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B亚型禽偏肺病毒的分离鉴定及致病性研究被引量：5: 1; 作者于蒙蒙包媛玲 +11 位作者王素艳辛子琪刘鹏冯笑艳孟令宅郭茹张艳萍刘长军祁小乐李俊平王笑梅高玉龙《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第10期3540-3549,共10页; 旨在确定我国部分养鸡场的鸡出现甩头、精神萎靡和肿头综合征是否由禽偏肺病毒(aMPV)引起,本研究从山东、福建、黑龙江等地的发病蛋鸡和肉鸡场采集鼻甲骨、气管和肺等样品,首先利用aMPV特异性的RT-PCR方法对临床样品进行初步检测,将RT-... 展开更多; 关键词 B亚型禽偏肺病毒分离鉴定致病性; 在线阅读下载PDF 职称材料

表达鸡传染性法氏囊病病毒VP 2基因的重组火鸡疱疹病毒的构建及生物学特性分析被引量：3: 2; 作者李晓涵杨伏春 +8 位作者刘芮高立崔红玉张艳萍刘长军祁小乐王笑梅高玉龙李凯《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期656-662,共7页; 鸡传染性法氏囊病(IBD)是一种严重危害养禽业的高度致死性和免疫抑制性传染病。为研制IBD重组火鸡疱疹病毒(HVT)活载体疫苗,本研究构建了表达鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)保护性抗原VP2基因的重组HVT并对其体外生物学特性进行了分析。通... 展开更多; 关键词鸡传染性法氏囊病火鸡疱疹病毒 VP2基因生物学特性; 在线阅读下载PDF 职称材料

3′-U3区碱基突变不影响禽白血病病毒的体外复制能力被引量：1: 3; 作者高雁怩高奇 +9 位作者李晓菲贠炳岭祁小乐王永强刘长军崔红玉张艳萍高宏雷王笑梅高玉龙《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期608-614,共7页; 为探索近年蛋鸡分离株中出现规律性突变的J群禽白血病病毒(ALV-J)3′-U3区对病毒体外复制能力的影响,以ALV-J原型毒株HPRS-103为骨架,利用融合PCR技术构建含蛋鸡分离株SD09DP04的3′-U3区的嵌合病毒的cDNA克隆。嵌合病毒的感染性克隆与... 展开更多; 关键词 U3区嵌合病毒 J亚群禽白血病病毒生物学特性; 在线阅读下载PDF 职称材料

浅析鸡马立克氏病毒毒力进化与疫苗防控: 4; 作者刘永振李凯 +2 位作者刘长军高玉龙王笑梅《中国畜禽种业》 2015年第5期142-144,共3页; 鸡马立克氏病是由鸡马立克氏病病毒引起鸡的一种高度传染性、以淋巴细胞增生为特征的肿瘤病。由于MDV疫苗的广泛使用,该病已基本得到控制;但近些年来,MD的危害有进一步加重的趋势,免疫失败时有发生。MDV毒株毒力的不断增强可能是近年来M... 展开更多; 关键词毒力疫苗免疫效果马立克氏病病毒鸡马立克氏病高度传染性肿瘤病疫苗研究免疫失败病已二次免疫; 在线阅读下载PDF 职称材料

鸭肠炎病毒UL41基因缺失株的构建及其体外增殖能力分析被引量：1: 5; 作者杨伏春刘芮 +7 位作者李晓涵高立刘长军祁小乐崔红玉王笑梅高玉龙李凯《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第8期2689-2696,共8页; 旨在构建鸭肠炎病毒(DEV)UL41基因缺失毒株,并对其生物学特性进行分析,本研究以克隆有DEV UL41基因的重组黏粒D1为骨架,利用Red/ET重组技术构建缺失UL41基因的重组黏粒D1 dUL41;将UL41基因缺失重组黏粒D1 dUL41与其他4个克隆有DEV基因... 展开更多; 关键词鸭肠炎病毒 UL41基因基因缺失复制能力; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名B亚型禽偏肺病毒的分离鉴定及致病性研究被引量：5: 1; 作者于蒙蒙包媛玲王素艳辛子琪刘鹏冯笑艳孟令宅郭茹张艳萍刘长军祁小乐李俊平王笑梅高玉龙; 机构中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽免疫抑制病创新团队中国兽医药品监察所扬州大学江苏省动物重要疫病与人畜共患病协同创新中心; 出处《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第10期3540-3549,共10页; 基金国家肉鸡产业技术体系(CARS-41-G15) 黑龙江省自然科学基金(TD2019C003)。; 文摘旨在确定我国部分养鸡场的鸡出现甩头、精神萎靡和肿头综合征是否由禽偏肺病毒(aMPV)引起,本研究从山东、福建、黑龙江等地的发病蛋鸡和肉鸡场采集鼻甲骨、气管和肺等样品,首先利用aMPV特异性的RT-PCR方法对临床样品进行初步检测,将RT-PCR检测阳性样品接种Vero细胞进行病毒分离,然后利用G/F基因序列分析及间接免疫荧光试验(IFA)等鉴定病毒的亚型,最后将分离株感染SPF鸡进行致病性分析。结果显示:在采集的220份样品中,RT-PCR检测结果显示,有3份鼻甲骨样品在228bp左右出现特异性条带,将阳性病料接种Vero细胞盲传5代后,细胞出现变圆、聚集和融合等aMPV特征性细胞病变(CPE),表明成功分离到3株aMPV,将其分别命名为SD2001、SD2002和HLJ2101。G和F基因同源性分析显示,来自蛋鸡的SD2001、SD2002和来自肉鸡的HLJ2101分离株的G和F基因与其他B亚型aMPV毒株的核苷酸和氨基酸序列相似性均较高,核苷酸的相似性分别为93.4%~98.6%和95.6%~100.0%,氨基酸的相似性分别为88.7%~97.8%和97.6%~100.0%;而与A、C和D亚型的G和F基因同源性较低,核苷酸的相似性分别为27.1%~61.8%和66.8%~74.8%,氨基酸的相似性分别为16.1%~36.7%和72.5%~86.5%,这些结果表明,SD2001、SD2002和HLJ2101分离株属于B亚型aMPV。进一步利用B亚型aMPV特异性的阳性血清进行IFA检测,接种SD2001、SD2002和HLJ2101的Vero细胞均可以观察到特异性的绿色荧光信号,进一步证实3个分离株属于B亚型aMPV。选择SD2001感染3周龄SPF鸡进行了致病性研究,结果发现SPF鸡感染后3~6d出现精神萎靡、甩头和流鼻涕等症状,鼻甲骨、气管和肺也出现病理性损伤,其发病率为90%(18/20)。3株B亚型aMPV的分离不仅有助于明确我国部分养鸡场出现肿头综合征的发病原因,同时也证实B亚型aMPV流行毒株对鸡有明显的致病性,这些结果为我国家禽疫病的诊断和有效防控提供了重要理论依据。; 关键词 B亚型禽偏肺病毒分离鉴定致病性; Keywords subtype B avian metapneumovirus isolation identify pathogenicity; 分类号 S852.659.5 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名表达鸡传染性法氏囊病病毒VP 2基因的重组火鸡疱疹病毒的构建及生物学特性分析被引量：3: 2; 作者李晓涵杨伏春刘芮高立崔红玉张艳萍刘长军祁小乐王笑梅高玉龙李凯; 机构中国农业科学院哈尔滨兽医研究所; 出处《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期656-662,共7页; 基金国家自然科学基金联合基金项目(U20A2061)。; 文摘鸡传染性法氏囊病(IBD)是一种严重危害养禽业的高度致死性和免疫抑制性传染病。为研制IBD重组火鸡疱疹病毒(HVT)活载体疫苗,本研究构建了表达鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)保护性抗原VP2基因的重组HVT并对其体外生物学特性进行了分析。通过RT-PCR扩增IBDV超强毒株VP2基因并克隆入pCI载体,获得重组真核表达质粒pCI-VP2。用限制性内切酶将携带CMV启动子的VP2基因表达框架切下,连接于入门质粒pENTR,构建获得重组入门质粒pENTR-VP2。将pENTR-VP2与HVT重组黏粒H3-Kan/ccdB进行LR重组反应,构建重组表达黏粒H3-VP2。用H3-VP2与其他4个相互重叠并覆盖HVT全基因组的黏粒共同转染鸡胚成纤维细胞(CEF),拯救获得重组病毒rHVT-VP2。将重组病毒在CEF中连续传至20代后用PCR、间接免疫荧光试验和免疫印迹试验进行检测,并绘制重组病毒体外生长曲线,分析其体外复制特性。结果表明,重组病毒rHVT-VP2能够稳定表达VP2蛋白,rHVT-VP2在CEF中的复制能力与亲本病毒无明显差异。重组病毒rHVT-VP2免疫鸡后能够诱导产生IBDV中和抗体,并对IBDV强毒株攻击引起的死亡提供90%免疫保护。重组病毒rHVT-VP2的构建为研制IBD重组HVT活载体疫苗奠定了基础,对IBD的防控具有重要意义。; 关键词鸡传染性法氏囊病火鸡疱疹病毒 VP2基因生物学特性; Keywords infectious bursal disease herpesvirus of turkey VP2 gene biological characteristics; 分类号 S852.659.4 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名3′-U3区碱基突变不影响禽白血病病毒的体外复制能力被引量：1: 3; 作者高雁怩高奇李晓菲贠炳岭祁小乐王永强刘长军崔红玉张艳萍高宏雷王笑梅高玉龙; 机构中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽免疫抑制病创新团队; 出处《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期608-614,共7页; 基金国家自然科学基金(31372437) 现代农业肉鸡产业技术体系(nycytx-42-G3-01); 文摘为探索近年蛋鸡分离株中出现规律性突变的J群禽白血病病毒(ALV-J)3′-U3区对病毒体外复制能力的影响,以ALV-J原型毒株HPRS-103为骨架,利用融合PCR技术构建含蛋鸡分离株SD09DP04的3′-U3区的嵌合病毒的cDNA克隆。嵌合病毒的感染性克隆与原型毒株HPRS-103的感染性克隆分别在脂质体介导下转染DF-1细胞,对收获的病毒分别用间接免疫荧光试验、禽白血病抗原和反转录酶试剂盒检测,结果表明成功拯救到2株病毒。对拯救的2株病毒,进行其3′-U3区启动子活性和增强子活性的检测,以及复制动力学比较分析结果显示,出现特异性规律性突变的U3区对于原毒株的体外复制能力无显著影响。所构建的3′-U3区的嵌合病毒的成功拯救对于进一步探索近年ALV-J流行毒株其3′-U3区出现的规律性突变的功能及意义奠定了基础。; 关键词 U3区嵌合病毒 J亚群禽白血病病毒生物学特性; Keywords U3 region chimeric virus ALV-J biological characteristics; 分类号 S852.65 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名浅析鸡马立克氏病毒毒力进化与疫苗防控: 4; 作者刘永振李凯刘长军高玉龙王笑梅; 机构中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽免疫抑制病创新团队; 出处《中国畜禽种业》 2015年第5期142-144,共3页; 基金国家国际科技合作专项项目(2011DFA32210); 文摘鸡马立克氏病是由鸡马立克氏病病毒引起鸡的一种高度传染性、以淋巴细胞增生为特征的肿瘤病。由于MDV疫苗的广泛使用,该病已基本得到控制;但近些年来,MD的危害有进一步加重的趋势,免疫失败时有发生。MDV毒株毒力的不断增强可能是近年来MD危害加重的主要原因之一。根据MDV毒力进化趋势分析,MDV毒株毒力大约每十几年发生一次毒力跃迁,与之对应的疫苗研究也几乎得到同步发展。本文对MDV毒力进化、疫苗防控以及我们将来可选择的其他防控措施等方面进行了简要分析和概述。; 关键词毒力疫苗免疫效果马立克氏病病毒鸡马立克氏病高度传染性肿瘤病疫苗研究免疫失败病已二次免疫; 分类号 S858.31 [农业科学—临床兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名鸭肠炎病毒UL41基因缺失株的构建及其体外增殖能力分析被引量：1: 5; 作者杨伏春刘芮李晓涵高立刘长军祁小乐崔红玉王笑梅高玉龙李凯; 机构中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽免疫抑制病创新团队; 出处《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第8期2689-2696,共8页; 基金黑龙江省优秀青年科学基金(YQ2020C024)。; 文摘旨在构建鸭肠炎病毒(DEV)UL41基因缺失毒株,并对其生物学特性进行分析,本研究以克隆有DEV UL41基因的重组黏粒D1为骨架,利用Red/ET重组技术构建缺失UL41基因的重组黏粒D1 dUL41;将UL41基因缺失重组黏粒D1 dUL41与其他4个克隆有DEV基因组片段的亲本黏粒共转染鸭胚成纤维细胞(DEF),拯救获得UL41基因缺失毒株rDEV-SD19/dUL41。将该基因缺失病毒感染DEF后,提取病毒基因组进行PCR鉴定及测序,并利用间接免疫荧光试验检测该病毒感染细胞中UL41基因表达情况;绘制拯救的基因缺失病毒的生长曲线,分析其体外复制特性。PCR及测序结果显示,本研究成功构建了缺失UL41基因的重组黏粒D1 dUL41。将该基因缺失黏粒与其他含有DEV基因组的亲本黏粒共转染DEF后能够产生典型的蚀斑病变。PCR及测序结果显示,UL41基因成功从DEV基因组中缺失;间接免疫荧光试验发现,基因缺失病毒rDEV-SD19/dUL41感染DEF后,未见UL41蛋白表达。综上表明,本研究成功构建了DEV UL41基因缺失病毒。体外生长曲线显示,rDEV-SD19/dUL41在DEF中的复制能力明显低于亲本病毒,提示UL41蛋白在DEV复制中发挥重要作用。UL41基因缺失DEV的构建为进一步研究UL41基因在DEV感染和致病中的作用机制奠定了基础。; 关键词鸭肠炎病毒 UL41基因基因缺失复制能力; Keywords duck enteritis virus UL41 gene gene deletion replication ability; 分类号 S852.659.1 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	B亚型禽偏肺病毒的分离鉴定及致病性研究	于蒙蒙包媛玲王素艳辛子琪刘鹏冯笑艳孟令宅郭茹张艳萍刘长军祁小乐李俊平王笑梅高玉龙	《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心	2022	5	在线阅读下载PDF 职称材料
2	表达鸡传染性法氏囊病病毒VP 2基因的重组火鸡疱疹病毒的构建及生物学特性分析	李晓涵杨伏春刘芮高立崔红玉张艳萍刘长军祁小乐王笑梅高玉龙李凯	《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心	2023	3	在线阅读下载PDF 职称材料
3	3′-U3区碱基突变不影响禽白血病病毒的体外复制能力	高雁怩高奇李晓菲贠炳岭祁小乐王永强刘长军崔红玉张艳萍高宏雷王笑梅高玉龙	《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心	2015	1	在线阅读下载PDF 职称材料
4	浅析鸡马立克氏病毒毒力进化与疫苗防控	刘永振李凯刘长军高玉龙王笑梅	《中国畜禽种业》	2015	0	在线阅读下载PDF 职称材料
5	鸭肠炎病毒UL41基因缺失株的构建及其体外增殖能力分析	杨伏春刘芮李晓涵高立刘长军祁小乐崔红玉王笑梅高玉龙李凯	《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心	2022	1	在线阅读下载PDF 职称材料