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题名猪圆环病毒2型衣壳蛋白单克隆抗体的制备及鉴定
被引量：3
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作者
姚永红
崔然
赵钦
王刚
肖一红
周恩民
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机构
山东农业大学动物医学院
西北农林科技大学兽医免疫学研究所/西北农林科技大学动物医学院
中国农业科学院哈尔滨兽医研究所/兽医生物技术国家重点实验室/动物疫病诊断中心
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出处
《山东农业科学》
2012年第9期9-12,21,共5页
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基金
国家公益性行业科技计划项目"动物卫生风险分析关键技术与应用研究"(200903055)
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文摘
为获得猪圆环病毒2型(PCV2)衣壳蛋白单克隆抗体,将516 bp的ORF2基因片段克隆入pET-28a(+),转化入大肠杆菌,在IPTG的诱导下表达,用SDS-PAGE和Western blot对表达产物进行鉴定。将纯化的重组蛋白免疫小鼠,制备单克隆抗体,叠加ELISA方法检测两株单克隆抗体识别的抗原表位关系。SDS-PAGE和Western blot结果表明重组蛋白ORF2得到高效表达;筛选获得两株稳定分泌抗ORF2单克隆抗体的杂交瘤细胞系3H3和3F2,其分泌的单体均为IgG1亚型;且均具有较高的特异性和敏感性;叠加ELISA显示,两株单克隆抗体识别不同的抗原表位。本研究制备的单抗有较好的生物学特性,为PCV2的研究及快速准确诊断方法的建立提供了平台。
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关键词
猪圆环病毒2型
ORF2蛋白
单克隆抗体
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Keywords
Porcine circovirus type2
ORF2 protein
Monoclonal antibodies
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分类号
Q785
[生物学—分子生物学]
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