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体细胞核移植生产转ω-3脂肪酸去饱和酶基因(sFat-1)的猪胚胎
被引量：
5
1
作者
冯冲
周艳荣
+4 位作者
龙川
刘晓
陈红星
潘登科
杨博辉
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第5期633-638,共6页
本研究通过脂质体介导的方法将来源于线虫C.Briggsae的ω-3脂肪酸去饱和酶基因(sFat-1)转染至大白猪胎儿成纤维细胞。采用600μg.mL-1G418药物浓度,经连续10 d筛选及PCR、RT-PCR鉴定,获得11个转基因阳性细胞克隆。以体外成熟42 h的猪卵...
本研究通过脂质体介导的方法将来源于线虫C.Briggsae的ω-3脂肪酸去饱和酶基因(sFat-1)转染至大白猪胎儿成纤维细胞。采用600μg.mL-1G418药物浓度,经连续10 d筛选及PCR、RT-PCR鉴定,获得11个转基因阳性细胞克隆。以体外成熟42 h的猪卵母细胞与转基因细胞构建重构胚。经体外培养后观察,转基因克隆胚胎与非转基因胚胎的卵裂率(76.6%±4.1%vs.81.6%±3.1%)和囊胚率(10%±1.97%vs.9.7%±1.4%)均无显著差异(P>0.05)。采用放线菌酮进行化学二次激活时,胚胎的囊胚率显著高于采用电二次激活胚胎(20.6%±0.89%vs.10%±1.97%,P<0.05),但二者的卵裂率并无显著差异(72.4%±4.96%vs.76.6%±4.1%,P>0.05)。研究表明,通过脂质体介导的方法,可以获得转sFat-1基因大白猪胎儿成纤维细胞系;以该细胞系为核供体构建的转基因克隆胚胎与非转基因克隆胚胎的发育能力无显著差异;二次激活采用放线菌酮进行化学激活能够显著提高胚胎的囊胚发育率。
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关键词
猪
sFat-1基因
胎儿成纤维细胞
体细胞核移植
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职称材料
发育潜能不同的猪孤雌胚胎差异表达基因的筛选
被引量：
1
2
作者
陆芳
罗学明
+2 位作者
龙川
王希彪
潘登科
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2010年第10期130-134,共5页
本试验以猪孤雌胚胎为材料,根据初次卵裂时间的早晚划分出发育能力不同的2组胚胎,比较其母源mRNAs丰度。利用mRNA差异显示技术（mRNAdifferential display reverse transcription PCR,DDRT-PCR）筛选出2组胚胎中表达丰度不同的母源mRNAs...
本试验以猪孤雌胚胎为材料,根据初次卵裂时间的早晚划分出发育能力不同的2组胚胎,比较其母源mRNAs丰度。利用mRNA差异显示技术（mRNAdifferential display reverse transcription PCR,DDRT-PCR）筛选出2组胚胎中表达丰度不同的母源mRNAs,并经反Northern blotting验证,结果发现,有8条差异表达的阳性cDNA片段（E1-E4;L1-L4）,克隆、测序后与GenBank数据库进行同源性比对分析,其中6条（E1、E2、E4、L1、L2、L4）与已知ESTs有较高的同源性,E3与人CPEB2的同源性为97%,L3与人hnRNPA1的同源性为89%。因此,CPEB2和hnRNPA1是影响胚胎发育能力的重要候选基因。
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关键词
猪
孤雌胚胎
初次卵裂时间
母源mRNA
胚胎质量
DDTR-PCR
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职称材料
题名
体细胞核移植生产转ω-3脂肪酸去饱和酶基因(sFat-1)的猪胚胎
被引量：
5
1
作者
冯冲
周艳荣
龙川
刘晓
陈红星
潘登科
杨博辉
机构
甘肃
农业
大学动物
科学
技术
学院
中国农业科学院北京畜牧兽医研究所农业部畜禽遗传资源与利用重点实验室
军事医学
科学院
生物工程
研究所
中国农业科学院
兰州
畜牧
与兽药
研究所
出处
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第5期633-638,共6页
基金
国家"863"项目(2006AA02Z113)
中国农业科学院院长基金资助
文摘
本研究通过脂质体介导的方法将来源于线虫C.Briggsae的ω-3脂肪酸去饱和酶基因(sFat-1)转染至大白猪胎儿成纤维细胞。采用600μg.mL-1G418药物浓度,经连续10 d筛选及PCR、RT-PCR鉴定,获得11个转基因阳性细胞克隆。以体外成熟42 h的猪卵母细胞与转基因细胞构建重构胚。经体外培养后观察,转基因克隆胚胎与非转基因胚胎的卵裂率(76.6%±4.1%vs.81.6%±3.1%)和囊胚率(10%±1.97%vs.9.7%±1.4%)均无显著差异(P>0.05)。采用放线菌酮进行化学二次激活时,胚胎的囊胚率显著高于采用电二次激活胚胎(20.6%±0.89%vs.10%±1.97%,P<0.05),但二者的卵裂率并无显著差异(72.4%±4.96%vs.76.6%±4.1%,P>0.05)。研究表明,通过脂质体介导的方法,可以获得转sFat-1基因大白猪胎儿成纤维细胞系;以该细胞系为核供体构建的转基因克隆胚胎与非转基因克隆胚胎的发育能力无显著差异;二次激活采用放线菌酮进行化学激活能够显著提高胚胎的囊胚发育率。
关键词
猪
sFat-1基因
胎儿成纤维细胞
体细胞核移植
Keywords
porcine
sFat-1 gene
fetal fibroblast
somatic cell nuclear transfer
分类号
S828.3 [农业科学—畜牧学]
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职称材料
题名
发育潜能不同的猪孤雌胚胎差异表达基因的筛选
被引量：
1
2
作者
陆芳
罗学明
龙川
王希彪
潘登科
机构
东北
农业
大学动物科技
学院
中国农业科学院
北京
畜牧
兽医
研究所
出处
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2010年第10期130-134,共5页
基金
国家“863”项目(2008AA101003)
文摘
本试验以猪孤雌胚胎为材料,根据初次卵裂时间的早晚划分出发育能力不同的2组胚胎,比较其母源mRNAs丰度。利用mRNA差异显示技术（mRNAdifferential display reverse transcription PCR,DDRT-PCR）筛选出2组胚胎中表达丰度不同的母源mRNAs,并经反Northern blotting验证,结果发现,有8条差异表达的阳性cDNA片段（E1-E4;L1-L4）,克隆、测序后与GenBank数据库进行同源性比对分析,其中6条（E1、E2、E4、L1、L2、L4）与已知ESTs有较高的同源性,E3与人CPEB2的同源性为97%,L3与人hnRNPA1的同源性为89%。因此,CPEB2和hnRNPA1是影响胚胎发育能力的重要候选基因。
关键词
猪
孤雌胚胎
初次卵裂时间
母源mRNA
胚胎质量
DDTR-PCR
Keywords
pig
parthenogenetic embryo
first cleavage time
maternal mRNA
embryo quality
DDRT-PCR
分类号
S828 [农业科学—畜牧学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
体细胞核移植生产转ω-3脂肪酸去饱和酶基因(sFat-1)的猪胚胎
冯冲
周艳荣
龙川
刘晓
陈红星
潘登科
杨博辉
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009
5
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
发育潜能不同的猪孤雌胚胎差异表达基因的筛选
陆芳
罗学明
龙川
王希彪
潘登科
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2010
1
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