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TaqMan荧光定量PCR检测鸡产蛋下降综合征病毒方法的建立及应用
被引量：
3
1
作者
马震原
李刚
+1 位作者
李文超
郭宇飞
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第5期767-772,共6页
根据GenBank公布的鸡产蛋下降综合征病毒六邻体蛋白基因的高度保守序列,设计了2对特异性引物和1条TaqMan探针。以构建的阳性重组质粒为标准品,绘制标准曲线,建立了一种快速检测鸡产蛋下降综合征病毒的TaqMan荧光实时定量PCR方法。该方...
根据GenBank公布的鸡产蛋下降综合征病毒六邻体蛋白基因的高度保守序列,设计了2对特异性引物和1条TaqMan探针。以构建的阳性重组质粒为标准品,绘制标准曲线,建立了一种快速检测鸡产蛋下降综合征病毒的TaqMan荧光实时定量PCR方法。该方法最小检出量达10copies.μL-1,在1.0×102～1.0×108copies.μL-1检测范围间有良好的线性关系,特异性、稳定性和重复性也较好。用建立的本方法检测感染鸡产蛋下降综合征病毒鸡群的产蛋分离物,与普通PCR相比,该荧光实时定量PCR方法具有更高的敏感性,可更好地用于鸡产蛋下降综合征病毒的临床检测。
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关键词
鸡产蛋下降综合征病毒
TAQMAN探针
荧光实时定量PCR
临床检测
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职称材料
鸡产蛋下降综合征病毒NE_4毒株对KM小鼠感染特性观察
2
作者
马震原
李刚
郭宇飞
《中国实验动物学报》
CAS
CSCD
2012年第6期43-46,I0006,I0007,共6页
目的初步探究鸡产蛋下降综合征病毒NE4(EDSV NE4)毒株对昆明小鼠的感染特性。方法用106TCID50攻毒量的EDSV NE4株对4～6周龄的KM小鼠进行攻毒试验,同时以正常尿囊液接种作为阴性对照。用荧光定量PCR对小鼠组织及粪便中的EDSV进行检测,...
目的初步探究鸡产蛋下降综合征病毒NE4(EDSV NE4)毒株对昆明小鼠的感染特性。方法用106TCID50攻毒量的EDSV NE4株对4～6周龄的KM小鼠进行攻毒试验,同时以正常尿囊液接种作为阴性对照。用荧光定量PCR对小鼠组织及粪便中的EDSV进行检测,同时用HE染色及免疫组化法对小鼠组织切片进行病理组织学观察和抗原定位。结果 EDSV攻毒对小鼠的采食情况产生一定影响,但并未引起明显的临床症状;攻毒组小鼠可产生针对EDSV特异性的抗体,HI抗体滴度可高达212,阴性对照组小鼠体内抗体检测为阴性;攻毒后小鼠大部分组织器官如肝脏、子宫、肾脏、肺脏等与攻毒7 d后粪便中均可检测到EDSV,阴性对照小鼠所有受检组织中均未检测到病毒;EDSV攻毒未能引起小鼠组织的病理学变化,攻毒后不同时间内,可在子宫、肺脏、肝脏、肾脏中可检测到阳性信号,最为典型的定殖位置是子宫腺体上皮细胞及肌层细胞的胞质中。结论 EDSV NE4株可以感染KM小鼠。
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关键词
鸡产蛋下降综合征病毒
NE4株
小鼠
感染特性
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职称材料
题名
TaqMan荧光定量PCR检测鸡产蛋下降综合征病毒方法的建立及应用
被引量：
3
1
作者
马震原
李刚
李文超
郭宇飞
机构
四川
农业
大学动物医
学院
中国农业科学院北京畜牧兽医研究所农业部兽用药物与兽医生物技术北京科学观测实验站
金陵科技
学院
动物
科学院
出处
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第5期767-772,共6页
基金
国家自然科学基金(31172342)
国家公益行业项目(200903037-2)
+1 种基金
国家高技术研究发展计划(863)项目(2008AA10Z411)
FAO/IAEA项目(14515)
文摘
根据GenBank公布的鸡产蛋下降综合征病毒六邻体蛋白基因的高度保守序列,设计了2对特异性引物和1条TaqMan探针。以构建的阳性重组质粒为标准品,绘制标准曲线,建立了一种快速检测鸡产蛋下降综合征病毒的TaqMan荧光实时定量PCR方法。该方法最小检出量达10copies.μL-1,在1.0×102～1.0×108copies.μL-1检测范围间有良好的线性关系,特异性、稳定性和重复性也较好。用建立的本方法检测感染鸡产蛋下降综合征病毒鸡群的产蛋分离物,与普通PCR相比,该荧光实时定量PCR方法具有更高的敏感性,可更好地用于鸡产蛋下降综合征病毒的临床检测。
关键词
鸡产蛋下降综合征病毒
TAQMAN探针
荧光实时定量PCR
临床检测
Keywords
egg drop syndrome virus
TaqMan probe
fluorescent real-time quantitative PCR
clinical testing
分类号
S852.659.1 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
鸡产蛋下降综合征病毒NE_4毒株对KM小鼠感染特性观察
2
作者
马震原
李刚
郭宇飞
机构
中国农业科学院北京畜牧兽医研究所农业部兽用药物与兽医生物技术北京科学观测实验站
四川
农业
大学动物医
学院
金陵科技
学院
动物
科学院
出处
《中国实验动物学报》
CAS
CSCD
2012年第6期43-46,I0006,I0007,共6页
基金
国家自然科学基金(No.31172342)
国家公益行业项目(No.200903037-2)
+1 种基金
国家高技术研究发展计划(863)项目(2008AA10Z411)
FAO/IAEA项目(14515)
文摘
目的初步探究鸡产蛋下降综合征病毒NE4(EDSV NE4)毒株对昆明小鼠的感染特性。方法用106TCID50攻毒量的EDSV NE4株对4～6周龄的KM小鼠进行攻毒试验,同时以正常尿囊液接种作为阴性对照。用荧光定量PCR对小鼠组织及粪便中的EDSV进行检测,同时用HE染色及免疫组化法对小鼠组织切片进行病理组织学观察和抗原定位。结果 EDSV攻毒对小鼠的采食情况产生一定影响,但并未引起明显的临床症状;攻毒组小鼠可产生针对EDSV特异性的抗体,HI抗体滴度可高达212,阴性对照组小鼠体内抗体检测为阴性;攻毒后小鼠大部分组织器官如肝脏、子宫、肾脏、肺脏等与攻毒7 d后粪便中均可检测到EDSV,阴性对照小鼠所有受检组织中均未检测到病毒;EDSV攻毒未能引起小鼠组织的病理学变化,攻毒后不同时间内,可在子宫、肺脏、肝脏、肾脏中可检测到阳性信号,最为典型的定殖位置是子宫腺体上皮细胞及肌层细胞的胞质中。结论 EDSV NE4株可以感染KM小鼠。
关键词
鸡产蛋下降综合征病毒
NE4株
小鼠
感染特性
Keywords
Egg drop syndrome virus （EDSV）
Strain NE4
Kunmimg mice
Characteristics
infection
分类号
Q95-33 [生物学—动物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
TaqMan荧光定量PCR检测鸡产蛋下降综合征病毒方法的建立及应用
马震原
李刚
李文超
郭宇飞
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012
3
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
鸡产蛋下降综合征病毒NE_4毒株对KM小鼠感染特性观察
马震原
李刚
郭宇飞
《中国实验动物学报》
CAS
CSCD
2012
0
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职称材料
已选择
0
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