫苗细胞免疫应答的变化被引量：5: 6; 作者王彦妮曾显营 +2 位作者田国彬苏文陈化兰《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期141-145,共5页; 为了解肉鸡生长期内免疫前后的细胞免疫反应,本实验采用CD3/CD4/CD8三色流式细胞术、MTT法和Griess法依次检测了AA肉鸡免疫禽流感灭活疫苗和非免疫状态下外周血、胸腺和脾脏中T淋巴细胞及其亚群的相对含量、外周血中T淋巴细胞对PHA-P的... 展开更多; 关键词灭活疫苗 T淋巴细胞亚群 AA肉鸡 MTT法 Griess法; 在线阅读下载PDF 职称材料

区分禽流感病毒亚型诊断基因芯片的构建被引量：7: 7; 作者杨忠苹王秀荣 +4 位作者石霖田丽娜王煜陶启蒙陈化兰《中国动物检疫》 CAS 北大核心 2008年第10期29-32,共4页; 制备了可同时区分AIVH5、H7、H9血凝素亚型及N1、N2神经氨酸酶亚型的基因诊断芯片。试验以重组质粒为模板,进行PCR扩增,然后用异丙醇沉淀法进行纯化,制备探针及内参基因。将探针及内参基因用点样缓冲液稀释到0.3μg/μL后用芯片点样仪... 展开更多; 关键词禽流感基因芯片亚型鉴别; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名一株人源H1N1亚型猪流感病毒的进化分析与生物学特性研究被引量：16: 1; 作者唐续杨焕良鄢明华李秀丽陈艳孟沙沙尹航辛晓光步志高乔传玲陈化兰; 机构中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室/兽医生物国家重点开放实验室天津市畜牧兽医研究所; 出处《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期270-273,336,共5页; 基金国家973计划项目(2010CB534001) 哈尔滨市科技攻关计划(2009AA6BN078) 天津市科技支撑计划重大项目(10ZCZDNC02800); 文摘为了解猪流感病毒(SIV)的变异情况,我们2009年11月从河北某养殖场采集呈流感症状的猪鼻拭子40份,接种10日龄SPF鸡胚,分离到一株猪流感病毒,通过RT-PCR和血凝抑制试验鉴定为H1N1亚型,命名为A/swine/Hebei/15/2009(H1N1),其全基因序列测定及同源性分析发现,8个基因片段均与2000年左右H1N1人流感病毒有较高的同源性。系统遗传演化显示,该病毒分离株是由2000年人源H1N1流感病毒A/Dunedin/2/2000(H1N1)进化而来。抗原性分析显示该株与甲型H1N1流感病毒和经典H1N1病毒株抗原性差异较大。对小鼠致病性试验表明该病毒株可以直接感染小鼠并导致小鼠轻微临床症状和组织病理学变化,但不致死小鼠,表现为低致病性。; 关键词猪流感病毒人源H1N1亚型遗传演化分析抗原性分析致病性; Keywords swine influenza human origin H1N1 genetic analysis antigenic analysis pathogenicity; 分类号 S852.65 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名蛋白质组学主要实验技术的研究进展被引量：1: 2; 作者蔡冬冬王秀荣石霖武嘉男陶乐蒙王馥梅包红梅陈化兰; 机构东北农业大学动物医学学院中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室兽医生物国家重点开放实验室; 出处《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第7期680-683,共4页; 关键词蛋白质组学实验技术人类基因组计划后基因组时代相对稳定性基因组编码生命现象基因数量; 分类号 R730.43 [医药卫生—肿瘤] R33-33 [医药卫生—人体生理学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名流感病毒抗原表位的研究进展被引量：1: 3; 作者孙晓东熊永忠陈化兰王秀荣; 机构中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室兽医生物国家重点开放实验室; 出处《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2011年第6期193-196,共4页; 文摘流感病毒抗原表位的研究,不仅是对流感病毒致病机理和机体免疫系统反应的探究,还能很好地指导对流感的防治。作者从抗原表位的特点,流感病毒抗原表位的特点、研究进展及流感病毒抗原表位疫苗的应用几个方面进行了综述。; 关键词流感病毒抗原表位表位疫苗; Keywords influenza virus antigenic epitope antigenic epitope vaccine; 分类号 S852.659.5 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名不对称RT-PCR结合芯片技术鉴别4种禽病的初步研究被引量：7: 4; 作者陶启蒙王秀荣武嘉男石霖李雁冰包红梅陈化兰; 机构中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室/兽医生物国家重点开放实验室; 出处《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第12期954-958,共5页; 基金国际合作项目(2007DFR30360); 文摘本研究结合非对称RT-PCR和基因芯片两种技术,构建可同时区分AIV的H5、H7、H9血凝素亚型和N1、N2神经氨酸酶亚型以及鸡传染性支气管炎病、新城疫病、鸡传染性法氏囊病的基因芯片。分别T/A克隆部分禽流感病毒的M基因,H5、H7、H9亚型HA基因,N1、N2亚型NA基因,鸡传染性支气管炎病毒np基因、新城疫病np基因、鸡传染性法氏囊A基因,并构建重组质粒;以重组质粒为模板,用PCR方法扩增制备探针,纯化后点于氨基修饰的载玻片上,制备基因芯片;常规方法从待检样品中提取RNA,用Cy3标记引物进行RT-PCR,将荧光素引入PCR产物中;并对扩增条件进行优化。研究发现检测探针可特异性的与相应的标记样品进行杂交,呈现较强的杂交信号;该方法可以准确进行4种主要禽病的鉴别诊断和禽流感主要流行亚型鉴定,对感染样品和现地样品检测结果与RT-PCR、鸡胚接种有较高一致性,符合率分别为100%和96%。结果显示该方法可用于同步鉴别禽流感、鸡传染性支气管炎、新城疫、鸡传染性法氏囊病,以及现地主要流行的禽流感亚型,是一种有效的新方法。; 关键词不对称PCR 基因芯片禽病禽流感亚型鉴别; Keywords dissymmetry PCR microarrays poultry disease subtypes of AIV detection; 分类号 Q781 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名甲型H1N1流感病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立被引量：7: 5; 作者尹航杨焕良陈艳孟沙沙刘丽萍辛晓光陈化兰乔传玲; 机构中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室/兽医生物国家重点开放实验室东北农业大学; 出处《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期36-39,共4页; 基金哈尔滨市科技攻关计划(2009AA6BN078) 中欧科技合作项目(1112); 文摘为建立快速检测甲型H1N1流感病毒[Influenza A(H1N1)pdm09]的TaqMan荧光定量PCR方法,本研究根据甲型H1N1流感病毒血凝素(HA)基因保守序列,设计并合成了特异性引物和TaqMan MGB探针,采用实时荧光定量PCR技术检测甲型H1N1流感病毒。使用含有选定检测序列的重组质粒pMD-HA标准品绘制标准曲线,其相关系数为0.999,敏感性可达50 TCID50。本研究中,甲型H1N1流感病毒TaqMan荧光定量RT-PCR方法与经典H1N1、类禽H1N1、类人H1N1、H1N2、H3N2、H5N1和H9N2流感病毒无交叉反应。结果表明,该方法可以在人类和动物间有效地检测甲型H1N1流感病毒。; 关键词猪流感病毒 H1N1亚型 TAQMAN MGB探针实时荧光定量PCR; Keywords swine influenza virus H1N1 subtype TaqMan MGB probe one-step real time PCR; 分类号 S852.65 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名AA肉鸡免疫禽流感油乳剂灭活疫苗细胞免疫应答的变化被引量：5: 6; 作者王彦妮曾显营田国彬苏文陈化兰; 机构中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室/兽医生物国家重点开放实验室; 出处《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期141-145,共5页; 基金现代农业产业技术体系建设(nycytx-42-G3-02) 国家科技支撑计划专项资金(2006BAD06A05 2006BAD06A16); 文摘为了解肉鸡生长期内免疫前后的细胞免疫反应,本实验采用CD3/CD4/CD8三色流式细胞术、MTT法和Griess法依次检测了AA肉鸡免疫禽流感灭活疫苗和非免疫状态下外周血、胸腺和脾脏中T淋巴细胞及其亚群的相对含量、外周血中T淋巴细胞对PHA-P的增殖反应能力和诱导巨噬细胞NO分泌量的变化。结果表明,非免疫状态下,AA肉鸡外周血CD4+、CD8+、CD3+T淋巴细胞相对百分含量在7日龄时均为最低,脾脏中CD4+T淋巴细胞相对百分含量在整个试验期一直呈下降趋势,免疫后外周血、脾脏和胸腺中CD4+、CD8+、CD3+T淋巴细胞相对百分含量均明显高于非免疫组,且脾脏CD4+T淋巴细胞呈阶段性上升状态;各时期淋巴细胞刺激指数(SI)值和巨噬细胞NO分泌量检测结果表明,免疫组均高于同期对照组(p<0.05)。研究结果还表明:肉鸡在7日龄时细胞免疫水平最低,灭活疫苗可以激发肉鸡产生较强的细胞免疫应答。; 关键词灭活疫苗 T淋巴细胞亚群 AA肉鸡 MTT法 Griess法; Keywords inactivated vaccine T cell subpopulations AA broiler MTT assay Griess assay; 分类号 S852.65 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名区分禽流感病毒亚型诊断基因芯片的构建被引量：7: 7; 作者杨忠苹王秀荣石霖田丽娜王煜陶启蒙陈化兰; 机构中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室兽医生物国家重点开放实验室重庆出入境检验检疫局; 出处《中国动物检疫》 CAS 北大核心 2008年第10期29-32,共4页; 基金 "十五"国家科技攻关不同动物流感病毒免疫学及高通量检测技术的研究和开发(2004BA519A23) +2 种基金国际合作编号(20072326); 文摘制备了可同时区分AIVH5、H7、H9血凝素亚型及N1、N2神经氨酸酶亚型的基因诊断芯片。试验以重组质粒为模板,进行PCR扩增,然后用异丙醇沉淀法进行纯化,制备探针及内参基因。将探针及内参基因用点样缓冲液稀释到0.3μg/μL后用芯片点样仪将其点制到醛基化基片上,样点中心间距450μm,样点直径220μm。将点好的基片在室温干燥24h以上,后经65℃再水合10s、80℃干燥、65mj紫外线交联照射25min后,再用封闭液封闭,95℃变性处理,成功构建了能区分禽流感血凝素H5,H7,H9亚型及神经氨酸酶N1,N2亚型的检测基因芯片。在PCR扩增中标记待检样品,对制备的检测芯片进行质量检验,结果表明,制备的区分禽流感病毒亚型基因芯片可区分AIV部分亚型。; 关键词禽流感基因芯片亚型鉴别; Keywords influenza Diagnostic microarray Subtyping; 分类号 S852.659.5 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	一株人源H1N1亚型猪流感病毒的进化分析与生物学特性研究	唐续杨焕良鄢明华李秀丽陈艳孟沙沙尹航辛晓光步志高乔传玲陈化兰	《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心	2012	16	在线阅读下载PDF 职称材料
2	蛋白质组学主要实验技术的研究进展	蔡冬冬王秀荣石霖武嘉男陶乐蒙王馥梅包红梅陈化兰	《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心	2009	1	在线阅读下载PDF 职称材料
3	流感病毒抗原表位的研究进展	孙晓东熊永忠陈化兰王秀荣	《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心	2011	1	在线阅读下载PDF 职称材料
4	不对称RT-PCR结合芯片技术鉴别4种禽病的初步研究	陶启蒙王秀荣武嘉男石霖李雁冰包红梅陈化兰	《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心	2008	7	在线阅读下载PDF 职称材料
5	甲型H1N1流感病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立	尹航杨焕良陈艳孟沙沙刘丽萍辛晓光陈化兰乔传玲	《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心	2013	7	在线阅读下载PDF 职称材料
6	AA肉鸡免疫禽流感油乳剂灭活疫苗细胞免疫应答的变化	王彦妮曾显营田国彬苏文陈化兰	《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心	2011	5	在线阅读下载PDF 职称材料
7	区分禽流感病毒亚型诊断基因芯片的构建	杨忠苹王秀荣石霖田丽娜王煜陶启蒙陈化兰	《中国动物检疫》 CAS 北大核心	2008	7	在线阅读下载PDF 职称材料