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现代生物技术在猪病诊断和防治中的应用 被引量:9
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作者 崔宇超 崔尚金 《猪业科学》 2011年第8期32-37,共6页
生物技术是指应用生命科学研究成果,以人们意志设计,对生物或生物的成分进行改造和利用的技术。现在,多种猪病混合感染严重威胁着我国的养猪业。本文简述了生物技术在猪病的诊断和防治中的部分应用。生物技术在猪病诊断中的应用主要包... 生物技术是指应用生命科学研究成果,以人们意志设计,对生物或生物的成分进行改造和利用的技术。现在,多种猪病混合感染严重威胁着我国的养猪业。本文简述了生物技术在猪病的诊断和防治中的部分应用。生物技术在猪病诊断中的应用主要包括蛋白的克隆表达与纯化技术,从而做成敏感性、特异性高的试剂盒;生物技术在猪病防治中的应用主要包括研单位疫苗、(非复制性及)活载体疫苗和干扰素等。生物技术在猪病的诊断和防治中还有很多其他应用,本文只是抛砖引玉。 展开更多
关键词 生物技术 猪病 诊断 防治
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生物技术与制药
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作者 孟庆文 李媛 +1 位作者 金红 于康震 《草食家畜》 2001年第S2期63-64,92,共3页
关键词 基因组学 医药生物技术 功能性 重点实验室 基因疗法 蛋白质组学 中国农业科学院 哈尔滨 兽医研究所 临床试验
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猪流行性腹泻病毒分子生物学研究进展 被引量:51
3
作者 孙东波 冯力 +1 位作者 时洪艳 陈建飞 《动物医学进展》 CSCD 2006年第10期11-14,共4页
猪流行性腹泻病毒在Vero细胞上培养成功后,病毒全基因组的序列和分子结构特征,结构蛋白和非结构蛋白的生物学特性和功能,病原学、血清学和分子生物学的诊断技术,体液免疫、细胞免疫和局部黏膜免疫的机理,疫苗和病毒的细胞受体等方面得... 猪流行性腹泻病毒在Vero细胞上培养成功后,病毒全基因组的序列和分子结构特征,结构蛋白和非结构蛋白的生物学特性和功能,病原学、血清学和分子生物学的诊断技术,体液免疫、细胞免疫和局部黏膜免疫的机理,疫苗和病毒的细胞受体等方面得到了广泛的研究。但是,与其他冠状病毒相比,猪流行腹泻病毒的研究还比较滞后,许多研究还没有开展或不够深入,为了能加快对猪流行性腹泻病毒研究进程,对其最近的分子生物学研究进展做了综述,为猪流行性腹泻病毒的深入研究提供参考。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻病毒 分子生物学 分子结构特征 病原学 血清学 诊断技术 体液免疫
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禽网状内皮组织增生症流行现状及检测技术研究进展 被引量:11
4
作者 邓小芸 祁小乐 +4 位作者 高玉龙 高宏雷 秦立廷 王永强 王笑梅 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2010年第9期93-96,共4页
禽网状内皮组织增生症(RE)是禽类一种重要的致瘤性和免疫抑制性疾病。近年来,国内外鸡群中网状内皮组织增生症病毒(REV)流行比较严重;REV与马立克病病毒(MDV)、鸡贫血病病毒(CAV)和J亚群禽白血病病毒(Avianleukosis virus subgroup J,AL... 禽网状内皮组织增生症(RE)是禽类一种重要的致瘤性和免疫抑制性疾病。近年来,国内外鸡群中网状内皮组织增生症病毒(REV)流行比较严重;REV与马立克病病毒(MDV)、鸡贫血病病毒(CAV)和J亚群禽白血病病毒(Avianleukosis virus subgroup J,ALV-J)几种免疫抑制性病毒的混合感染在我国部分养鸡场中均普遍存在,使得鸡群处于免疫力低下的状态,导致禽流感、新城疫等重要疫苗免疫失败,并容易造成继发感染,使疫病的诊断和防控难度加大。另外,REV可以整合到MDV和鸡痘病毒(Fowlpox virus,FPV)基因组中,从而导致商品化疫苗受到污染,并可用做将外源基因插入到鸡和哺乳动物细胞内的表达载体;基于REV传统检测方法的基础上,新型的分子生物学检测技术如PCR、实时荧光PCR、LAMP提高了诊断REV的敏感性和特异性。 展开更多
关键词 禽网状内皮组织增生症 流行 感染 基因重组 检测技术
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鸭β-防御素10基因的克隆、遗传进化分析及其生物学特性的初步研究 被引量:9
5
作者 廖文艳 马得莹 +4 位作者 王瑞琴 韩宗玺 邵昙昊 李慧昕 刘胜旺 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第9期1320-1326,共7页
旨在从鸭肝脏组织中克隆鸭β-防御素10(AvBD10)基因,并在原核表达重组鸭AvBD10蛋白,研究重组鸭AvBD10蛋白的体外抗菌活性与理化特性。试验采用RT-PCR法,从鸭肝脏组织中扩增鸭AvBD10基因,测定该基因在鸭各组织器官中的分布;将鸭AvBD10基... 旨在从鸭肝脏组织中克隆鸭β-防御素10(AvBD10)基因,并在原核表达重组鸭AvBD10蛋白,研究重组鸭AvBD10蛋白的体外抗菌活性与理化特性。试验采用RT-PCR法,从鸭肝脏组织中扩增鸭AvBD10基因,测定该基因在鸭各组织器官中的分布;将鸭AvBD10基因克隆到大肠杆菌原核表达载体pGEX-6p-1上,构建重组表达质粒pGEX-duck AvBD10,将重组质粒转化大肠杆菌BL21,用IPTG诱导表达;亲和层析纯化蛋白,利用薄层平皿琼脂糖孔穴扩散法测定重组鸭AvBD10蛋白的体外抗菌活性与理化特性。结果表明,鸭AvBD10 cDNA大小为169bp,编码55个氨基酸残基,与鸡AvBD10氨基酸同源性为85.5%。该基因仅在不同日龄鸭肝脏与肾脏组织中大量表达。重组鸭AvBD10融合蛋白的分子量约为30 ku,重组蛋白占菌体总蛋白的34%。重组鸭AvBD10蛋白对多杀性巴氏杆菌、金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌有抗菌活性。结果,从鸭肝脏组织中扩增了鸭AvBD10基因,该基因仅在不同日龄鸭肝脏与肾脏组织中大量表达。重组鸭AvBD10融合蛋白具有广谱抗菌活性,该重组蛋白对温度和酸碱度有很高的稳定性。 展开更多
关键词 AvBD10 重组蛋白 抗菌活性
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蜜蜂KBV和APV病毒RT-PCR检测技术研究 被引量:6
6
作者 周婷 姚军 +2 位作者 兰文升 温建新 王强 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期459-462,共4页
根据蜜蜂克什米尔病毒(Kashmirbeevirus,KBV)和急性麻痹病毒(Acuteparalysisvirus,APV)的RNA聚合酶基因序列,参照DonStoltz报道的引物KBV1、KBV2,美国农业部提供的引物DC62F、DC682R,对美国农业部惠赠的标准KBV和APV的RNA聚合酶基因片段... 根据蜜蜂克什米尔病毒(Kashmirbeevirus,KBV)和急性麻痹病毒(Acuteparalysisvirus,APV)的RNA聚合酶基因序列,参照DonStoltz报道的引物KBV1、KBV2,美国农业部提供的引物DC62F、DC682R,对美国农业部惠赠的标准KBV和APV的RNA聚合酶基因片段,以及2001-2002年收集到的中国21个省市的180份疑似KBV和APV病蜂RNA聚合酶基因片段进行RT-PCR。对以KBV1、KBV2和DC62F、DC682R为引物扩增出的RNA聚合酶基因片段进行克隆、转化,并对克隆结果测序,证明其可靠性。建立了用分子生物学方法检测蜜蜂KBV和APV病毒的技术,有一定的应用前景。检测结果表明:到目前为止,我国蜜蜂群中未发现KBV和APV病毒病。 展开更多
关键词 RT-PCR 检测技术 蜜蜂克什米尔病毒 蜜蜂急性麻痹病毒 口岸检疫 成蜂病
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基于Mx启动子和荧光素酶报告基因定量检测鸡Ⅰ型干扰素生物学活性的研究 被引量:4
7
作者 陈伟业 葛金英 +6 位作者 肇慧君 胡森 温志远 曹文雁 王喜军 黄克和 步志高 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期123-128,共6页
为了探索并建立快速、敏感、准确的Ⅰ型干扰素生物学活性定量分析方法,本研究克隆了鸡Mx启动子(Mxp),并在其下游连接荧光素酶(Luciferase,luc)报告基因,构建鸡Ⅰ型干扰素活性检测质粒pMxp-luc。以pMxp-luc瞬时转染鸡胚成纤维细胞系DF-1,... 为了探索并建立快速、敏感、准确的Ⅰ型干扰素生物学活性定量分析方法,本研究克隆了鸡Mx启动子(Mxp),并在其下游连接荧光素酶(Luciferase,luc)报告基因,构建鸡Ⅰ型干扰素活性检测质粒pMxp-luc。以pMxp-luc瞬时转染鸡胚成纤维细胞系DF-1,24 h后用鸡IFN-α/β处理细胞,结果荧光素酶基因在Mx启动子的作用下获得转录表达;荧光素酶的表达量与干扰素的抗病毒活性有着良好的线性相关性,并在干扰素处理细胞6 h后就可以检测;对鸡IFN-α和IFN-β检测的敏感性分别约为抗病毒活性定量检测方法的10和100倍。该检测系统与传统抗病毒定量检测方法相比,具有快速简便、准确敏感、便于高通量检测等优势,在禽类乃至哺乳动物干扰素生物学基础和应用研究及产业化过程中具有重要应用价值。 展开更多
关键词 鸡Ⅰ型干扰素 生物活性检测 鸡Mx启动子 萤光素酶
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兽医工作在“同一健康”实践中的作用与地位 被引量:4
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作者 崔基贤 王靖飞 +1 位作者 王幼明 谷志大 《中国动物检疫》 CAS 2014年第4期37-40,共4页
"同一健康"理念和方法着眼于人类、动物和环境健康的联系,强调跨学科、跨领域、跨部门、跨区域的共同协作,考虑的是通过改善环境来降低人和动物传染病或慢性病的发病和传播扩散风险。该理念已经被联合国粮农组织(FAO)、世界... "同一健康"理念和方法着眼于人类、动物和环境健康的联系,强调跨学科、跨领域、跨部门、跨区域的共同协作,考虑的是通过改善环境来降低人和动物传染病或慢性病的发病和传播扩散风险。该理念已经被联合国粮农组织(FAO)、世界动物卫生组织(OIE)和世界卫生组织(WHO)等国际组织以及部分国家机构和跨学科专业团体看作疫病预防控制策略的主要构成元素。本文以国际化视野,从兽医的角度阐释"同一健康"理念,分析兽医工作在"同一健康"实践中的作用与地位。 展开更多
关键词 同一健康 兽医工作 作用 地位
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猪瘟病毒研究进展与防控中的几项实用技术 被引量:2
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作者 胡峰 崔玉东 崔尚金 《猪业科学》 2010年第10期78-83,共6页
猪瘟是由猪瘟病毒引起的一种急性、发热性、接触性、高度传染性疾病,可引起各种年龄猪发病。世界动物卫生组织(OIE)将猪瘟列为A类16种法定传染病之一。我国早在1955年就研制成功了猪瘟兔化弱毒疫苗(HCLV),并在预防猪瘟的发生中起到了重... 猪瘟是由猪瘟病毒引起的一种急性、发热性、接触性、高度传染性疾病,可引起各种年龄猪发病。世界动物卫生组织(OIE)将猪瘟列为A类16种法定传染病之一。我国早在1955年就研制成功了猪瘟兔化弱毒疫苗(HCLV),并在预防猪瘟的发生中起到了重要作用。近年来猪瘟的流行和发病出现了新的变化,如非典型性、持续性感染以及免疫失败等。当前,猪瘟仍是世界养猪业的一大威胁,造成了严重的经济损失。通过分析国内外猪瘟的发生特点,并结合国内外公开发表和学术会议交流的学术文献,总结了猪瘟病毒的分子特征、猪瘟的最新流行特点、诊断技术以及疫苗研究进展,并总结猪瘟防控中的几项实用技术,以期为猪瘟的研究与防控提供一定的参考。 展开更多
关键词 猪瘟 非典型性 持续性 猪瘟兔化弱毒疫苗
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猪细小病毒的分子生物学研究 被引量:1
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作者 崔尚金 戚亭 《猪业科学》 2008年第2期22-24,共3页
猪细小病毒病是由猪细小病毒(porcine parvovirus,PPV)感染所引起的猪的重要传染病之一。该病的主要特征为受感染的母猪,特别是初产母猪及血清学阴性经产母猪发生流产、不孕、产死胎、畸形胎、木乃伊胎及弱仔等。该病广泛存在于世... 猪细小病毒病是由猪细小病毒(porcine parvovirus,PPV)感染所引起的猪的重要传染病之一。该病的主要特征为受感染的母猪,特别是初产母猪及血清学阴性经产母猪发生流产、不孕、产死胎、畸形胎、木乃伊胎及弱仔等。该病广泛存在于世界各地并在大多数猪场呈地方性流行,严重地影响着养猪业的发展,该病的严重危害及该病病原独特的生物学特性受到了国内外许多学者的关注。 展开更多
关键词 猪细小病毒病 分子生物学 经产母猪 生物学特性 初产母猪 传染病 血清学 木乃伊
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CRISPR技术在病毒学研究中的应用
11
作者 高帅 李芳 +3 位作者 李赞 王涛 赵东明 步志高 《中国动物检疫》 CAS 2020年第6期60-67,共8页
近年来,CRISPR/Cas系统凭借其操作简单、靶向精准、效率高等优点,在生物学领域的应用潜力备受关注。通过总结CRISPR技术在抗病毒药物潜在靶点筛选、疫苗开发、病毒核酸快速检测、病毒性疾病临床治疗等领域的应用,阐明了CRISPR/Cas系统... 近年来,CRISPR/Cas系统凭借其操作简单、靶向精准、效率高等优点,在生物学领域的应用潜力备受关注。通过总结CRISPR技术在抗病毒药物潜在靶点筛选、疫苗开发、病毒核酸快速检测、病毒性疾病临床治疗等领域的应用,阐明了CRISPR/Cas系统目前面临的挑战及相应的解决措施。作为一种基因编辑技术,CRISPR/Cas系统可以快捷地筛选出多种病毒的潜在药物靶点;可以改造病毒基因组,为研发基因缺失活疫苗做储备;可以快速准确诊断病毒性疾病,也可以为乙肝、艾滋病等病毒性疾病的治疗提供新方向。CRISPR/Cas系统仍存在致癌风险、脱靶效应以及递送系统的安全准确性不足等问题。随着CRISPR技术的不断完善,该技术必将会给病毒性疾病的检测诊断与预防控制带来重大变革。 展开更多
关键词 CRISPR 病毒 疫苗开发 核酸检测 临床研究
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中国高致病性禽流感免疫预防风险评估 被引量:16
12
作者 吴春艳 王靖飞 +5 位作者 赵丽丹 李静 吉增涛 杨彦涛 王笑梅 童光志 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期621-624,共4页
疫苗接种是当前我国预防和控制HPAI疫情的有效手段之一。由于影响HPAI免疫预防效果的因素众多,会给免疫预防带来风险。对这些风险因子进行识别,并系统分析其所引起的风险程度的高低,进而采取针对性的风险管理措施,能有效提高免疫预防的... 疫苗接种是当前我国预防和控制HPAI疫情的有效手段之一。由于影响HPAI免疫预防效果的因素众多,会给免疫预防带来风险。对这些风险因子进行识别,并系统分析其所引起的风险程度的高低,进而采取针对性的风险管理措施,能有效提高免疫预防的效果。本研究首次运用层次分析法(Analytic Hierarchy Process,AHP)构建了HPAI免疫预防风险评估模型,通过确定风险因子权重,依权重大小对风险因子进行排序,确定风险等级。分析结果表明:管理不良、接种操作不规范、实验室监测等是我国免疫预防的高风险因素。通过对免疫预防风险进行综合分析,为HPAI免疫预防管理和决策提供了科学依据。 展开更多
关键词 高致病性禽流感 免疫预防 层次分析法 风险评估
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猪圆环病毒2型疫苗的研究进展 被引量:41
13
作者 王一平 郭龙军 +1 位作者 唐青海 刘长明 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第9期1337-1345,共9页
猪圆环病毒2型(PCV2)是引起断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)的主要病原,给全球养猪业造成了巨大经济损失。PCV2感染可以破坏动物机体的免疫系统,造成严重的免疫抑制,容易诱发多种细菌及病毒的混合感染与继发感染,给疾病的诊断和治疗带... 猪圆环病毒2型(PCV2)是引起断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)的主要病原,给全球养猪业造成了巨大经济损失。PCV2感染可以破坏动物机体的免疫系统,造成严重的免疫抑制,容易诱发多种细菌及病毒的混合感染与继发感染,给疾病的诊断和治疗带来巨大的困难。疫苗免疫接种是防控PCV2感染的有效手段,有关PCV2疫苗的研究已成为国内外学者的关注热点。迄今为止,欧美几家跨国公司已先后推出商品化的PCV2灭活疫苗、亚单位疫苗及嵌合病毒疫苗,国内也已研制出PCV2灭活疫苗,这些疫苗的推广应用为有效防控猪圆环病毒病发挥了重要作用。鉴于这些疫苗尚不能完全阻断PCV2传播,无法彻底清除体内感染的病毒,因此,开发高效、价廉的新型活载体疫苗、核酸疫苗及标记疫苗是今后研究的趋势。笔者在本文中概括地介绍了目前商品化的PCV2疫苗的特性和免疫效力,并对近年来有关PCV2活载体疫苗、核酸疫苗及标记疫苗等新型疫苗的研究进展进行综述,以期为猪圆环病毒病的防制提供参考。 展开更多
关键词 猪圆环病毒2型 疫苗 研究
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伪狂犬病病毒基因缺失及活载体疫苗研究进展 被引量:11
14
作者 周国辉 仇华吉 +1 位作者 田志军 童光志 《动物医学进展》 CSCD 2005年第3期19-22,共4页
伪狂犬病是由伪狂犬病病毒引起的多种畜、禽及野生动物的一种以发热、奇痒、脑脊髓炎为主要症状的急性传染病。该病每年给养猪业造成的损失达数十亿美元,目前对该病主要是以疫苗防制为主。随着基因工程技术的不断更新和发展,研制更加安... 伪狂犬病是由伪狂犬病病毒引起的多种畜、禽及野生动物的一种以发热、奇痒、脑脊髓炎为主要症状的急性传染病。该病每年给养猪业造成的损失达数十亿美元,目前对该病主要是以疫苗防制为主。随着基因工程技术的不断更新和发展,研制更加安全、有效的基因工程疫苗对该病的防治将会有重要的意义。文章对伪狂犬病基因缺失疫苗及活载体疫苗的研究进行了综述。 展开更多
关键词 伪狂犬病病毒 活载体疫苗 基因缺失疫苗 种畜 基因工程疫苗 防制 脑脊髓炎 主要症状 研究进展 发热
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中国H5N1亚型高致病性禽流感病毒抗原变异株的鉴定分析 被引量:8
15
作者 李雁冰 施建忠 +7 位作者 赵海丹 田国彬 王冬 宋家升 杨德全 邓国华 王秀荣 陈化兰 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期305-309,共5页
对引起中国2006年山西、宁夏2省(区)H5N1亚型禽流感疫情的代表毒株——A/chicken/Shanxi/2/2006(H5N1)(CK/SX/06)进行了全面研究。结果表明该病毒具有高致病性禽流感病毒(HPAIV)特征,基因组序列分析发现其8个基因片段与中国传统H5N1亚... 对引起中国2006年山西、宁夏2省(区)H5N1亚型禽流感疫情的代表毒株——A/chicken/Shanxi/2/2006(H5N1)(CK/SX/06)进行了全面研究。结果表明该病毒具有高致病性禽流感病毒(HPAIV)特征,基因组序列分析发现其8个基因片段与中国传统H5N1亚型禽流感病毒GS/GD/1/96(H5N1)存在较大差异,属于新的基因型——山西鸡型;抗原性分析结果表明其在抗原性方面与GS/GD/1/96同样存在较大变异,将其命名为"山西鸡型"抗原变异株;以106EID50.0.1 mL-1剂量将该病毒经鼻腔接种4周龄SPF鸭以评价其对水禽的感染能力,结果表明其不感染鸭;常规方法接种BALB/c小鼠以评价其对哺乳动物的感染和致病能力,结果表明其能感染小鼠,但不引起死亡,呈低致病力。说明该类型高致病性H5N1 HPAIV目前仅危害鸡,不具备感染水禽的能力,感染哺乳动物但不致死。该类型病毒的出现与流行为中国禽流感的免疫与防制提出新的课题。 展开更多
关键词 H5N1 HPAIV CK/SX/2/06 山西鸡型 抗原变异
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传染性支气管炎病毒疫苗研究进展 被引量:14
16
作者 田占成 王云峰 +1 位作者 童光志 刘光远 《动物医学进展》 CSCD 2005年第6期21-24,共4页
传染性支气管炎给我国规模化养鸡业造成巨大的经济损失,由此尝试研制重组鸡痘病毒传染性支气管炎病毒基因工程疫苗了解其免疫效应,以期获得高效而安全的基因工程疫苗。为更好地了解鸡传染性支气管炎的防治现状,文章从各种表达载体系统... 传染性支气管炎给我国规模化养鸡业造成巨大的经济损失,由此尝试研制重组鸡痘病毒传染性支气管炎病毒基因工程疫苗了解其免疫效应,以期获得高效而安全的基因工程疫苗。为更好地了解鸡传染性支气管炎的防治现状,文章从各种表达载体系统表达传染性支气管炎病毒蛋白的优缺点及其产生免疫保护效应的角度,对近年来传染性支气管炎病毒疫苗研究的发展状况做了简要概述,且针对传染性支气管炎病毒基因工程疫苗现存的问题,展望了将来的发展趋势。 展开更多
关键词 传染性支气管炎病毒 传染性支气管炎 弱毒疫苗 灭活疫苗 基因工程疫苗 核酸疫苗
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鸡球虫基因工程疫苗研究进展 被引量:16
17
作者 吴德铭 毕英佐 +1 位作者 于康震 曹永长 《动物医学进展》 CSCD 2004年第1期57-60,共4页
近年来 ,应用鸡球虫基因工程疫苗预防球虫病的试验报道逐年递增 ,许多保护性抗原陆续被发现。各种研究结果表明 ,动物机体的抗球虫免疫以细胞免疫为主 ,因此能否诱导机体产生细胞免疫是判定虫体蛋白能否作为重组疫苗成分的标准之一 ;此... 近年来 ,应用鸡球虫基因工程疫苗预防球虫病的试验报道逐年递增 ,许多保护性抗原陆续被发现。各种研究结果表明 ,动物机体的抗球虫免疫以细胞免疫为主 ,因此能否诱导机体产生细胞免疫是判定虫体蛋白能否作为重组疫苗成分的标准之一 ;此外 ,研究结果也显示 ,孢子或裂裂子生殖阶段的部分抗原可以诱导机体产生抗球虫免疫 ;抗有性生殖阶段抗原的抗体也可以减少攻虫雏鸡的排卵囊量。虽然在试验条件下 ,重组基因工程疫苗可以减轻球虫感染所造成的病理损伤或者减少卵囊在体内的繁殖数量 ,但距离应用于生产还相差较远 ,因此仍然有必要对相关的一系列问题进行更加详细和更深一层的研究 。 展开更多
关键词 鸡球虫 基因工程 疫苗 保护性抗原 细胞免疫
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传染性喉气管炎新城疫鸡痘重组病毒免疫效力的研究 被引量:4
18
作者 智海东 王云峰 +3 位作者 张晶 王玫 王凤雪 童光志 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第8期807-811,共5页
在表达鸡传染性喉气管炎病毒(ILTV)糖蛋白gB基因和新城疫病毒(NDV)F基因的重组鸡痘病毒(rF-PV-gB-F)安全性检验合格后,以5.0×101~5.0×104PFU不同含量按0.1 mL/鸡的剂量免疫100只30日龄SPF鸡,30 d后分组分别用ILTVWG株和NDVF4... 在表达鸡传染性喉气管炎病毒(ILTV)糖蛋白gB基因和新城疫病毒(NDV)F基因的重组鸡痘病毒(rF-PV-gB-F)安全性检验合格后,以5.0×101~5.0×104PFU不同含量按0.1 mL/鸡的剂量免疫100只30日龄SPF鸡,30 d后分组分别用ILTVWG株和NDVF48E9株强毒进行攻击.免疫鸡抗鸡痘病毒抗体都转为阳性,痘反应和接种剂量有关,重组疫苗的最小反应剂量为50PFU.重组疫苗可以诱发对新城疫和传染性喉气管炎的保护,0.1mL/鸡的接种量在500~5 000PFU浓度范围内的免疫效果最好,对于ILTV攻击的发病保护率在70%以上,对NDV强毒攻击的抗死亡保护率可以达到80%,这为进一步考察疫苗的免疫效力试验以及进行田间试验奠定了基础. 展开更多
关键词 传染性喉气管炎 新城疫 重组鸡痘病毒 最佳免疫剂量 安全性
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鹅β-防御素基因克隆与生物学特性的初步分析 被引量:8
19
作者 周财源 蔺利娟 +3 位作者 韩宗玺 邵昱昊 刘胜旺 马得莹 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第8期1193-1200,共8页
本试验采用RT-PCR方法,从鹅的骨髓细胞中扩增到禽β-防御素(AvBD)基因。测序结果表明,该基因的cDNA大小为201 bp,编码66个氨基酸。经遗传进化分析发现,该基因推导的氨基酸序列与鸡AvBD5的同源性最高,达84.8%。因此,将其命名为鹅AvBD5。... 本试验采用RT-PCR方法,从鹅的骨髓细胞中扩增到禽β-防御素(AvBD)基因。测序结果表明,该基因的cDNA大小为201 bp,编码66个氨基酸。经遗传进化分析发现,该基因推导的氨基酸序列与鸡AvBD5的同源性最高,达84.8%。因此,将其命名为鹅AvBD5。进一步将该基因定向插入到pGEX-6p-1的EcoRⅠ和SalⅠ双酶切位点上,构建pGEX-AvBD 5重组表达质粒。将重组质粒转化大肠杆菌BL 21,于37℃不同时间进行诱导表达,SDS-PAGE检测外源基因的表达情况。结果表明,重组鹅AvBD 5融合蛋白的分子量约为32 ku,重组蛋白以包涵体形式存在。采用菌落计数法进行抗菌活性测定,结果表明,重组鹅AvBD 5有广谱的抗菌活性,对11种革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌均具有较强抗菌作用。此外,该蛋白对温度和pH有较高的稳定性。 展开更多
关键词 鹅β-防御素5 重组蛋白 抗菌活性
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传染性支气管炎病毒我国地方分离株病原性和基因分型的比较研究 被引量:7
20
作者 步志高 江国托 +5 位作者 刘思国 王秀荣 康丽娟 祁贤 陈万芳 卢景良 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第1期50-56,共7页
对来自国内部分地区的6个分离株及3个参考株,以蛋白酶K-SDS法提取其基因组RNA,经反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增了预期的1.7kb纤突糖蛋白S1基因cDNA。用HaeⅢ裂解S1基因cDNA,限制性酶切... 对来自国内部分地区的6个分离株及3个参考株,以蛋白酶K-SDS法提取其基因组RNA,经反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增了预期的1.7kb纤突糖蛋白S1基因cDNA。用HaeⅢ裂解S1基因cDNA,限制性酶切片段长度多态性(RFLP)表现为3种不同的带型。以部分毒株分别感染SPF鸡,于感染后第5,9,13,16和20d观察气管和肾脏病理学变化,显示在病原性和组织嗜性上存在两大倾向。一类可导致严重的、持续时间较长的呼吸道损伤,伴有相对较轻的肾脏损伤;另一类以肾脏损伤较严重且持续时间较长而呼吸道损伤相对较温和为特征。结果表明我国部分地区同时存在着Mas基因型的所谓“呼吸型”和T基因型或可能的变异株“肾病型”IBV的流行,且后二者是引起“肾病型”IB广泛流行的主要病原。 展开更多
关键词 传染性支气管炎 病毒 基因型 病原性
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