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猪伪狂犬病病毒HeN1株gE蛋白单克隆抗体的制备及其抗原表位的鉴定被引量：3: 1; 作者吴桐彭金美 +3 位作者田志军王倩陈志宝赵蕊《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期143-147,共5页; 为制备抗猪伪狂犬病病毒(PRV)糖蛋白E(gE)的单克隆抗体(MAb)并鉴定其抗原表位,本研究以原核系统表达PRV HeN1株截短的gE(aa127~aa232)蛋白(rgE),并对表达的rgE进行纯化免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与骨髓瘤细胞(SP2/0)进行融合,以该病毒... 展开更多; 关键词伪狂犬病病毒 g E蛋白原核表达单克隆抗体; 在线阅读下载PDF 职称材料

美洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒GP4蛋白中和活性单克隆抗体制备及其抗原表位鉴定被引量：1: 2; 作者刘梦莹李敏华 +2 位作者王倩田志军周伦江《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期641-644,共4页; 为制备具有中和活性的抗猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的单克隆抗体(MAb)并鉴定其抗原表位,本研究利用PRRSVSD53株的超离病毒作为免疫原,按常规方法免疫BALB/c小鼠并进行细胞融合。采用PRRSVSD53株和真核表达的PRRSV各结构蛋白作为检... 展开更多; 关键词猪繁殖与呼吸综合征病毒单克隆抗体 GP4蛋白表位中和活性; 在线阅读下载PDF 职称材料

北美型猪繁殖与呼吸综合征竞争ELISA抗体检测方法的建立及初步应用被引量：3: 3; 作者李宛生李敏华 +3 位作者杨建伟田志军王倩冷超粮《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第12期1221-1226,共6页; 为建立快速检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)抗体的ELISA方法,本研究以纯化的PRRSV全病毒为包被抗原,利用抗北美型PRRSV M蛋白的特异性单克隆抗体为竞争抗体,经条件优化,建立了特异性检测北美型PRRSV的竞争ELISA(C-ELISA)方法。结果显... 展开更多; 关键词猪繁殖与呼吸综合征病毒北美型 M蛋白竞争ELISA; 在线阅读下载PDF 职称材料

欧洲型PRRSV竞争ELISA抗体检测方法的建立及应用被引量：7: 4; 作者许浒相丽润 +14 位作者张文立汤艳东赵静李超龚邦俊李宛生付军彭金美王倩周国辉冷超粮安同庆蔡雪辉张洪亮田志军《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第6期617-623,共7页; 为快速准确地监测1型猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV-1)在我国的流行情况,本研究以分子筛纯化灭活的PRRSV-1(ZD-1株)为包被抗原,利用PRRSV-1的特异性单克隆抗体(MAb EU-1)为竞争抗体,经条件优化,建立了检测PRRSV-1的竞争ELISA(EU-C-ELISA... 展开更多; 关键词 1型猪繁殖与呼吸综合征病毒竞争ELISA 流行病学调查; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名猪伪狂犬病病毒HeN1株gE蛋白单克隆抗体的制备及其抗原表位的鉴定被引量：3: 1; 作者吴桐彭金美田志军王倩陈志宝赵蕊; 机构黑龙江八一农垦大学生命科学技术学院中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点猪病实验室; 出处《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期143-147,共5页; 基金国家重点研发计划项目(2016YFD0500104) 中国农业科学院基本科研业务费项目(1610302016007); 文摘为制备抗猪伪狂犬病病毒(PRV)糖蛋白E(gE)的单克隆抗体(MAb)并鉴定其抗原表位,本研究以原核系统表达PRV HeN1株截短的gE(aa127~aa232)蛋白(rgE),并对表达的rgE进行纯化免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与骨髓瘤细胞(SP2/0)进行融合,以该病毒感染的Vero E6细胞及真核表达的gE蛋白为检测抗原,采用IFA检测方法筛选杂交瘤细胞系,获得一株稳定分泌抗PRV gE的MAb杂交瘤细胞系(mgE185)。该MAb亚型鉴定为Ig G1型,轻链为Κ链。该MAb不具有中和病毒的活性,其细胞培养上清及腹水IFA效价分别为1∶80和1∶2 560。Western blot试验显示mgE185可以特异性识别gE蛋白,表明其针对的抗原表位为线性表位。通过截短表达gE蛋白鉴定该MAb的抗原识别序列为^(151)IGDYL^(155),该抗原表位在PRV中高度保守。本研究制备的MAb为进一步建立特异性强、灵敏度高的PRV gE-ELISA检测方法奠定了基础。; 关键词伪狂犬病病毒 g E蛋白原核表达单克隆抗体; Keywords pseudorabies virus gE protein prokaryotic expression monoclonal antibody; 分类号 S852.65 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名美洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒GP4蛋白中和活性单克隆抗体制备及其抗原表位鉴定被引量：1: 2; 作者刘梦莹李敏华王倩田志军周伦江; 机构福建农林大学动物科学学院中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点猪病实验室福建省农业科学院畜牧兽医研究所; 出处《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期641-644,共4页; 基金国家重点研发计划项目(2016YFD0500104); 文摘为制备具有中和活性的抗猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的单克隆抗体(MAb)并鉴定其抗原表位,本研究利用PRRSVSD53株的超离病毒作为免疫原,按常规方法免疫BALB/c小鼠并进行细胞融合。采用PRRSVSD53株和真核表达的PRRSV各结构蛋白作为检测抗原,应用间接免疫荧光试验(IFA)筛选到一株稳定分泌抗SD53株GP4蛋白的杂交瘤细胞株(LM26)。抗体亚类鉴定其为IgG2a,轻链为κ链。原核表达一系列截短的GP4蛋白鉴定LM26的抗原表位结果显示,LM26识别的抗原表位序列为57VVLQDI^62,此抗原表位在美洲型PRRSV中相对保守。病毒中和试验结果显示,MAb LM26仅针对PRRSV SD53株具有中和活性,中和效价最高为1∶50,对其它美洲株PRRSV均不具有中和活性。该MAb的制备为进一步研究PRRSVGP4蛋白的结构和功能奠定了基础。; 关键词猪繁殖与呼吸综合征病毒单克隆抗体 GP4蛋白表位中和活性; Keywords PRRSV monoclonal antibody GP4 protein epitope neutralizing activity; 分类号 S852.65 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名北美型猪繁殖与呼吸综合征竞争ELISA抗体检测方法的建立及初步应用被引量：3: 3; 作者李宛生李敏华杨建伟田志军王倩冷超粮; 机构南阳师范学院中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点猪病实验室北京爱德士元亨生物科技有限公司; 出处《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第12期1221-1226,共6页; 基金中国博士后科学基金面上项目(2017M610137) 黑龙江省自然科学基金优秀青年项目(YQ2019C032) 国家自然科学基金项目(31502097)。; 文摘为建立快速检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)抗体的ELISA方法,本研究以纯化的PRRSV全病毒为包被抗原,利用抗北美型PRRSV M蛋白的特异性单克隆抗体为竞争抗体,经条件优化,建立了特异性检测北美型PRRSV的竞争ELISA(C-ELISA)方法。结果显示,最佳抗原包被量为660 ng/孔,待检血清样本稀释度为1∶2,竞争抗体最佳稀释度为1∶8。ELISA结果判定标准:血清样本抑制率PI≥25.65%时判定为阳性,PI<25.65%判定为阴性。特异性试验结果显示,该方法仅能检测北美型PRRSV,与PRV、PCV2、CSFV、PEDV、TGEV等猪病毒阳性血清无交叉反应;敏感性试验结果显示,该方法能检测出128倍稀释的阳性血清;批内和批间重复性试验的变异系数均小于10%。利用该方法对黑龙江地区收集的546份临床血清样品进行检测,PRRSV抗体阳性率达95.1%,与商品化IDEXX PRRSV试剂盒的符合率为95.8%。本研究建立的C-ELISA方法为PRRS的流行病学调查、临床上疫苗评估及免疫前后抗体水平监测提供了有效的检测手段。; 关键词猪繁殖与呼吸综合征病毒北美型 M蛋白竞争ELISA; Keywords porcine reproductive and respiratory syndrome virus North American-type M protein competitive ELISA; 分类号 S852.65 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名欧洲型PRRSV竞争ELISA抗体检测方法的建立及应用被引量：7: 4; 作者许浒相丽润张文立汤艳东赵静李超龚邦俊李宛生付军彭金美王倩周国辉冷超粮安同庆蔡雪辉张洪亮田志军; 机构中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点猪病实验室南阳师范学院; 出处《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第6期617-623,共7页; 基金国家自然科学基金(32002315) 中国博士后科学基金(2020M680788)。; 文摘为快速准确地监测1型猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV-1)在我国的流行情况,本研究以分子筛纯化灭活的PRRSV-1(ZD-1株)为包被抗原,利用PRRSV-1的特异性单克隆抗体(MAb EU-1)为竞争抗体,经条件优化,建立了检测PRRSV-1的竞争ELISA(EU-C-ELISA)方法。反应条件优化结果显示,最佳抗原包被量为455 ng/孔,PRRSV-1 MAb EU-1的最佳稀释度为1:8。EU-C-ELISA结果判定标准:血清样品抑制率PI≥45%时判定为阳性,PI<45%判定为阴性。特异性试验结果显示,该方法仅能检测PRRSV-1阳性血清,与各谱系PRRSV-2及其他常见猪病毒和细菌阳性血清均无交叉反应;敏感性试验结果显示,该方法能检测出16倍稀释的阳性标准血清,并且最早可在PRRSV ZD-1株感染猪后第7 d检测到血清中PRRSV-1抗体阳转;批内和批间重复性试验的变异系数均小于5%,对比试验结果显示该方法特异性和敏感性均显著优于现有试剂盒对PRRSV-1抗体的检测。利用该方法对2020年采自黑龙江、辽宁、河北、山东省10个猪场的432份临床血清样品进行检测,2个猪场检出PRRSV-1抗体阳性,猪场阳性率达20%,样品总阳性率为15.0%,显示PRRSV-1抗体已存在于我国部分地区猪群中。本研究在我国首次建立了PRRSV-1竞争ELISA抗体检测方法,为监测PRRS-1在我国的流行情况及科学防控该病提供了检测手段。; 关键词 1型猪繁殖与呼吸综合征病毒竞争ELISA 流行病学调查; Keywords porcine reproductive and respiratory syndrome virus type I competitive ELISA epidemiological investigation; 分类号 S852.65 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	猪伪狂犬病病毒HeN1株gE蛋白单克隆抗体的制备及其抗原表位的鉴定	吴桐彭金美田志军王倩陈志宝赵蕊	《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心	2017	3	在线阅读下载PDF 职称材料
2	美洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒GP4蛋白中和活性单克隆抗体制备及其抗原表位鉴定	刘梦莹李敏华王倩田志军周伦江	《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心	2019	1	在线阅读下载PDF 职称材料
3	北美型猪繁殖与呼吸综合征竞争ELISA抗体检测方法的建立及初步应用	李宛生李敏华杨建伟田志军王倩冷超粮	《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心	2019	3	在线阅读下载PDF 职称材料
4	欧洲型PRRSV竞争ELISA抗体检测方法的建立及应用	许浒相丽润张文立汤艳东赵静李超龚邦俊李宛生付军彭金美王倩周国辉冷超粮安同庆蔡雪辉张洪亮田志军	《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心	2022	7	在线阅读下载PDF 职称材料