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3个地方品种猪血液生化指标分析 被引量:19
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作者 赵拴平 王睿琪 +2 位作者 唐中林 昝林森 李奎 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2012年第2期96-100,共5页
为了解中国地方猪种的血液生化指标,试验用Monarch660全自动生化分析仪检测了通城猪、陆川猪和宁乡猪3个地方猪种24项血液生化指标,统计结果表明,3个品种间有6项指标差异极显著(P<0.01),通城猪和宁乡猪间有4项指标差异不显著(P>0.... 为了解中国地方猪种的血液生化指标,试验用Monarch660全自动生化分析仪检测了通城猪、陆川猪和宁乡猪3个地方猪种24项血液生化指标,统计结果表明,3个品种间有6项指标差异极显著(P<0.01),通城猪和宁乡猪间有4项指标差异不显著(P>0.05),陆川猪和宁乡猪间有3项指标差异不显著(P>0.05)。通过3个地方猪品种间同一指标的比较,以及与人参考值、中国小型猪品种、其他地方猪品种和国外引进猪品种比较,为中国地方猪品种资源的合理保护和利用提供科学依据。 展开更多
关键词 通城猪 陆川猪 宁乡猪 生化指标
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牛GDF5基因启动子的克隆与序列分析 被引量:7
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作者 刘永峰 昝林森 +7 位作者 赵栓平 亐开兴 李林强 张莺莺 唐中林 杨述林 牟玉莲 崔文涛 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期392-397,共6页
旨在了解生长分化因子5(GDF5)可能的调控序列。本研究通过基因组比对,扩增了牛GDF5基因5′侧翼区,并通过产物纯化、连接、转化及测序比对,确定了2043bp的启动子序列。同时综合考虑已经证实的人GDF5基因启动子结构及应用启动子在线分析软... 旨在了解生长分化因子5(GDF5)可能的调控序列。本研究通过基因组比对,扩增了牛GDF5基因5′侧翼区,并通过产物纯化、连接、转化及测序比对,确定了2043bp的启动子序列。同时综合考虑已经证实的人GDF5基因启动子结构及应用启动子在线分析软件,对该序列进行分析。结果发现,牛GDF5基因5′侧翼区没有CpG岛,序列比对发现,牛和人GDF5基因启动子区域同源性为78%;牛GDF5基因启动子没有TATAbox或CAATbox结构,其转录起始位点位于翻译起始密码子ATG上游-359bp位置,其潜在的转录因子有AML-la,Ap-1,AmL-la,CdxA,SRY,CdxA,TATA,AmL-la,GTATA-1,MZF1,CdxA,Nkx-2,CdxA,S8和SRY,其中Ap-1,AmL-la,SRY,Nkx-2,S8和SRY高度保守,与人的序列完全一致;推测发现牛GDF5基因启动子-457至-423bp序列中的GT重复序列可以增强启动子的活性,且最小增强子处于-458和-377bp之间。研究结果推测判定了牛GDF5基因启动子的转录起始位置、转录结合位点、活性序列及最小增强子序列,为以后深入研究GDF5基因在牛软骨细胞中的表达机制提供了理论基础。 展开更多
关键词 GDF5基因 启动子 克隆 转录因子
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小鼠TLE4基因启动子克隆及分析 被引量:4
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作者 赵黎黎 牟玉莲 +6 位作者 崔文涛 杨述林 唐中林 李勇 赵为民 刘娣 李奎 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期274-278,共5页
本研究旨在初步对小鼠TLE4基因的转录调控机制进行探讨。利用PCR方法扩增TLE4基因5′上游启动区2 849 bp(-2 521 bp^+327 bp)的片段,然后通过步移缺失获得了7段长度不等的启动子片段并分别克隆到荧光素酶(LUC)报告基因表达质粒中。通过... 本研究旨在初步对小鼠TLE4基因的转录调控机制进行探讨。利用PCR方法扩增TLE4基因5′上游启动区2 849 bp(-2 521 bp^+327 bp)的片段,然后通过步移缺失获得了7段长度不等的启动子片段并分别克隆到荧光素酶(LUC)报告基因表达质粒中。通过双荧光素酶报告活性分析检测TLE4基因启动子区不同长度片段在小鼠畸胎瘤细胞(F9)及小鼠胚胎干细胞(ES)中瞬时转染后的活性。2种细胞的检测结果显示,在TLE4基因启动子区(-2 521 bp^-2 137 bp)存在负性调控元件,而在启动区(-2 137 bp^-1 794 bp)活性最强。对TLE4基因启动区(-2 137 bp^-1 794 bp)进一步缺失分析发现在该基因启动区(-2 027 bp^-1 927 bp)活性较强,分析预测该序列含有一个功能性的(HSF)的结合位点。结果推测HSF对TLE4基因的表达调控及功能行使具有重要作用。 展开更多
关键词 TLE4基因 启动子 HSF 调控序列
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小鼠四倍体早期胚胎基因组甲基化模式
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作者 员新旭 冯书堂 +3 位作者 潘登科 窦红伟 牟玉莲 李奎 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期387-392,共6页
利用小鼠抗5-甲基胞嘧啶(5MeC)单克隆抗体检测了体外培养小鼠四倍体早期胚胎的基因组甲基化模式。结果表明:利用电融合方法制备的小鼠四倍体胚胎在体外培养体系中经历细胞质融合、细胞核融合及细胞继续分裂发育直到囊胚期的过程,在细胞... 利用小鼠抗5-甲基胞嘧啶(5MeC)单克隆抗体检测了体外培养小鼠四倍体早期胚胎的基因组甲基化模式。结果表明:利用电融合方法制备的小鼠四倍体胚胎在体外培养体系中经历细胞质融合、细胞核融合及细胞继续分裂发育直到囊胚期的过程,在细胞质融合的时候胚胎卵裂球同体内体外培养二倍体胚胎一样,呈现高度甲基化状态;在细胞核开始融合的时候,甲基化水平急速下降,在细胞核完全融合的时候甲基化水平达到最低点;随着胚胎继续分裂,胚胎甲基化水平逐渐增加,在桑葚胚期甲基化水平最高;但是囊胚期四倍体胚胎内细胞团同滋养层细胞甲基化荧光信号没有差别,这与体内体外培养二倍体囊胚内细胞团细胞甲基化荧光强度高于滋养层细胞甲基化荧光强度不同。因此,小鼠体外培养四倍体胚胎的甲基化模式是不正常的,这可能是四倍体小鼠难以发育到妊娠足月的原因之一。这是对小鼠四倍体早期胚胎基因组甲基化模式的首次报道。 展开更多
关键词 小鼠 四倍体胚胎 甲基化 抗5-甲基胞嘧啶抗体
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猪MSTN前肽定点诱变载体在C2C12细胞中的表达 被引量:1
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作者 张晓玮 崔文涛 +4 位作者 伍晓雄 杨述林 牟玉莲 唐中林 李奎 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第11期1588-1593,共6页
本研究旨在克隆通城猪含有第1个内含子的MSTN前肽基因,构建真核定点诱变载体,并通过转染C2C12细胞验证载体表达的有效性。以通城猪血液样品中提取的DNA作为模板,PCR扩增得到含第1个内含子的MSTN前肽基因,扩增产物进行克隆、测序。再将... 本研究旨在克隆通城猪含有第1个内含子的MSTN前肽基因,构建真核定点诱变载体,并通过转染C2C12细胞验证载体表达的有效性。以通城猪血液样品中提取的DNA作为模板,PCR扩增得到含第1个内含子的MSTN前肽基因,扩增产物进行克隆、测序。再将目的片段定向克隆到去除了EGFP基因的pEGFP-N1表达载体上。通过定点诱变方法将前肽编码序列第76位天冬氨酸突变为丙氨酸,获得定点诱变载体pEGFP(-)-N1-ProMstnD76A,并瞬时转染C2C12细胞。转染48 h后,通过RT-PCR和Real-time PCR方法检测目的基因的表达情况。结果表明:本研究成功克隆了通城猪含第1个内含子的MSTN前肽基因,并对该基因进行定点诱变修饰,构建了真核表达载体,转染后其前体mRNA能在C2C12细胞中进行正确剪接,目的基因mRNA表达水平较高。这为猪MSTN前肽基因在体内表达的研究奠定基础,并为制备转基因猪提供有用的分子材料。 展开更多
关键词 MSTN前肽基因 定点诱变 真核表达
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