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重组鸡β-防御素6基因的表达和生物学特性的研究被引量：16: 1; 作者韩宗玺廖文艳 +2 位作者王瑞琴邵昱昊马得莹《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期476-480,共5页; 从鸡骨髓细胞中分离提取总RNA,经过RT-PCR扩增出鸡β-防御素-6(AvBD6)基因。经克隆测序表明扩增出的cDNA碱基数为204bp,编码68个氨基酸残基。根据已发现的禽β-防御素和鼠β-防御素-6的氨基酸序列构建系统进化树。发现鸡AvBD6氨基酸序... 展开更多; 关键词鸡β-防御素-6 遗传进化抗菌活性; 在线阅读下载PDF 职称材料

不同宿主源NDV毒株对SPF鸡致病性研究被引量：11: 2; 作者刘怀然孙敏华 +3 位作者葛鑫刘胜旺刘培欣孔宪刚《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期99-103,109,共6页; 为阐明不同宿主及不同基因型新城疫病毒(NDV)对SPF鸡致病性,选择分离自鸡、番鸭、鹅、健康野鸟的基因Ⅶd亚型NDV6株,鸡源基因Ⅲ型和鸽源基因Ⅵb型毒株各1株,以及基因Ⅸ型强毒F48E9,共9株NDV毒株进行致病性试验。在对各毒株的EID50及主... 展开更多; 关键词新城疫病毒基因型致病性病毒载量; 在线阅读下载PDF 职称材料

鸡贫血病毒vp1和vp2基因在毕赤酵母中的表达及产物免疫学特性的初步研究被引量：1: 3; 作者林欢高宏雷 +4 位作者王晓艳高玉龙宋修庆李术强王笑梅《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第7期495-499,共5页; 利用特异性引物从pBluemCAV中PCR扩增得到鸡贫血病病毒(CAV)vp1、vp2基因,经EcoRⅠ和NotⅠ双酶切处理,纯化后,克隆至EcoRⅠ和NotⅠ双酶切处理的表达载体pPIC9K中,构建了真核表达质粒pPIC9K-VP1和pPIC9K-VP2。将pPIC9K-VP1和pPIC9K-VP2... 展开更多; 关键词鸡贫血病毒 VP1基因 VP2基因真核表达毕赤酵母; 在线阅读下载PDF 职称材料

传染性喉气管炎病毒WG株Us区基因结构分析被引量：2: 4; 作者韩文雄石星明 +5 位作者王云峰兰德松胡文玮王玫曹贵方童光志《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第10期779-784,共6页; 根据GenBank中的传染性喉气管炎病毒(ILTV)全序列(NCBI登录号:NC-006623),利用Oligo6.2分析序列并设计6对引物,以ILTVWG株基因组DNA为模板,PCR扩增了长度为13.1kb的区域,得到了完整的WG株的Us区序列,初步鉴定了WG株的Us区基因结构。将W... 展开更多; 关键词传染性喉气管炎病毒 WG株 Us区基因序列分析; 在线阅读下载PDF 职称材料

重组鸡β-防御素10蛋白的原核表达及其抗菌活性的测定被引量：16: 5; 作者廖文艳马得莹 +1 位作者韩宗玺刘胜旺《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第10期765-769,789,共6页; 鸡抗菌肽属β-防御素类,在鸡的先天性免疫中发挥重要作用。本研究将克隆得到的鸡β-防御素-10基因(AvBD10)亚克隆到原核表达载体pGEX-6p-1中构建了重组表达质粒pGEX-AvBD10。将重组质粒转化至BL21,于37℃用IPTG诱导培养不同时间,SDS-PAG... 展开更多; 关键词鸡AvBD10 融合蛋白抗菌活性; 在线阅读下载PDF 职称材料

抗菌肽CAP18在大肠杆菌中表达、纯化及活性的初步鉴定被引量：2: 6; 作者徐灵龙石星明 +4 位作者王云峰史春林王玫孙妍童光志《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第11期861-865,共5页; 根据抗菌肽CAP18活性片段的氨基酸序列,采用SOE技术,设计合成了CAP18的编码基因,将其克隆至pMD18-T载体,进行序列测定后亚克隆至pET-32a(+)表达载体中,在E.coli BL21(DE3)中表达融合蛋白CAP18。经Ni2+亲和层析后回收CAP18融合蛋白,纯度... 展开更多; 关键词兔抗菌肽CAP18 融合基因重组表达抑菌活性; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名重组鸡β-防御素6基因的表达和生物学特性的研究被引量：16: 1; 作者韩宗玺廖文艳王瑞琴邵昱昊马得莹; 机构中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室／禽传染病研究室东北农业大学动物营养研究所; 出处《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期476-480,共5页; 基金国家自然科学基金(30600435) NOVUS国际科学研究基金 +1 种基金黑龙江省博士后启动基金; 文摘从鸡骨髓细胞中分离提取总RNA,经过RT-PCR扩增出鸡β-防御素-6(AvBD6)基因。经克隆测序表明扩增出的cDNA碱基数为204bp,编码68个氨基酸残基。根据已发现的禽β-防御素和鼠β-防御素-6的氨基酸序列构建系统进化树。发现鸡AvBD6氨基酸序列与鸡AvBD7氨基酸序列同源性最高,为62.7%。将该基因克隆到大肠杆菌原核表达载体pGEX-6p-1上,进行原核表达。SDS-PAGE电泳表明,表达的重组鸡AvBD6融合蛋白分子量约为32ku。对该重组蛋白进行纯化与体外抗菌活性的测定。结果表明,重组鸡AvBD6融合蛋白对多杀性巴氏杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽胞杆菌有较高抗菌活性,对大肠杆菌的抗菌活性较弱,对猪霍乱沙门氏菌无抗菌活性。重组鸡AvBD6蛋白对上述细菌的最小抑菌浓度范围为31.25μg/mL～250μg/mL。此外,重组鸡AvBD6蛋白对温度和酸碱度有较高的稳定性。; 关键词鸡β-防御素-6 遗传进化抗菌活性; Keywords chicken β-defensin 6 evolutionary antimicrobial activity; 分类号 S852.42 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名不同宿主源NDV毒株对SPF鸡致病性研究被引量：11: 2; 作者刘怀然孙敏华葛鑫刘胜旺刘培欣孔宪刚; 机构中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室／禽传染病研究室东北农业大学动物医学学院; 出处《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期99-103,109,共6页; 基金国家科技支撑计划(2006BAD06A03 2006BAD06A08) 中央级公益性科研院所基本科研业务费(2008-13); 文摘为阐明不同宿主及不同基因型新城疫病毒(NDV)对SPF鸡致病性,选择分离自鸡、番鸭、鹅、健康野鸟的基因Ⅶd亚型NDV6株,鸡源基因Ⅲ型和鸽源基因Ⅵb型毒株各1株,以及基因Ⅸ型强毒F48E9,共9株NDV毒株进行致病性试验。在对各毒株的EID50及主要致病指数MDT、ICPI测定基础之上,以相同剂量感染15日龄SPF鸡,观察临床症状及剖检病变,计算发病率和死亡率,并在攻毒后不同时间采集主要组织样品,以SYBR GreenI Real-timePCR检测病毒最早出现时间及病毒载量。结果表明,6株基因Ⅶd亚型NDV毒株导致SPF鸡100%发病,死亡率90%以上,属于高致病性毒株;基因Ⅲ、Ⅵb型毒株导致SPF鸡发病但不死亡,属于中等毒力毒株。Ⅶd亚型毒株与F48E9株攻毒后SPF鸡在病理变化、组织嗜性及病毒载量上没有显著差异。根据毒株的MDT、ICPI指数及攻毒鸡病程综合判断,Ⅶd亚型毒株在致病性上与F48E9株差异不显著。健康野鸟携带基因Ⅶd亚型高致病性NDV,在NDV的自然生态传播过程中起重要作用,提示应该加强对野鸟的流行病学监测及相关研究。; 关键词新城疫病毒基因型致病性病毒载量; Keywords Newcastle disease virus genotype pathogenicity virus load; 分类号 S852.659.5 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名鸡贫血病毒vp1和vp2基因在毕赤酵母中的表达及产物免疫学特性的初步研究被引量：1: 3; 作者林欢高宏雷王晓艳高玉龙宋修庆李术强王笑梅; 机构中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室／禽传染病研究室中国科学院生物物理研究所哈尔滨工业大学海洋学院; 出处《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第7期495-499,共5页; 基金国家科技支撑计划(2006BAD06A04); 文摘利用特异性引物从pBluemCAV中PCR扩增得到鸡贫血病病毒(CAV)vp1、vp2基因,经EcoRⅠ和NotⅠ双酶切处理,纯化后,克隆至EcoRⅠ和NotⅠ双酶切处理的表达载体pPIC9K中,构建了真核表达质粒pPIC9K-VP1和pPIC9K-VP2。将pPIC9K-VP1和pPIC9K-VP2转化至毕赤酵母SMD1168中,在0.5%甲醇诱导下表达CAV-VP1、CAV-VP2蛋白,运用Westernblot和Dot-ELISA鉴定表达蛋白。结果表明,重组酵母菌株表达出约54ku和24ku的目的蛋白,与针对鸡贫血病毒的单克隆抗体发生特异性反应。将表达产物乳化后免疫6周龄BALB/c小鼠,用ELISA、IFA检测免疫小鼠血清,均检测到抗体。; 关键词鸡贫血病毒 VP1基因 VP2基因真核表达毕赤酵母; Keywords CAV vp1 gene vp2 gene eukaryotic expression Pichia pastoris; 分类号 S852.659 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名传染性喉气管炎病毒WG株Us区基因结构分析被引量：2: 4; 作者韩文雄石星明王云峰兰德松胡文玮王玫曹贵方童光志; 机构中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室／禽传染病研究室内蒙古农业大学动物科学与医学学院中国农业科学院上海兽医研究所; 出处《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第10期779-784,共6页; 基金兽医生物技术国家重点实验室开放基金(NKLVB2006-07); 文摘根据GenBank中的传染性喉气管炎病毒(ILTV)全序列(NCBI登录号:NC-006623),利用Oligo6.2分析序列并设计6对引物,以ILTVWG株基因组DNA为模板,PCR扩增了长度为13.1kb的区域,得到了完整的WG株的Us区序列,初步鉴定了WG株的Us区基因结构。将WG株的Us区序列分别与ILTVUSDA株、BHV-1、CeHV-1、EHV-1、HSV-1、HSV-2、MDV、PrV、HVT、VZV相比较,ILTVWG株与USDA株同源性为99.2%,而与其他疱疹病毒之间的同源性较低,而且Us区大小也不一致;与已发表的ILTVUSDA株Us区基因序列分别比较后发现,两者之间差异较大的基因分别为gJ基因和gD基因。其中,gJ基因在第1983个碱基处比USDA株多出30bp,DNAStar预测这30bp可能形成一个独立的抗原表位;gD基因的长度在不同的ILTV毒株之间差别较大,与其他疱疹病毒具有相似的结构特征。; 关键词传染性喉气管炎病毒 WG株 Us区基因序列分析; Keywords ILTV WG strain Us region sequence analysis; 分类号 S852.659.1 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名重组鸡β-防御素10蛋白的原核表达及其抗菌活性的测定被引量：16: 5; 作者廖文艳马得莹韩宗玺刘胜旺; 机构东北农业大学动物营养研究所中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室／禽传染病研究室; 出处《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第10期765-769,789,共6页; 基金 NOVUS国际科学研究基金黑龙江省教育厅科研重点项目(No.1153lz05) 国家自然科学基金(30600435); 文摘鸡抗菌肽属β-防御素类,在鸡的先天性免疫中发挥重要作用。本研究将克隆得到的鸡β-防御素-10基因(AvBD10)亚克隆到原核表达载体pGEX-6p-1中构建了重组表达质粒pGEX-AvBD10。将重组质粒转化至BL21,于37℃用IPTG诱导培养不同时间,SDS-PAGE电泳与灰度扫描显示该重组蛋白表达量占菌体总蛋白的34.3%。表达的AvBD10融合蛋白以包涵体的形式存在,分子量约为31ku。重组蛋白经纯化后,以对数生长中期的大肠杆菌、多杀性巴氏杆菌、金黄色葡萄球菌、嗜酸乳杆菌、枯草芽胞杆菌和猪霍乱沙门氏菌为检测菌,利用薄层平皿琼脂糖孔穴扩散法测定了重组鸡AvBD10蛋白的抗菌活性。结果显示,重组鸡AvBD10蛋白对大肠杆菌、多杀性巴氏杆菌、金黄色葡萄球菌、嗜酸乳杆菌、枯草芽胞杆菌有抗菌活性。此外,重组鸡AvBD10蛋白在-70℃～100℃及在pH4～pH10条件下仍具有抗菌活性。; 关键词鸡AvBD10 融合蛋白抗菌活性; Keywords chicken AvBDIO fusion protein antibacterial activity; 分类号 S852.4 [农业科学—基础兽医学] Q78 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名抗菌肽CAP18在大肠杆菌中表达、纯化及活性的初步鉴定被引量：2: 6; 作者徐灵龙石星明王云峰史春林王玫孙妍童光志; 机构中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室／禽传染病研究室东北农业大学生命科学学院中国农业科学院上海兽医研究所; 出处《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第11期861-865,共5页; 基金国家“863”计划资助项目(2006AA10A206); 文摘根据抗菌肽CAP18活性片段的氨基酸序列,采用SOE技术,设计合成了CAP18的编码基因,将其克隆至pMD18-T载体,进行序列测定后亚克隆至pET-32a(+)表达载体中,在E.coli BL21(DE3)中表达融合蛋白CAP18。经Ni2+亲和层析后回收CAP18融合蛋白,纯度达到了85%以上。对纯化的融合蛋白进行酶切,用液体生长抑制方法检测切割后样品的活性,结果表明重组抗菌肽CAP18对大肠杆菌具有抑制活性。; 关键词兔抗菌肽CAP18 融合基因重组表达抑菌活性; Keywords rabbit antimicrobial peptide CAP18 fusion gene recombinant expression antimicrobial activity; 分类号 Q55 [生物学—生物化学] Q78 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	重组鸡β-防御素6基因的表达和生物学特性的研究	韩宗玺廖文艳王瑞琴邵昱昊马得莹	《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心	2009	16	在线阅读下载PDF 职称材料
2	不同宿主源NDV毒株对SPF鸡致病性研究	刘怀然孙敏华葛鑫刘胜旺刘培欣孔宪刚	《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心	2009	11	在线阅读下载PDF 职称材料
3	鸡贫血病毒vp1和vp2基因在毕赤酵母中的表达及产物免疫学特性的初步研究	林欢高宏雷王晓艳高玉龙宋修庆李术强王笑梅	《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心	2008	1	在线阅读下载PDF 职称材料
4	传染性喉气管炎病毒WG株Us区基因结构分析	韩文雄石星明王云峰兰德松胡文玮王玫曹贵方童光志	《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心	2008	2	在线阅读下载PDF 职称材料
5	重组鸡β-防御素10蛋白的原核表达及其抗菌活性的测定	廖文艳马得莹韩宗玺刘胜旺	《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心	2008	16	在线阅读下载PDF 职称材料
6	抗菌肽CAP18在大肠杆菌中表达、纯化及活性的初步鉴定	徐灵龙石星明王云峰史春林王玫孙妍童光志	《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心	2008	2	在线阅读下载PDF 职称材料