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猪繁殖与呼吸综合征病毒NSP4切割IKKα抑制β干扰素产生的研究被引量：7: 1; 作者李长尧王胜男 +2 位作者李江南黄丽翁长江《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期425-428,共4页; IKK复合体由IKKα、IKKβ和IKKγ3个亚基组成。早期研究结果表明催化亚基IKKα在调节β干扰素(IFNβ)产生方面发挥重要作用。猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)感染及其非结构蛋白4(NSP4)表达能够显著抑制宿主的天然免疫反应。本研究结果显... 展开更多; 关键词猪繁殖与呼吸综合征病毒 NSP4 IKKα IFNβ NF-ΚB信号通路; 在线阅读下载PDF 职称材料

猪繁殖与呼吸综合征病毒RNA刺激下NLRP3与DDX19A共定位的研究: 2; 作者王胜男刘园园 +2 位作者胡亮李江南翁长江《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期500-502,共3页; NLRP3蛋白为核苷酸结合寡聚化结构域(NOD)样受体(NLRs)家族中含有脓素(Pyrin)结构域3的蛋白,它能够与调亡相关斑点样蛋白(ASC)以及半胱氨酸蛋白水解酶1(Caspase-1)组成炎性小体复合物,切割pro-IL-1β和pro-IL-18使其成为成熟的IL-1β和I... 展开更多; 关键词猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒多克隆抗体 NLRP3炎症小体 DDX19A; 在线阅读下载PDF 职称材料

猪繁殖与呼吸综合征病毒NSP4切割天然免疫分子NEMO抑制I型干扰素的产生被引量：3: 3; 作者张利杰李江南 +7 位作者胡亮张泉王岩于会彬黄丽李曦蔡雪辉翁长江《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期169-173,共5页; 猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)侵入宿主细胞后能够强烈抑制宿主天然免疫反应。早期研究表明,PRRSV 4个非结构蛋白NSP1、NSP2、NSP4和NSP11均可以抑制I型干扰素(IFN-I)的产生,但NSP4抑制IFN-I的机理尚无相关报道。本研究显示PRRSV感染... 展开更多; 关键词猪繁殖与呼吸综合征病毒 NSP4蛋白 NEMO蛋白 IFNβ; 在线阅读下载PDF 职称材料

一株抗猪脑心肌炎病毒VP2蛋白单克隆抗体的制备及抗原表位鉴定被引量：3: 4; 作者张泉张元峰 +4 位作者黄丽王胜男蔡雪辉熊涛翁长江《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第7期553-556,共4页; 为制备抗猪脑心肌炎病毒(EMCV)HB10株VP2蛋白的单克隆抗体(MAb)及鉴定其抗原表位,本研究利用原核表达系统表达的重组VP2蛋白(r VP2),纯化后将其免疫BALB/c小鼠,取免疫的小鼠脾细胞与SP2/0细胞融合,通过间接ELISA方法筛选出一株稳定分泌... 展开更多; 关键词猪脑心肌炎病毒 VP2蛋白单克隆抗体抗原表位; 在线阅读下载PDF 职称材料

口蹄疫病毒3C蛋白酶切割宿主蛋白PCBP2 被引量：3: 5; 作者杨春梅黄丽 +6 位作者王海伟于会彬李一经蔡雪辉于力唐丽杰翁长江《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期419-422,共4页; 口蹄疫病毒(FMDV)3C蛋白酶(3Cpro)能够通过切割翻译起始因子4G(eIF4G)抑制宿主蛋白合成,而宿主多聚胞嘧啶结合蛋白2(PCBP2)的主要功能之一是参与蛋白质合成。本研究通过western blot检测显示,在FMDV感染BHK-21细胞中PCBP2蛋白水平显著... 展开更多; 关键词口蹄疫病毒 3C蛋白酶 PCBP2 切割; 在线阅读下载PDF 职称材料

猪脑心肌炎病毒2B蛋白与RACK1蛋白相互作用的鉴定: 6; 作者王岩黄丽 +7 位作者崔尚金李江南杨春梅于会彬郭东伟张元峰夏雪山翁长江《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期339-342,共4页; 为筛选与猪脑心肌炎病毒(EMCV)2B蛋白相互作用的宿主蛋白,本实验利用酵母双杂交方法筛选BHK-21细胞表达文库制备与EMCV 2B蛋白相互作用的宿主蛋白RACK1蛋白。酵母共转化试验和免疫共沉淀试验表明两者可以特异性结合,激光共聚焦试验表明... 展开更多; 关键词猪脑心肌炎病毒酵母双杂交 2B蛋白 RACK1蛋白相互作用; 在线阅读下载PDF 职称材料

猪脑心肌炎病毒HB10株cDNA感染性克隆的构建: 7; 作者于会彬黄丽 +4 位作者张元峰李江南蔡雪辉崔尚金翁长江《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期665-668,共4页; 为建立猪脑心肌炎病毒(EMCV)HB10株cDNA感染性克隆,本研究利用反向遗传操作技术,采用RT-PCR一次性扩增EMCV-HB10株全长基因组(包括5'和3'UTR)序列,并直接克隆于低拷贝载体pOK12中,构建了EMCV感染性重组质粒pOK12-EMCV-HB10。将... 展开更多; 关键词猪脑心肌炎病毒 cDNA感染性克隆转录转染病毒拯救; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名猪繁殖与呼吸综合征病毒NSP4切割IKKα抑制β干扰素产生的研究被引量：7: 1; 作者李长尧王胜男李江南黄丽翁长江; 机构中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/动物病原监测与流行病学研究创新团队; 出处《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期425-428,共4页; 基金国家自然科学基金(31172333 31302063); 文摘 IKK复合体由IKKα、IKKβ和IKKγ3个亚基组成。早期研究结果表明催化亚基IKKα在调节β干扰素(IFNβ)产生方面发挥重要作用。猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)感染及其非结构蛋白4(NSP4)表达能够显著抑制宿主的天然免疫反应。本研究结果显示PRRSV NSP4可以与IKKα结合,并能够切割IKKα。而且,丝氨酸蛋白酶活性是PRRSV NSP4切割IKKα所必需的,其中NSP4中的3个蛋白酶活性位点(His^(39)、Asp^(64)和Ser^(118))中任何一个发生突变均无法切割IKKα。进一步研究证明,NSP4通过切割IKKα抑制了NF-κB和IFNβ启动子的活性。本研究结果表明,PRRSV NSP4除了通过切割NEMO和MAVS抑制NF-κB和IFNβ启动子活性以外,也可以通过切割IKKα抑制机体NF-κB的激活和IFNβ的表达。这些研究结果为阐明PRRSV逃逸宿主天然免疫提供了一个新的证据,为深入研究PRRSV的致病机理奠定了基础。; 关键词猪繁殖与呼吸综合征病毒 NSP4 IKKα IFNβ NF-ΚB信号通路; Keywords porcine reproductive and respiratory syndrome virus NSP4 IKKct IFNα NF-κB signal pathway; 分类号 S852.65 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名猪繁殖与呼吸综合征病毒RNA刺激下NLRP3与DDX19A共定位的研究: 2; 作者王胜男刘园园胡亮李江南翁长江; 机构中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/动物病原监测与流行病学研究创新团队; 出处《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期500-502,共3页; 基金国家自然科学基金(31172333 31302063); 文摘 NLRP3蛋白为核苷酸结合寡聚化结构域(NOD)样受体(NLRs)家族中含有脓素(Pyrin)结构域3的蛋白,它能够与调亡相关斑点样蛋白(ASC)以及半胱氨酸蛋白水解酶1(Caspase-1)组成炎性小体复合物,切割pro-IL-1β和pro-IL-18使其成为成熟的IL-1β和IL-18参与炎性反应。猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)的RNA能够被DDX19A解旋酶识别并激活NLRP3炎性小体,诱导炎症反应。为研究PRRSV RNA激活NLRP3炎症小体后DDX19A与NLRP3的亚细胞定位情况,本研究以PRRSV Hu N4株感染猪肺泡巨噬细胞(PAMs)的总RNA制备的c DNA为模板,扩增了猪nlrp3基因。将其在原核细胞中表达,并采用表达的NLRP3免疫BALB/c小鼠制备了鼠源抗NLRP3多克隆抗体。此外,提取PRRSV的RNA,转染于PAMs中,36 h后分别采用抗DDX19A和抗NLRP3的多克隆抗体进行检测,激光共聚焦试验结果显示:未转染PRRSV RNA的细胞中,DDX19A和NLRP3在PAMs中呈弥散表达,无共定位现象出现,而在转染PRRSV RNA的PAMs中DDX19A和NLRP3在细胞质中呈点状分布并出现共定位现象。本研究为阐明PRRSV感染激活NLRP3炎性小体的分子机制奠定了基础。; 关键词猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒多克隆抗体 NLRP3炎症小体 DDX19A; Keywords PRRSV polyclonal antibodies NLRP3 inflammasome DDX19A; 分类号 S852.65 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名猪繁殖与呼吸综合征病毒NSP4切割天然免疫分子NEMO抑制I型干扰素的产生被引量：3: 3; 作者张利杰李江南胡亮张泉王岩于会彬黄丽李曦蔡雪辉翁长江; 机构中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/动物病原监测与流行病学研究创新团队长江大学生命科学学院昆明理工大学生命科学与技术学院; 出处《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期169-173,共5页; 基金国家自然科学基金(31172333) 中国农业科学院增量项目(ZGKJ201106); 文摘猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)侵入宿主细胞后能够强烈抑制宿主天然免疫反应。早期研究表明,PRRSV 4个非结构蛋白NSP1、NSP2、NSP4和NSP11均可以抑制I型干扰素(IFN-I)的产生,但NSP4抑制IFN-I的机理尚无相关报道。本研究显示PRRSV感染猪肺泡巨噬细胞(PAMs)导致宿主蛋白NEMO(NF-κB essential modulator)被切割,产生一条约40 ku的蛋白条带。通过检测PRRSV编码蛋白酶的切割功能,进一步表明其NSP4是切割NEMO的关键蛋白酶。免疫共沉淀试验表明NSP4与NEMO具有特异性相互作用;激光共聚焦试验结果表明两者在细胞浆中共定位。通过双荧光素酶报告基因试验显示,NSP4过表达可以显著抑制仙台病毒(SeV)和NEMO诱导的IFNβ启动子的激活,导致IFNβ表达量显著下降(p<0.01)。本研究结果表明,PRRSV NSP4可以切割宿主蛋白NEMO,从而显著抑制IFNβ启动子的激活,从分子水平解释了PRRSV NSP4抑制IFNβ产生的机理。; 关键词猪繁殖与呼吸综合征病毒 NSP4蛋白 NEMO蛋白 IFNβ; Keywords porcine reproductive and respiratory syndrome virus NSP4 protein NEMO protein IFNβ; 分类号 S852.65 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名一株抗猪脑心肌炎病毒VP2蛋白单克隆抗体的制备及抗原表位鉴定被引量：3: 4; 作者张泉张元峰黄丽王胜男蔡雪辉熊涛翁长江; 机构长江大学生命科学学院中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/动物病原监测与流行病学研究创新团队; 出处《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第7期553-556,共4页; 基金国家自然科学基金(31300139) 国家自然科学基金(31172333); 文摘为制备抗猪脑心肌炎病毒(EMCV)HB10株VP2蛋白的单克隆抗体(MAb)及鉴定其抗原表位,本研究利用原核表达系统表达的重组VP2蛋白(r VP2),纯化后将其免疫BALB/c小鼠,取免疫的小鼠脾细胞与SP2/0细胞融合,通过间接ELISA方法筛选出一株稳定分泌抗VP2 MAb(1D3)。通过间接免疫荧光试验和western blot对该MAb的免疫活性和特异性进行鉴定,结果表明1D3 MAb仅能够特异性与EMCV全病毒反应。此外,通过构建截短的VP2蛋白重组质粒,采用western blot的方法对VP2蛋白抗原表位进行鉴定,初步确定MAb 1D3识别的线性表位区域为89DGGVFGAALRRH100。本实验结果为进一步研究VP2蛋白的功能及建立EMCV检测方法奠定了基础。; 关键词猪脑心肌炎病毒 VP2蛋白单克隆抗体抗原表位; Keywords encephalomyocarditis virus VP2 protein monoclonal antibody antigen epitopes; 分类号 S852.65 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名口蹄疫病毒3C蛋白酶切割宿主蛋白PCBP2 被引量：3: 5; 作者杨春梅黄丽王海伟于会彬李一经蔡雪辉于力唐丽杰翁长江; 机构东北农业大学生命科学学院中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/动物病原监测与流行病学研究创新团队东北农业大学动物医学学院; 出处《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期419-422,共4页; 基金国家自然科学基金(31300139) 中国农业科学院基本科研业务费预算增量项目(2013ZL034); 文摘口蹄疫病毒(FMDV)3C蛋白酶(3Cpro)能够通过切割翻译起始因子4G(eIF4G)抑制宿主蛋白合成,而宿主多聚胞嘧啶结合蛋白2(PCBP2)的主要功能之一是参与蛋白质合成。本研究通过western blot检测显示,在FMDV感染BHK-21细胞中PCBP2蛋白水平显著降低。为鉴定FMDV 3Cpro是否具有切割PCBP2蛋白的功能,本研究采用免疫共沉淀试验和激光共聚焦检测显示,FMDV 3Cpro和PCBP2在细胞内存在相互作用,并且共定位于细胞质中。进一步研究显示,FMDV 3Cpro能够切割PCBP2,而且具有剂量依赖性。此外,FMDV 3Cpro活性位点突变(H46Y)试验结果表明,FMDV 3Cpro的蛋白酶活性是切割蛋白PCBP2所必需的。FMDV 3Cpro切割PCBP2靶位点序列的鉴定及FMDV 3Cpro切割PCBP2的生物学意义有待深入研究。; 关键词口蹄疫病毒 3C蛋白酶 PCBP2 切割; Keywords foot-and-mouth disease virus 3C proteinase PCBP2 cleavage; 分类号 S852.65 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名猪脑心肌炎病毒2B蛋白与RACK1蛋白相互作用的鉴定: 6; 作者王岩黄丽崔尚金李江南杨春梅于会彬郭东伟张元峰夏雪山翁长江; 机构昆明理工大学生命科学与技术学院中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/动物病原监测与流行病学研究创新团队; 出处《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期339-342,共4页; 基金国家自然科学基金(31300139) 中国农业科学院基本科研业务费预算增量项目(2013ZL034); 文摘为筛选与猪脑心肌炎病毒(EMCV)2B蛋白相互作用的宿主蛋白,本实验利用酵母双杂交方法筛选BHK-21细胞表达文库制备与EMCV 2B蛋白相互作用的宿主蛋白RACK1蛋白。酵母共转化试验和免疫共沉淀试验表明两者可以特异性结合,激光共聚焦试验表明两者共定位于细胞质中。为定位RACK1与2B蛋白相互作用区域,本研究构建了RACK1截短表达重组质粒,并将其与pCAGGS-Flag-2B共转染HEK293细胞,利用免疫共沉淀试验验证其相互作用区域。结果显示2B蛋白与宿主细胞RACK1蛋白存在相互作用,并且证明相互作用区域位于RACK1蛋白的N端。; 关键词猪脑心肌炎病毒酵母双杂交 2B蛋白 RACK1蛋白相互作用; Keywords encephalomyocarditis virus yeast-two-hybrid 2B protein RACK1 protein interaction; 分类号 S852.65 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名猪脑心肌炎病毒HB10株cDNA感染性克隆的构建: 7; 作者于会彬黄丽张元峰李江南蔡雪辉崔尚金翁长江; 机构中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/动物病原监测与流行病学研究创新团队; 出处《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期665-668,共4页; 基金国家自然科学基金(31300139 31172333); 文摘为建立猪脑心肌炎病毒(EMCV)HB10株cDNA感染性克隆,本研究利用反向遗传操作技术,采用RT-PCR一次性扩增EMCV-HB10株全长基因组(包括5'和3'UTR)序列,并直接克隆于低拷贝载体pOK12中,构建了EMCV感染性重组质粒pOK12-EMCV-HB10。将重组质粒体外转录后转染BHK-21细胞进行病毒拯救。结果显示,转染细胞36 h后,出现典型的细胞病变。拯救病毒rEMCV-HB10全基因组经测序鉴定显示,与亲本病毒开放阅读框比较,其仅在1D基因出现两个核苷酸突变:即A37G(R13K)和G187C(M63I),该突变可以作为区别亲本病毒的标志。间接免疫荧光和生长曲线试验结果显示,这两个突变并不影响VP1蛋白的表达及病毒拯救,并且拯救病毒与亲本病毒具有相似的生长特性。本研究构建了感染性EMCV-HB10 cDNA克隆,为深入研究EMCV的致病分子机理提供了有效的反向遗传操作平台。; 关键词猪脑心肌炎病毒 cDNA感染性克隆转录转染病毒拯救; Keywords encephalomyocarditis virus cDNA clone transcription and transfection virus rescue; 分类号 S852.65 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	猪繁殖与呼吸综合征病毒NSP4切割IKKα抑制β干扰素产生的研究	李长尧王胜男李江南黄丽翁长江	《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心	2016	7	在线阅读下载PDF 职称材料
2	猪繁殖与呼吸综合征病毒RNA刺激下NLRP3与DDX19A共定位的研究	王胜男刘园园胡亮李江南翁长江	《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心	2016	0	在线阅读下载PDF 职称材料
3	猪繁殖与呼吸综合征病毒NSP4切割天然免疫分子NEMO抑制I型干扰素的产生	张利杰李江南胡亮张泉王岩于会彬黄丽李曦蔡雪辉翁长江	《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心	2014	3	在线阅读下载PDF 职称材料
4	一株抗猪脑心肌炎病毒VP2蛋白单克隆抗体的制备及抗原表位鉴定	张泉张元峰黄丽王胜男蔡雪辉熊涛翁长江	《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心	2015	3	在线阅读下载PDF 职称材料
5	口蹄疫病毒3C蛋白酶切割宿主蛋白PCBP2	杨春梅黄丽王海伟于会彬李一经蔡雪辉于力唐丽杰翁长江	《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心	2014	3	在线阅读下载PDF 职称材料
6	猪脑心肌炎病毒2B蛋白与RACK1蛋白相互作用的鉴定	王岩黄丽崔尚金李江南杨春梅于会彬郭东伟张元峰夏雪山翁长江	《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心	2014	0	在线阅读下载PDF 职称材料
7	猪脑心肌炎病毒HB10株cDNA感染性克隆的构建	于会彬黄丽张元峰李江南蔡雪辉崔尚金翁长江	《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心	2015	0	在线阅读下载PDF 职称材料