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弓形虫SAG1和GRA4基因的原核表达及其重组猫疱疹病毒Ⅰ型转移载体的构建
被引量：
5
1
作者
高洋
程子英
+3 位作者
王铭
郑君
贾洪林
鲁承
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第11期886-890,共5页
为构建表达弓形虫抗原的重组猫疱疹病毒Ⅰ型(FHV-1)转移载体,本研究以pBluesciptⅡ-SK(-)为骨架载体,分别插入FHV-1 TK基因的5'(2 000 bp)和3'(1 700 bp)同源臂、pCAGGs载体中含有启动子和终止信号的表达盒以及弓形虫RH株SAG1或...
为构建表达弓形虫抗原的重组猫疱疹病毒Ⅰ型(FHV-1)转移载体,本研究以pBluesciptⅡ-SK(-)为骨架载体,分别插入FHV-1 TK基因的5'(2 000 bp)和3'(1 700 bp)同源臂、pCAGGs载体中含有启动子和终止信号的表达盒以及弓形虫RH株SAG1或GRA4基因,构建重组FHV-1的转移载体pBS-TK-SAG1和pBS-TK-GRA4。将其分别转染于293T细胞,通过原核细胞表达的截短SAG1和GRA4重组蛋白制备的鼠多克隆抗体进行western blot鉴定。结果显示,制备的弓形虫SAG1和GRA4多克隆抗体能够特异性识别重组表达和虫体表达的天然的SAG1和GRA4两种弓形虫蛋白,分子量一致,分别为35 ku和45 ku。本研究为表达弓形虫RH株SAG1和GRA4基因的猫重组疱疹病毒Ⅰ型载体疫苗的研制奠定了基础。
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关键词
弓形虫
SAG1
GRA4
猫疱疹病毒I型
转移载体
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职称材料
弓形虫酵母双杂交cDNA文库构建及与AMA1羧基端相互作用蛋白的筛选
被引量：
3
2
作者
程子英
高洋
+3 位作者
王铭
郑君
贾洪林
赵权
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第3期201-204,共4页
为筛选弓形虫AMA1基因羧基端(AMA1c)在弓形虫中的相互作用分子,本研究采用MatchmakerTM Gold酵母双杂交系统,构建了弓形虫RH株酵母双杂交cDNA文库,文库滴度达到4.26×107cfu/mL。以构建的pGBKT7-AMA1c诱饵质粒,使用PEG/LiAc法转化...
为筛选弓形虫AMA1基因羧基端(AMA1c)在弓形虫中的相互作用分子,本研究采用MatchmakerTM Gold酵母双杂交系统,构建了弓形虫RH株酵母双杂交cDNA文库,文库滴度达到4.26×107cfu/mL。以构建的pGBKT7-AMA1c诱饵质粒,使用PEG/LiAc法转化酵母菌株Y2H,利用表型筛选法检测AMA1c的自激活作用并进行酵母双杂交筛选,得到阳性克隆,根据序列比对分析结果,进一步进行共转化验证。结果表明,诱饵蛋白在酵母双杂交系统中具有无毒性和自激活作用,而且通过酵母双杂交筛选共得到13个与AMA1c蛋白相互作用的虫体蛋白。本研究结果为进一步研究AMA1c的功能奠定了基础。
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关键词
弓形虫
AMA1羧基端
酵母双杂交
自激活
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职称材料
犬吉氏巴贝斯虫BgTRAP的原核表达及抗原表位分析
3
作者
陈亚萍
孟祥春
+4 位作者
王曼宇
刘景梅
高洋
贾洪林
鲁承
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第1期27-30,共4页
为表达犬吉氏巴贝斯虫Bg TRAP蛋白及鉴定其抗原表位,本研究将犬吉氏巴贝斯虫Bg TRAP编码基因的密码子进行优化和高效表达,并利用生物学软件分析预测,结果显示,Bg TRAP中存在10个潜在的线性抗原表位,通过原核表达系统对其预测表位的多肽...
为表达犬吉氏巴贝斯虫Bg TRAP蛋白及鉴定其抗原表位,本研究将犬吉氏巴贝斯虫Bg TRAP编码基因的密码子进行优化和高效表达,并利用生物学软件分析预测,结果显示,Bg TRAP中存在10个潜在的线性抗原表位,通过原核表达系统对其预测表位的多肽进行表达,以筛选的阳性血清样品为检测抗体进行ELISA检测,结果表明其中3个多肽能够与抗体特异性结合,其多肽序列分别为126DYVIAVEDTTHFGE139、672AYILAGFA GLLLIT685和497SDELGDEMGLTTNE510。本研究对Bg TRAP蛋白抗原表位的鉴定,为进一步开发基于Bg TRAP的犬吉氏巴贝斯虫诊断抗原及Bg TRAP的免疫学特性研究奠定了基础。
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关键词
密码子优化
间接免疫荧光
抗原表位
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职称材料
题名
弓形虫SAG1和GRA4基因的原核表达及其重组猫疱疹病毒Ⅰ型转移载体的构建
被引量：
5
1
作者
高洋
程子英
王铭
郑君
贾洪林
鲁承
机构
延边
大学
农
学院
动物医学系
中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室-美国密西根州立大学天然免疫联合实验室
吉林
农业
大学
动物医
学院
东北
农业
大学
动物医
学院
出处
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第11期886-890,共5页
基金
兽医生物技术国家重点实验室基本科研业务费项目(SKLVBP201306)
文摘
为构建表达弓形虫抗原的重组猫疱疹病毒Ⅰ型(FHV-1)转移载体,本研究以pBluesciptⅡ-SK(-)为骨架载体,分别插入FHV-1 TK基因的5'(2 000 bp)和3'(1 700 bp)同源臂、pCAGGs载体中含有启动子和终止信号的表达盒以及弓形虫RH株SAG1或GRA4基因,构建重组FHV-1的转移载体pBS-TK-SAG1和pBS-TK-GRA4。将其分别转染于293T细胞,通过原核细胞表达的截短SAG1和GRA4重组蛋白制备的鼠多克隆抗体进行western blot鉴定。结果显示,制备的弓形虫SAG1和GRA4多克隆抗体能够特异性识别重组表达和虫体表达的天然的SAG1和GRA4两种弓形虫蛋白,分子量一致,分别为35 ku和45 ku。本研究为表达弓形虫RH株SAG1和GRA4基因的猫重组疱疹病毒Ⅰ型载体疫苗的研制奠定了基础。
关键词
弓形虫
SAG1
GRA4
猫疱疹病毒I型
转移载体
Keywords
Toxoplasma gondii
SAG1
GRA4
feline herpes virus type I
transfer vectors
分类号
S852.7 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
弓形虫酵母双杂交cDNA文库构建及与AMA1羧基端相互作用蛋白的筛选
被引量：
3
2
作者
程子英
高洋
王铭
郑君
贾洪林
赵权
机构
吉林
农业
大学
动物
科学
技术
学院
中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室-美国密西根州立大学天然免疫联合实验室
延边
大学
农
学院
动物医学系
东北
农业
大学
动物医
学院
出处
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第3期201-204,共4页
基金
兽医生物技术国家重点实验室基本科研业务费项目(SKLVBP201306)
文摘
为筛选弓形虫AMA1基因羧基端(AMA1c)在弓形虫中的相互作用分子,本研究采用MatchmakerTM Gold酵母双杂交系统,构建了弓形虫RH株酵母双杂交cDNA文库,文库滴度达到4.26×107cfu/mL。以构建的pGBKT7-AMA1c诱饵质粒,使用PEG/LiAc法转化酵母菌株Y2H,利用表型筛选法检测AMA1c的自激活作用并进行酵母双杂交筛选,得到阳性克隆,根据序列比对分析结果,进一步进行共转化验证。结果表明,诱饵蛋白在酵母双杂交系统中具有无毒性和自激活作用,而且通过酵母双杂交筛选共得到13个与AMA1c蛋白相互作用的虫体蛋白。本研究结果为进一步研究AMA1c的功能奠定了基础。
关键词
弓形虫
AMA1羧基端
酵母双杂交
自激活
Keywords
Toxoplasma gondii
AMA1 C-terminal
yeast two-hybrid system
self-activation
分类号
S852.7 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
犬吉氏巴贝斯虫BgTRAP的原核表达及抗原表位分析
3
作者
陈亚萍
孟祥春
王曼宇
刘景梅
高洋
贾洪林
鲁承
机构
延边
大学
农
学院
动物医学系
中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室-美国密西根州立大学天然免疫联合实验室
出处
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第1期27-30,共4页
基金
哈尔滨市科技创新人才项目(2013RFLYJ024)
文摘
为表达犬吉氏巴贝斯虫Bg TRAP蛋白及鉴定其抗原表位,本研究将犬吉氏巴贝斯虫Bg TRAP编码基因的密码子进行优化和高效表达,并利用生物学软件分析预测,结果显示,Bg TRAP中存在10个潜在的线性抗原表位,通过原核表达系统对其预测表位的多肽进行表达,以筛选的阳性血清样品为检测抗体进行ELISA检测,结果表明其中3个多肽能够与抗体特异性结合,其多肽序列分别为126DYVIAVEDTTHFGE139、672AYILAGFA GLLLIT685和497SDELGDEMGLTTNE510。本研究对Bg TRAP蛋白抗原表位的鉴定,为进一步开发基于Bg TRAP的犬吉氏巴贝斯虫诊断抗原及Bg TRAP的免疫学特性研究奠定了基础。
关键词
密码子优化
间接免疫荧光
抗原表位
Keywords
codon optimization
ELISA
immunofluorescence assay
antigen epitope
分类号
S852.7 [农业科学—基础兽医学]
在线阅读
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
弓形虫SAG1和GRA4基因的原核表达及其重组猫疱疹病毒Ⅰ型转移载体的构建
高洋
程子英
王铭
郑君
贾洪林
鲁承
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2013
5
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
弓形虫酵母双杂交cDNA文库构建及与AMA1羧基端相互作用蛋白的筛选
程子英
高洋
王铭
郑君
贾洪林
赵权
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2014
3
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
犬吉氏巴贝斯虫BgTRAP的原核表达及抗原表位分析
陈亚萍
孟祥春
王曼宇
刘景梅
高洋
贾洪林
鲁承
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2015
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
已选择
0
条
导出题录
引用分析
参考文献
引证文献
统计分析
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