山羊繁殖季节性相关基因KiSS-1与RFRP的表达研究 被引量：12

1

作者 黄冬维 储明星 +5 位作者 狄冉 刘秋月 胡文萍 王翔宇 潘章源 郭晓飞 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期924-931,共8页

本研究为初步阐明KiSS-1和RFRP基因对山羊繁殖季节性的作用,选择常年发情济宁青山羊和季节性发情辽宁绒山羊为对比品种,应用RT-PCR和qRT-PCR技术分别研究KiSS-1和RFRP基因组织表达谱以及在下丘脑-垂体-卵巢(子宫)繁殖轴表达差异。结果发... 本研究为初步阐明KiSS-1和RFRP基因对山羊繁殖季节性的作用,选择常年发情济宁青山羊和季节性发情辽宁绒山羊为对比品种,应用RT-PCR和qRT-PCR技术分别研究KiSS-1和RFRP基因组织表达谱以及在下丘脑-垂体-卵巢(子宫)繁殖轴表达差异。结果发现:(1)KiSS-1基因主要表达于山羊下丘脑、垂体、松果体、肾、卵巢、脂肪和甲状腺等组织,RFRP基因主要表达于山羊下丘脑、大脑皮层、小脑、卵巢和垂体等组织,两基因组织表达谱均存在一定的品种特异性;(2)KiSS-1基因在济宁青山羊下丘脑表达量显著高于辽宁绒山羊(P<0.05),而在垂体和卵巢中的表达量两品种间差异不明显(P>0.05);(3)济宁青山羊下丘脑RFRP基因表达显著高于辽宁绒山羊(P<0.05),而济宁青山羊卵巢和垂体中RFRP基因表达明显低于辽宁绒山羊(P<0.05)。研究结果提示,KiSS-1基因可能参与调控山羊季节性繁殖,而RFRP基因是否调控季节性繁殖或以何种方式作用还需要进一步研究。本研究可为山羊KiSS-1和RFRP基因功能研究打下基础,并为揭示山羊繁殖季节性的遗传基础提供参考。 展开更多

关键词 山羊 繁殖季节性 KISS-1 RFRP 表达

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动物繁殖相关lncRNA的研究新进展 被引量：9

2

作者 贺小云 狄冉 +3 位作者 胡文萍 王翔宇 刘秋月 储明星 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第9期1749-1756,共8页

长链非编码RNA(Long noncoding RNA,lncRNA)是一类长度大于200nt,且不具有蛋白编码潜能的RNAs,在真核生物基因表达调控中发挥着重要作用。不同物种性染色体和部分印记基因的转录能力受到lncRNA的顺式调控作用。寻找与繁殖相关的lncRNA分... 长链非编码RNA(Long noncoding RNA,lncRNA)是一类长度大于200nt,且不具有蛋白编码潜能的RNAs,在真核生物基因表达调控中发挥着重要作用。不同物种性染色体和部分印记基因的转录能力受到lncRNA的顺式调控作用。寻找与繁殖相关的lncRNA分子,研究这些lncRNA分子及其靶基因的生物学功能,阐明lncRNA在动物繁殖中的调控机制,是动物繁殖研究的一个热点。本文主要对繁殖过程中配子发生、胎盘形成和妊娠建立、激素调节、早期胚胎发育以及性别决定和性腺发育等重要阶段lncRNA的研究进行综述,为深入探究动物繁殖调控机制提供参考。 展开更多

关键词 lncRNA 繁殖 配子发生 激素调节 妊娠

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绵羊多羔主效基因BMPR1B的研究进展 被引量：28

3

作者 潘章源 狄冉 +1 位作者 刘秋月 储明星 《家畜生态学报》 北大核心 2015年第5期1-6,共6页

骨形态发生蛋白受体1B(Bone morphogenetic protein receptor 1B,BMPR1B)是一种重要的跨膜受体蛋白,主要参与转化生长因子β(TGF-β)通路,其在调控成骨分化、细胞扩散以及卵巢卵泡发育等过程中起重要作用,并直接影响如绵羊等动物的繁殖... 骨形态发生蛋白受体1B(Bone morphogenetic protein receptor 1B,BMPR1B)是一种重要的跨膜受体蛋白,主要参与转化生长因子β(TGF-β)通路,其在调控成骨分化、细胞扩散以及卵巢卵泡发育等过程中起重要作用,并直接影响如绵羊等动物的繁殖性状。绵羊BMPR1B基因发生A746G突变(命名为FecB突变),导致第249位氨基酸由谷氨酰胺(Q)转变为精氨酸(R),进而使得绵羊排卵数和产羔数显著增加,因此BMPR1B成为目前最受关注的绵羊多羔主效基因。论文就绵羊BMPR1B基因定位、功能机制研究进展及其对高繁殖力绵羊的影响进行了综述,同时也对BMPR1B功能研究中一些亟待解决的问题展开了讨论。 展开更多

关键词 BMPR1B基因 FECB 绵羊 多羔

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生殖激素对绵羊繁殖性能影响的研究进展 被引量：17

4

作者 狄冉 郭晓飞 +4 位作者 刘秋月 胡文萍 王翔宇 潘章源 储明星 《家畜生态学报》 北大核心 2015年第9期1-6,共6页

影响绵羊产业效益的因素中,繁殖性能最为重要。研究发现多种生殖激素可以调控绵羊的繁殖性能。论文综述了促性腺激素释放激素、促卵泡素、促黄体素、孕酮、雌二醇、褪黑激素、促甲状腺素、甲状腺激素这8种激素对绵羊繁殖性能影响的新进... 影响绵羊产业效益的因素中,繁殖性能最为重要。研究发现多种生殖激素可以调控绵羊的繁殖性能。论文综述了促性腺激素释放激素、促卵泡素、促黄体素、孕酮、雌二醇、褪黑激素、促甲状腺素、甲状腺激素这8种激素对绵羊繁殖性能影响的新进展,为生产实践中绵羊繁殖性能的提高提供科学依据和新思路。 展开更多

关键词 绵羊 繁殖力 发情 生殖激素

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Kiss1基因调控哺乳动物繁殖性能的研究进展 被引量：8

5

作者 金慧慧 刘秋月 +3 位作者 狄冉 胡文萍 王翔宇 储明星 《家畜生态学报》 北大核心 2015年第8期1-6,共6页

Kiss1基因是近年来繁殖生理学领域的研究热点。Kiss1基因编码的多肽类激素叫Kisspeptin。Kiss1基因主要表达于下丘脑弓状核和下丘脑前腹部室旁核区域。Kisspeptin可通过其受体GPR54的介导来发挥作用。Kiss1基因是促性腺激素释放激素的... Kiss1基因是近年来繁殖生理学领域的研究热点。Kiss1基因编码的多肽类激素叫Kisspeptin。Kiss1基因主要表达于下丘脑弓状核和下丘脑前腹部室旁核区域。Kisspeptin可通过其受体GPR54的介导来发挥作用。Kiss1基因是促性腺激素释放激素的关键上游调节子,在性腺轴系统中起到中枢节点作用。Kiss1在动物初情期启动、季节性发情、生殖调控中起着关键作用。论文就Kiss1基因在哺乳动物繁殖方面的研究进展进行简单综述。 展开更多

关键词 Kiss1基因 GPR54 弓状核 初情期 季节性发情

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GnRH主动免疫雌性大鼠调控机制研究 被引量：2

6

作者 曹晓涵 韩兴发 +4 位作者 杜小刚 陈志渝 孟风艳 储明星 曾宪垠 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期502-508,共7页

旨在探讨GnRH主动免疫雌性SD大鼠的调控机制。24只雌性SD大鼠随机分为免疫组、卵巢切除组和空白对照组(n=8),免疫组于12周龄注射疫苗,4周后加免;卵巢切除组11周龄外科手术摘除卵巢;空白对照组不作任何处理。使用放射免疫分析法测定血清... 旨在探讨GnRH主动免疫雌性SD大鼠的调控机制。24只雌性SD大鼠随机分为免疫组、卵巢切除组和空白对照组(n=8),免疫组于12周龄注射疫苗,4周后加免;卵巢切除组11周龄外科手术摘除卵巢;空白对照组不作任何处理。使用放射免疫分析法测定血清激素E2、P4、FSH和LH含量,荧光定量PCR分析各基因mRNA表达情况。结果显示,主动免疫显著降低血清E2、P4、FSH和LH含量,至56周处死时,E2和LH含量有微弱上升,但4种激素含量均显著低于空白对照组(P<0.05)。与空白对照组相比,主动免疫显著下调下丘脑GPR54、KiSS-1、GnRH和ER-αmRNA,垂体GnRH-R、FSH-β和LH-βmRNA以及卵巢FSHR、LHR和ER-αmRNA的表达水平(P<0.05)。结果表明,GnRH主动免疫能显著抑制雌性SD大鼠性腺发育,降低血清性激素含量,通过下丘脑ER-αmRNA-GPR54/KiSS-1通路保持动物较长时间去势;但GnRH主动免疫造成的动物去势存在恢复的可能。 展开更多

关键词 GNRH 主动免疫 调控 机制 雌性大鼠

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绵羊AA-NAT基因mRNA表达与常年发情相关性研究 被引量：5

7

作者 卢璐璐 孙晓笛 +6 位作者 储明星 王永娟 黄冬维 王金玉 狄冉 潘章源 刘秋月 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期542-548,共7页

为了探讨AA-NAT基因表达与绵羊常年发情之间的关联性,本研究以常年发情小尾寒羊和季节性发情滩羊各9只为研究对象,利用real-time PCR技术检测AA-NAT基因在这2种绵羊不同发情阶段下丘脑、垂体、松果体、卵巢、子宫体和肾上腺6种组织中的m... 为了探讨AA-NAT基因表达与绵羊常年发情之间的关联性,本研究以常年发情小尾寒羊和季节性发情滩羊各9只为研究对象,利用real-time PCR技术检测AA-NAT基因在这2种绵羊不同发情阶段下丘脑、垂体、松果体、卵巢、子宫体和肾上腺6种组织中的mRNA表达情况。结果显示,AA-NAT基因在不同情期的两个绵羊品种的6个组织中表达有明显差异,在发情期绵羊的卵巢、子宫体、松果体中高水平表达。春秋季发情期小尾寒羊与秋季发情期滩羊相比,其卵巢和子宫体中AA-NAT基因表达量极显著偏低(P<0.01),而松果体中表达量极显著偏高(P<0.01)。本研究结果初步表明,卵巢、子宫体和松果体中AA-NAT基因表达上调可能与小尾寒羊常年发情相关。 展开更多

关键词 绵羊 常年发情 AA-NAT基因 REAL-TIME PCR 基因表达

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表观遗传标记在猪分子育种中的研究与应用前景 被引量：3

8

作者 张轲 冯光德 +5 位作者 张宝云 向伟 陈龙 杨芳 储明星 王凭青 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2016年第7期634-643,共10页

家畜动物的表型是由基因组、表观基因组和环境等多种因素相互影响共同作用决定的。近年来,随着遗传育种领域的迅速发展,表观遗传标记在猪分子育种中的研究受到越来越多科研人员的关注。表观遗传学是研究基因表达发生可遗传的改变而DNA... 家畜动物的表型是由基因组、表观基因组和环境等多种因素相互影响共同作用决定的。近年来,随着遗传育种领域的迅速发展,表观遗传标记在猪分子育种中的研究受到越来越多科研人员的关注。表观遗传学是研究基因表达发生可遗传的改变而DNA序列不发生改变的一门生物学分支学科,其遗传标记主要包括DNA甲基化、组蛋白修饰、非编码RNA、印记基因等。越来越多的研究表明,表观遗传标记在猪的遗传性状中发挥着重要作用,主要通过调控与性状相关基因的表达进而达到改变生物表型的目的。然而,在当前猪分子育种领域,表观遗传标记的作用还没有得到足够的重视,影响猪重要性状的机制还没有得到深度解析,因此在实际应用中还缺乏足够的科学依据和可操作性。本文从营养、疾病、重要经济性状以及隔代遗传几个方面综述了表观遗传标记在猪分子育种中的研究现状、应用前景以及遇到的挑战,以期为表观遗传标记在猪分子育种中的应用提供较全面的理论依据。 展开更多

关键词 猪分子育种 表观遗传标记 DNA甲基化 组蛋白修饰 MIRNA

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动物昼夜节律相关miRNAs研究进展 被引量：2

9

作者 葛莹 狄冉 +3 位作者 储明星 刘秋月 胡文萍 王翔宇 《家畜生态学报》 北大核心 2014年第12期1-5,10,共6页

microRNAs（miRNAs）是一类长度为21-24nt的非编码小RNA,通过与靶mRNAs的3′UTR结合在转录后水平上沉默基因表达,参与多种生理、生化、病理过程。目前有许多研究表明miRNAs影响动物的昼夜节律。论文就miRNAs在昼夜节律中的调控机制进行... microRNAs（miRNAs）是一类长度为21-24nt的非编码小RNA,通过与靶mRNAs的3′UTR结合在转录后水平上沉默基因表达,参与多种生理、生化、病理过程。目前有许多研究表明miRNAs影响动物的昼夜节律。论文就miRNAs在昼夜节律中的调控机制进行综述,揭示其在昼夜节律系统中的重要作用,为更深入理解动物昼夜节律系统提供理论参考和研究思路。 展开更多

关键词 MIRNAS 昼夜节律 钟控基因

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SD雄鼠3种不同新蛋白构型GnRH去势抗原免疫学及生物学效果对比研究 被引量：3

10

作者 韩兴发 李俊丽 +2 位作者 曹晓涵 储明星 曾宪垠 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期738-749,共12页

旨在对比研究SD雄鼠3种不同新蛋白构型GnRH抗原的免疫学及生物学效果。本研究新蛋白构型GnRH抗原设计采用增加GnRH拷贝数和增大抗原分子量方法。以化学合成法合成G6K-GnRH并列体(G6K-GnRH-tandem,G6KT)作为新蛋白GnRH抗原制备的基本单... 旨在对比研究SD雄鼠3种不同新蛋白构型GnRH抗原的免疫学及生物学效果。本研究新蛋白构型GnRH抗原设计采用增加GnRH拷贝数和增大抗原分子量方法。以化学合成法合成G6K-GnRH并列体(G6K-GnRH-tandem,G6KT)作为新蛋白GnRH抗原制备的基本单元。将G6KT二聚化,形成抗原Ⅰ(G6KTD),将G6KT和G6KTD分别与卵清蛋白(OVA)偶联,分别形成抗原П(G6KT-OVA)及抗原Ⅲ(G6KTD-OVA)。试验分5组:完整对照组(不做任何处理,intact control)、外科阉割去势组(surgical castrates)及3种新蛋白构型GnRH免疫组(G6KTD、G6KT-OVA及G6KTD-OVA免疫组)。将(G6KTD、G6KT-OVA、G6KTD-OVA)3种不同新蛋白构型GnRH抗原配于Specol佐剂,分别免疫SD雄鼠,6周龄时初免,腿部肌肉注射1 mL乳化抗原(含相应新构型GnRH蛋白100μg),8周后加免,注射剂量与方法同初次免疫,每试验组12只雄鼠。放免法及酶联免疫法测定血清抗体及生殖激素浓度变化,qPCR检测垂体-睾丸生殖相关基因mRNA表达变化。结果显示:1)SD雄鼠主动免疫3种不同新蛋白构型GnRH抗原后均能产生良好的抗体反应。2)G6KT-OVA及G6KTD-OVA免疫组仅初免就能诱发较高水平的抗体产生,并显著降低雄鼠血清LH、FSH、睾酮(T)及抑制素B (INHB)浓度(P<0.05);试验结束时,该两种抗原免疫组雄鼠睾丸重量及体积均降低,精子发生完全被终止,垂体GnRHR、LHβ、FSHβ及睾丸LHR、FSHR、INHα、INβA及INHβB mRNA表达显著下调(P<0.05)。3)G6KTD免疫组12只雄鼠中,9只(75%)在加免后血清LH、FSH、T及INHB浓度显著降低(P<0.05),试验结束时睾丸重量及体积均显著降低(P<0.05),精子发生受到明显抑制(P<0.05)。综上表明:新蛋白构型G6KT-OVA和G6KTD-OVA具有极强的免疫原性,初次免疫就能达到抑制生殖激素分泌的目的,在作为单剂量GnRH疫苗方面具良好的开发前景;同时G6KTD也具有较强的免疫原性,可不与载体蛋白偶联单独作为GnRH去势抗原,继而避开GnRH分子与载体蛋白偶联所面临的GnRH抗原损失严重及与载体蛋白偶联的后续纯化等问题。本研究结果为研发高效GnRH去势疫苗及其大规模应用提供了理论参考。 展开更多

关键词 GNRH 新蛋白构型 免疫去势 大鼠

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山羊生长分化因子9基因FecTT突变检测 被引量：7

11

作者 王金鑫 冯涛 +5 位作者 储明星 狄冉 曹贵玲 黄冬维 唐倩倩 方丽 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2013年第3期123-126,共4页

本研究采用PCR-RFLP方法检测生长分化因子9(growth differentiation factor 9,GDF9)基因FecTT突变在济宁青山羊、贵州白山羊、大足黑山羊、陕南白山羊、古蔺马羊、马头山羊、波尔山羊、成都麻羊、萨能奶山羊、文登奶山羊、板角山羊、金... 本研究采用PCR-RFLP方法检测生长分化因子9(growth differentiation factor 9,GDF9)基因FecTT突变在济宁青山羊、贵州白山羊、大足黑山羊、陕南白山羊、古蔺马羊、马头山羊、波尔山羊、成都麻羊、萨能奶山羊、文登奶山羊、板角山羊、金堂黑山羊、关中奶山羊、川东白山羊、安哥拉山羊、辽宁绒山羊、内蒙古绒山羊等17个山羊品种中的分布。结果表明,在17个山羊品种中都未检测到FecTT突变,提示,GDF9基因影响Thoka绵羊高繁殖力的FecTT突变对以上17个山羊品种的繁殖力均没有显著影响。 展开更多

关键词 山羊 GDF9基因 FecTT突变 PCR-RFLP

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绵羊BMPR1B基因生物信息学分析 被引量：7

12

作者 潘章源 狄冉 +4 位作者 刘秋月 胡文萍 王翔宇 郭晓飞 储明星 《中国草食动物科学》 CAS 2015年第6期1-5,共5页

该研究从生物信息学角度分析BMPR1B基因结构、蛋白结构、理化性质、同源进化和信号通路。结果显示:绵羊BMPR1B DNA全长20 k,包含12个外显子,其中Fec B突变位于第8外显子;BMPR1B具有3个保守motif和3个功能结构域,FecB突变位于蛋白激酶功... 该研究从生物信息学角度分析BMPR1B基因结构、蛋白结构、理化性质、同源进化和信号通路。结果显示:绵羊BMPR1B DNA全长20 k,包含12个外显子,其中Fec B突变位于第8外显子;BMPR1B具有3个保守motif和3个功能结构域,FecB突变位于蛋白激酶功能结构域,该突变改变了蛋白空间结构;绵羊BMPR1B蛋白与山羊的同源性最高,首先相聚,其次为牛、狼、人、猕猴、小鼠、猪、原鸡、斑马鱼;BMPR1B主要在TGFB通路中起信号转导作用,是一个重要的膜受体。 展开更多

关键词 绵羊 BMPR1B基因 生物信息学 FecB突变 蛋白互作

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7种绵羊和4种山羊GDF9基因G1突变检测 被引量：8

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作者 古丽格娜 艾买提.买买提 +8 位作者 於建国 郝耿 杨会国 储明星 买买提明 郭晓飞 潘章源 狄冉 刘秋月 《中国草食动物科学》 CAS 2015年第4期1-4,共4页

前人研究表明生长分化因子9(GDF9)基因G1突变对部分绵羊品种的繁殖力有显著影响。文章采用PCR-RFLP方法在不同繁殖力的7个绵羊品种(小尾寒羊、湖羊、洼地绵羊、陶赛特羊、特克塞尔羊、杜泊羊、德国肉用美利奴羊)和4个山羊品种(济宁青山... 前人研究表明生长分化因子9(GDF9)基因G1突变对部分绵羊品种的繁殖力有显著影响。文章采用PCR-RFLP方法在不同繁殖力的7个绵羊品种(小尾寒羊、湖羊、洼地绵羊、陶赛特羊、特克塞尔羊、杜泊羊、德国肉用美利奴羊)和4个山羊品种(济宁青山羊、贵州白山羊、辽宁绒山羊、内蒙古绒山羊)中检测GDF9基因G1突变,探究该突变与绵羊和山羊高繁殖力的关联性。结果显示:内蒙古绒山羊没有G1突变,只检测到AA基因型;其余10个绵羊和山羊品种都有G1突变,均检测到AA和AB两种基因型。 展开更多

关键词 绵羊 山羊 繁殖力 GDF9基因 PCR-RFLP

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绵羊FecB基因遗传多样性及其产羔数的关联分析 被引量：24

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作者 李达 孙伟 +10 位作者 倪荣 张向楠 张玉龙 储明星 张有法 沈国忠 陈玲 吴文忠 周洪 韩芳 徐厚生 《畜牧兽医杂志》 2012年第2期1-5,8,共6页

FecB是19世纪80年代在布鲁拉美利奴(Booroola Merino)绵羊中发现的能增加排卵数和产羔数的一个常染色体突变基因,是在绵羊中识别出的第一个高繁殖力主效基因。本研究利用PCR-SSCP以及PCR-RFLP方法对湖羊、小尾寒羊、阿勒泰羊、洼地绵羊... FecB是19世纪80年代在布鲁拉美利奴(Booroola Merino)绵羊中发现的能增加排卵数和产羔数的一个常染色体突变基因,是在绵羊中识别出的第一个高繁殖力主效基因。本研究利用PCR-SSCP以及PCR-RFLP方法对湖羊、小尾寒羊、阿勒泰羊、洼地绵羊共470只的FecB基因进行单核苷酸多态性分析,验证FecB基因为绵羊的高繁殖力的主效基因,并以洼地绵羊为研究对象,检验FecB基因是否为洼地绵羊高繁殖力的主效基因。实验结果表明上述两种方法均能准确判型,稳定可靠性良好,并且判断的结果一致。研究结果显示:上述4个绵羊品种均携带FecB突变,且能证明FecB基因为洼地绵羊高繁殖力的主效基因。 展开更多

关键词 绵羊 繁殖力 突变

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策勒黑羊与吐鲁番黑羊杂交F1代早期生长性能的分析

15

作者 古丽格娜 艾买提.买买提 +5 位作者 於建国 孔艳丽 杨会国 郝耿 穆合塔尔 储明星 《草食家畜》 2018年第5期11-13,共3页

本试验的目的在于通过策勒黑羊与吐鲁番黑羊杂交F1代早期生长性能的分析,掌握策吐杂交一代的生长性能,为新品系(种)的培育提供理论依据。本试验利用生物统计的方法对225只策勒黑羊与吐鲁番黑羊杂交F1代羔羊30 d、60 d、90 d和120 d的体... 本试验的目的在于通过策勒黑羊与吐鲁番黑羊杂交F1代早期生长性能的分析,掌握策吐杂交一代的生长性能,为新品系(种)的培育提供理论依据。本试验利用生物统计的方法对225只策勒黑羊与吐鲁番黑羊杂交F1代羔羊30 d、60 d、90 d和120 d的体重、体高、体长、胸宽、胸深、管围、脂臀长、脂臀宽、脂臀厚等指标测定数据进行分析。结果表明,杂交F1代羔羊120 d的各项指标均显著高于30 d、60 d、90 d (P<0.05),其中,体重、体高、体长、胸宽、胸深、胸围、管围、脂臀宽、脂臀厚极显著高于30 d、60 d、90 d(P<0.01),60 d、90 d的各项指标之间差异不显著(P>0.05)。 展开更多

关键词 吐鲁番黑羊 策勒黑羊 杂交 生长性能

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7个绵羊和7山羊品种DLX3基因3′非编码区803A>G突变的检测

16

作者 古丽格娜 艾买提.买买提 +7 位作者 於建国 杨会国 郝耿 储明星 买买提明 潘章源 狄冉 刘秋月 《草食家畜》 2015年第5期20-24,共5页

DLX3 基因3忆非编码区803A〉G 突变与法国Lacaune 绵羊高繁殖力密切相关座位FecL 高度连锁.本研究采用PCR-SSCP方法在具有不同繁殖力的7个绵羊品种（湖羊、小尾寒羊、洼地绵羊、杜泊、陶赛特、特克塞尔、德国美利奴羊）和7 个山羊品种... DLX3 基因3忆非编码区803A〉G 突变与法国Lacaune 绵羊高繁殖力密切相关座位FecL 高度连锁.本研究采用PCR-SSCP方法在具有不同繁殖力的7个绵羊品种（湖羊、小尾寒羊、洼地绵羊、杜泊、陶赛特、特克塞尔、德国美利奴羊）和7 个山羊品种（济宁青山羊、贵州白山羊、金堂黑山羊、成都麻羊、辽宁绒山羊、波尔山羊、安哥拉山羊）中检测DLX3基因803A〉G 突变,探究该突变与绵羊和山羊高繁殖力的关联性.结果表明这14个绵羊和山羊品种都不存在c.＊803A〉G突变,提示DLX3基因的c.＊803A〉G突变对这14个绵羊和山羊的繁殖力没有显著影响. 展开更多

关键词 绵羊 山羊 繁殖力 DLX3基因 PCR-SSCP

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公鸡弱精症相关候选基因的表达分析 被引量：5

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作者 富丽 孙研研 +5 位作者 薛夫光 刘冉冉 白皓 常国斌 陈国宏 陈继兰 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期889-895,共7页

为了探究公鸡弱精症的发病机理,本研究对前期应用数字基因表达谱技术(Digital gene expression,DGE)及生物信息学分析得到的与公鸡弱精症相关的6个候选基因(COX7B、PTGDS、hPGDS、SPAG6、WNT2、CCNF)进行表达分析。选取300只42周龄的北... 为了探究公鸡弱精症的发病机理,本研究对前期应用数字基因表达谱技术(Digital gene expression,DGE)及生物信息学分析得到的与公鸡弱精症相关的6个候选基因(COX7B、PTGDS、hPGDS、SPAG6、WNT2、CCNF)进行表达分析。选取300只42周龄的北京油鸡公鸡,进行为期4周的精液品质检测,从中筛出弱精及正常个体各15只。采用RT-qPCR对这6个候选基因在两组个体的睾丸组织的表达量进行相对定量检测。结果发现,COX7B、PTGDS在弱精组个体睾丸的表达量显著高于正常个体(P<0.01),WNT2、hPGDS、CCNF在弱精组个体的表达量显著低于正常个体(P<0.05),SPAG6在两组睾丸中的表达量没有显著差异,该结果与DGE的结果相吻合。通过DGE筛选出与弱精症相关的6个候选基因的表达模式在本研究的群体中得到进一步验证,可作为公鸡弱精症的重要候选基因,进一步进行功能分析与验证,为揭示公鸡弱精症的发病机理提供依据。 展开更多

关键词 弱精症 候选基因 睾丸 数字基因表达谱 实时荧光定量PCR

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猪胰岛素启动子调控EGFP表达载体的优化及体外验证

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作者 于淑珍 冯冲 +2 位作者 石宁宁 宋小凤 潘登科 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2014年第6期34-39,I0005,共7页

目的获得猪胰岛素启动子调控外源基因的高效表达载体,为制备转基因猪胰岛特异性表达目的基因奠定基础。方法利用猪胰岛素启动子(PIP,包含5'调控区、第一外显子、第一内含子及第二外显子ATG前的序列共1.5 kb)构建表达载体,连接PIP和E... 目的获得猪胰岛素启动子调控外源基因的高效表达载体,为制备转基因猪胰岛特异性表达目的基因奠定基础。方法利用猪胰岛素启动子(PIP,包含5'调控区、第一外显子、第一内含子及第二外显子ATG前的序列共1.5 kb)构建表达载体,连接PIP和EGFP的酶切位点HindⅢ设计在起始密码子前,命名为PIP-Hind IIIEGFP。鉴于酶切位点的插入位置可能会影响外源基因的表达效率,对载体进行了优化:将Hind III酶切位点删除,实现PIP和EGFP无缝连接,载体命名PIP-EGFP;将第一内含子3'端的内含子剪接受体位点(splicing acceptor site,SA)突变为Hind III内切酶识别位点,命名为PIP-SA(M)-EGFP。三种载体分别电转染小鼠胰岛素瘤β细胞株MIN-6细胞、猪耳成纤维细胞以及猪肾细胞,48 h后通过荧光强度、流式分析、RT-PCR及Western blot检测,验证载体的表达效率。结果转染细胞后,三种载体都仅在MIN-6胰岛β细胞表达绿色荧光。RT-PCR及其产物测序结果显示三种载体的胰岛素启动子第一内含子的剪切存在差异:载体PIP-Hind III-EGFP和PIP-EGFP的内含子存在剪切和不剪切两种情况,剪切不稳定;载体PIP-SA(M)-EGFP的SA位点突变后内含子不剪切,流式细胞及Western blot检测显示,与另外两种载体相比,该载体目的蛋白的表达量最高。结论通过突变胰岛素启动子第一内含子的3'端的剪接受体位点,成功获得了胰岛β细胞的高效表达载体,可用于制备胰岛特异表达外源基因的转基因猪。 展开更多

关键词 胰岛素启动子PIP 特异性表达 小鼠胰岛素瘤β细胞株MIN-6细胞 EGFP 五指山小型猪

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GGTA1^(-/-)五指山小型猪SLAI类基因分子特征及与HLA相似性分析

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作者 蒋应弟 曾国敏 +4 位作者 石宁宁 李西睿 纪慧丽 潘登科 滚双宝 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期375-380,共6页

目的明晰α-1,3半乳糖基转移酶基因敲除(GGTA1-/-)的五指山小型猪SLA经典I类基因分子结构特征及其与人HLA的相似性,对研究异种器官移植细胞性排斥反应具有重要意义。方法采集6头祖代GGTA1-/-五指山小型猪耳组织,利用RT-PCR对SLA I类基因... 目的明晰α-1,3半乳糖基转移酶基因敲除(GGTA1-/-)的五指山小型猪SLA经典I类基因分子结构特征及其与人HLA的相似性,对研究异种器官移植细胞性排斥反应具有重要意义。方法采集6头祖代GGTA1-/-五指山小型猪耳组织,利用RT-PCR对SLA I类基因(SLA-1、SLA-3、SLA-2)扩增、克隆及测序,对序列进行BLAST分析,并采用生物信息学方法对SLA I类基因分子结构特征及其与人HLA的同源性进行分析。结果测序分析表明,共获得6条等位基因序列,其中4条为已公布的等位基因(SLA-1*0703、SLA-2*1102、SLA-3*0401、SLA-3*0403),另2条为新等位基因(SLA-1*0401wz01、SLA-2*11wz01)。五指山小型猪与人HLA同源性为70.5%~72.1%。SLA-1*0401wz01、SLA-1*0703、SLA-2*11wz01、SLA-2*1102和SLA-3*0401的CD8+分子识别的关键结合域与人HLA氨基酸序列比对,均仅在位点225、228处发生了突变(T→S、T→M),其他位点高度保守。SLA-2*11wz01和SLA-2*1102与人HLA I类基因NK细胞抑制性受体(killer inhibitory receptor,KIR)结合区氨基酸同源性较高,在NKTA-1亚型结合域内仅有1个氨基酸差异,而在NKTA-2和NKTA-3亚型结合域内有2个氨基酸差异。结论从免疫细胞介导的异种排斥反应角度出发,GGTA1-/-五指山小型猪SLA I类基因氨基酸序列与人HLA高度相似,可作为未来猪-人异种器官移植的良好供体之一。 展开更多

关键词 GGTA1-/- 五指山小型猪 SLA 异种移植 免疫排斥

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转基因猪中抗生素标记基因neo漂移风险评估

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作者 王庆庆 高鹏飞 +5 位作者 李和刚 马德尊 蔡春波 钱丽丽 姜声旺 崔文涛 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2015年第10期2720-2725,共6页

本试验旨在研究转基因猪中抗生素标记基因neo漂移的可能性。利用Southern blotting鉴定F1代仔猪的显隐性,结果发现6头仔猪中有3头为转基因仔猪,3头为阴性仔猪。通过PCR技术对试验仔猪血液和消化道组织中neo基因进行检测,结果发现neo基... 本试验旨在研究转基因猪中抗生素标记基因neo漂移的可能性。利用Southern blotting鉴定F1代仔猪的显隐性,结果发现6头仔猪中有3头为转基因仔猪,3头为阴性仔猪。通过PCR技术对试验仔猪血液和消化道组织中neo基因进行检测,结果发现neo基因没有在血液水平和消化道组织中发生漂移。通过PCR技术对试验仔猪肠道细菌中neo基因进行检测,在肠道细菌基因组中没有检测到neo基因的存在。检测结果表明,仔猪血液、肠道细菌和消化道组织等都没有发生neo基因的漂移。 展开更多

关键词 转基因仔猪 neo基因 基因漂移

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