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表达牛呼吸道合胞体病毒G蛋白基因的重组Ⅰ型牛疱疹病毒的构建与鉴定
被引量：
8
1
作者
冯军科
朱远茂
+6 位作者
任宪刚
祖立闯
李娇
史鸿飞
高欲燃
童光志
薛飞
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第2期81-85,共5页
为构建表达牛呼吸道合胞体病毒(BRSV)G蛋白基因的牛疱疹病毒Ⅰ型(BHV-1)重组病毒,本研究将人工合成的BRSV全长G蛋白基因编码序列插入到巨细胞病毒(CMV)启动子之下构建TK基因缺失转移载体。利用磷酸钙-DNA沉淀法将该转移载体与亲本病毒BH...
为构建表达牛呼吸道合胞体病毒(BRSV)G蛋白基因的牛疱疹病毒Ⅰ型(BHV-1)重组病毒,本研究将人工合成的BRSV全长G蛋白基因编码序列插入到巨细胞病毒(CMV)启动子之下构建TK基因缺失转移载体。利用磷酸钙-DNA沉淀法将该转移载体与亲本病毒BHV-1/TK-/LacZ+的基因组DNA共转染牛鼻甲细胞后收获增殖的病毒。通过反向蚀斑筛选,得到重组病毒BHV-1/TK-/G+。PCR检测结果证实G蛋白基因已经插入到了亲本病毒BHV-1/TK-/LacZ+的基因组中,间接免疫荧光试验和western blot证实BHV-1/TK-/G+中的G蛋白基因在感染的细胞中获得了表达。本研究为研制BRSV及其他重要牛传染病的BHV-1病毒活载体疫苗奠定了基础。
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关键词
牛呼吸道合胞体病毒
G蛋白基因
牛疱疹病毒Ⅰ型
磷酸钙-DNA沉淀法
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职称材料
题名
表达牛呼吸道合胞体病毒G蛋白基因的重组Ⅰ型牛疱疹病毒的构建与鉴定
被引量：
8
1
作者
冯军科
朱远茂
任宪刚
祖立闯
李娇
史鸿飞
高欲燃
童光志
薛飞
机构
中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室／大动物传染病研究室
出处
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第2期81-85,共5页
基金
黑龙江省十一五科技攻关项目(GA06B202-3)
文摘
为构建表达牛呼吸道合胞体病毒(BRSV)G蛋白基因的牛疱疹病毒Ⅰ型(BHV-1)重组病毒,本研究将人工合成的BRSV全长G蛋白基因编码序列插入到巨细胞病毒(CMV)启动子之下构建TK基因缺失转移载体。利用磷酸钙-DNA沉淀法将该转移载体与亲本病毒BHV-1/TK-/LacZ+的基因组DNA共转染牛鼻甲细胞后收获增殖的病毒。通过反向蚀斑筛选,得到重组病毒BHV-1/TK-/G+。PCR检测结果证实G蛋白基因已经插入到了亲本病毒BHV-1/TK-/LacZ+的基因组中,间接免疫荧光试验和western blot证实BHV-1/TK-/G+中的G蛋白基因在感染的细胞中获得了表达。本研究为研制BRSV及其他重要牛传染病的BHV-1病毒活载体疫苗奠定了基础。
关键词
牛呼吸道合胞体病毒
G蛋白基因
牛疱疹病毒Ⅰ型
磷酸钙-DNA沉淀法
Keywords
bovine respiratory syncytial virus （BRSV）
G protein gene
bovine hepervirus-1
calcium phosphate-mediated transfection
分类号
S852.65 [农业科学—基础兽医学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
表达牛呼吸道合胞体病毒G蛋白基因的重组Ⅰ型牛疱疹病毒的构建与鉴定
冯军科
朱远茂
任宪刚
祖立闯
李娇
史鸿飞
高欲燃
童光志
薛飞
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2010
8
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