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整合型诱导表达猪生长激素(pGH)载体的构建及表达研究被引量：8: 1; 作者鞠辉明白立景 +1 位作者姜星李奎《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第7期1008-1013,共6页; 旨在构建整合型诱导表达猪生长激素(Porcine growth hormone,pGH)载体,在细胞水平验证其诱导效率及表达效率。从pTRE-GH12载体上扩增TRE-GH片段,通过Sal I酶切位点连接到pCAGGS-rtTA载体中,构建重组载体pCAGGS-rtTA-TRE-GH12(下称pTTGH)... 展开更多; 关键词诱导表达猪生长激素整合型真核表达载体; 在线阅读下载PDF 职称材料

大肠杆菌植酸酶appA2基因联合人MxA基因真核表达载体的构建及表达研究被引量：3: 2; 作者鞠辉明白立景 +3 位作者牟玉莲杨述林刘宗平李奎《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第12期1550-1555,共6页; 本研究旨在探讨通过构建同时表达大肠杆菌植酸酶appA2及人抗黏液病毒基因A(Myxovirus resistance gene,MxA)的真核表达载体,比较双基因表达载体和相应单基因表达载体中外源基因的表达效率;从pcDNA-ap-pA2载体上扩增CMV-appA2-BGHpA片段... 展开更多; 关键词人抗黏液病毒基因A 植酸酶 appA2 真核表达载体多顺反子; 在线阅读下载PDF 职称材料

孕酮受体基因多态性及其与小尾寒羊产羔数的关系被引量：5: 3; 作者查丽莎储明星 +5 位作者狄冉陈宏权方丽张宝云马月辉李奎《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期148-153,共6页; 设计15对引物,采用PCR-SSCP技术检测孕酮受体(progesterone receptor,PGR)基因全部9个外显子在小尾寒羊、湖羊、特克塞尔和多赛特中的单核苷酸多态性,同时研究该基因对小尾寒羊产羔数的影响。只有引物P9扩增片段具有多态性。对于P9扩增... 展开更多; 关键词绵羊多羔性孕酮受体基因聚合酶链式反应-单链构象多态性(PCR-SSCP); 在线阅读下载PDF 职称材料

荷斯坦母牛OSTF1基因多态性及其与体细胞评分的关系被引量：1: 4; 作者郎咸政刘小林 +3 位作者储明星安永福狄冉方丽《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期680-684,共5页; 设计5对引物P1-P5,利用PCR-SSCP技术检测227头荷斯坦母牛促破骨细胞因子1(osteoclaststimulating factor 1,OSTF1)基因部分序列的多态性。结果发现只有P3扩增的外显子7区域存在A45416G和C45436T2个突变位点,其中A45416G突变位点导致蛋氨... 展开更多; 关键词荷斯坦母牛 OSTF1基因乳房炎体细胞评分 PCR-SSCP; 在线阅读下载PDF 职称材料

开展健康养殖实现养猪业的持续发展: 5; 作者梁如意《今日畜牧兽医》 2013年第2期15-18,共4页; 近年来．我国的养猪业得到了巨大的发展，与此同时猪病的发生率不断上升，对环境的污染日益严重，猪肉产品的质量也存在一些问题，危害越来越严重。随着养猪业规模化的发展，以及人们对猪肉品质的要求不断提高，猪的健康养殖成了人们关... 展开更多; 关键词健康养殖可持续发展养猪业生态养猪策划猪肉产品猪肉品质发生率; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名整合型诱导表达猪生长激素(pGH)载体的构建及表达研究被引量：8: 1; 作者鞠辉明白立景姜星李奎; 机构扬州大学兽医学院中国农业科学院北京畜牧兽医研究所/农业部畜禽遗传资源与利用重点开放实验室; 出处《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第7期1008-1013,共6页; 基金国家转基因新品种培育重大专项(2011ZX08006-003) 国家自然科学基金资助项目(31272405 +1 种基金 31000993) 江苏高校优势学科建设工程资助项目; 文摘旨在构建整合型诱导表达猪生长激素(Porcine growth hormone,pGH)载体,在细胞水平验证其诱导效率及表达效率。从pTRE-GH12载体上扩增TRE-GH片段,通过Sal I酶切位点连接到pCAGGS-rtTA载体中,构建重组载体pCAGGS-rtTA-TRE-GH12(下称pTTGH),将pTTGH质粒转染猪PK15细胞,经G418筛选后,在培养液中添加诱导底物强力霉素(Doxycycline,DOX)后不同时间段通过实时荧光定量PCR(QRT-PCR)测定细胞内pGH mRNA的表达;在培养液中添加不同浓度的的DOX,通过QRT-PCR及Western blot测定细胞内pGH的表达变化。酶切及测序结果表明成功构建了pTTGH载体;QRT-PCR结果表明,和对照组相比,试验组细胞培养液中添加诱导底物后外源GH基因表达在36h时最高;在一定浓度范围内,外源GH表达水平和添加DOX的浓度呈现出正相关性,而正常细胞组中GH的表达水平不受DOX添加与否及量的影响。通过条带灰度分析Western杂交结果验证了培养基中一定范围内DOX浓度和pGH表达量呈现出正相关。试验结果表明,本研究成功构建了整合型诱导表达GH载体并能实现GH的可控表达,本研究为以后制备可控表达GH转基因动物、进一步研究GH对机体影响奠定基础。; 关键词诱导表达猪生长激素整合型真核表达载体; Keywords inducible expression porcine growth hormone integrated eukaryotic expression vector; 分类号 S828 [农业科学—畜牧学] S813.3 [农业科学—畜牧学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名大肠杆菌植酸酶appA2基因联合人MxA基因真核表达载体的构建及表达研究被引量：3: 2; 作者鞠辉明白立景牟玉莲杨述林刘宗平李奎; 机构扬州大学兽医学院中国农业科学院北京畜牧兽医研究所/农业部畜禽遗传资源与利用重点开放实验室中国农业大学动物医学院; 出处《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第12期1550-1555,共6页; 基金国家转基因新品种培育重大专项(2008ZX08010-004-006) 国家863计划(2008AA10Z143) +2 种基金 30500359) 扬州大学博士启动金费资助; 文摘本研究旨在探讨通过构建同时表达大肠杆菌植酸酶appA2及人抗黏液病毒基因A(Myxovirus resistance gene,MxA)的真核表达载体,比较双基因表达载体和相应单基因表达载体中外源基因的表达效率;从pcDNA-ap-pA2载体上扩增CMV-appA2-BGHpA片段,通过MluI酶切位点连接到pcDNA-MxA载体中,构建重组载体pcDNA-appA-MxA(下称AMP),分别将pcDNA3.1(+)、pcDNA-MxA、pcDNA-appA2及AMP质粒转染猪PK15细胞,经G418筛选后,取细胞通过实时荧光定量PCR测定细胞内appA2及MxA的表达,同时部分细胞通过Westernblot测定细胞内MxA蛋白表达量,采用改进的钼酸铵显色法测定细胞内植酸酶活性;酶切及测序结果表明成功构建了AMP载体;QRT-PCR结果表明,转AMP细胞组MxA表达水平是转pcDNA-MxA组的1.118倍,转AMP细胞组appA2表达水平是转pcDNA-appA2组的1.134倍,上述各组间差异显著(P<0.05)。灰度分析结果表明,AMP细胞组细胞内MxA表达量是转染pcDNA-MxA细胞组的1.07倍;植酸酶活性测定试验结果表明,转AMP、pcDNA-appA2细胞组及对照组细胞内植酸酶酶活和对照组平均酶活分别为0.294、0.235及0.082FTU·μL-1,2个试验组间差异不显著,试验组和对照组间差异极显著(P<0.01);试验结果表明本研究构建双基因表达载体中外源基因的表达效率比相应单基因表达载体表达效率高,本研究为以后多基因共表达及制备多基因转基因动物奠定了基础。; 关键词人抗黏液病毒基因A 植酸酶 appA2 真核表达载体多顺反子; Keywords myxovirus resistance gene A phytase appA2 eukaryotic expression vector polycistron; 分类号 S813.3 [农业科学—畜牧学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名孕酮受体基因多态性及其与小尾寒羊产羔数的关系被引量：5: 3; 作者查丽莎储明星狄冉陈宏权方丽张宝云马月辉李奎; 机构安徽农业大学动物科技学院中国农业科学院北京畜牧兽医研究所/农业部畜禽遗传资源与利用重点开放实验室重庆大学生物工程学院; 出处《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期148-153,共6页; 基金国家科技支撑计划(No.2008BADB2B01) 国家现代农业产业技术体系建设专项资金(农科教发[2008]10号) +2 种基金国家"973"计划(2006CB102105) 中国农业科学院首批优秀科技创新团队专项; 文摘设计15对引物,采用PCR-SSCP技术检测孕酮受体(progesterone receptor,PGR)基因全部9个外显子在小尾寒羊、湖羊、特克塞尔和多赛特中的单核苷酸多态性,同时研究该基因对小尾寒羊产羔数的影响。只有引物P9扩增片段具有多态性。对于P9扩增片段,在小尾寒羊、湖羊和多赛特中均检测到AA、AG和GG型,在特克塞尔中只检测到AA和AG型。测序表明GG型与AA型相比在217 bp处有一单碱基突变(A→G),但未引起氨基酸变化。GG型和AG型小尾寒羊产羔数均值分别比AA型的多0.97只(P<0.05)和0.64只(P<0.05),GG型和AG型小尾寒羊产羔数差异不显著(P>0.05)。结果初步表明PGR基因的G等位基因是提高绵羊产羔数的一个潜在有效的DNA标记。; 关键词绵羊多羔性孕酮受体基因聚合酶链式反应-单链构象多态性(PCR-SSCP); Keywords sheep prolificacy progesterone receptor gene polymerase chain reaction-single strand conformation polymorphism; 分类号 S826.2 [农业科学—畜牧学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名荷斯坦母牛OSTF1基因多态性及其与体细胞评分的关系被引量：1: 4; 作者郎咸政刘小林储明星安永福狄冉方丽; 机构西北农林科技大学动物科技学院中国农业科学院北京畜牧兽医研究所/农业部畜禽遗传资源与利用重点开放实验室河北省畜牧兽医研究所; 出处《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期680-684,共5页; 基金国家"十一五"科技支撑计划课题(2006BAD04A10) 北京市自然科学基金项目(6022015) +1 种基金国家"863"计划项目(2008AA10Z144) 陕西省"13115"科技创新工程项目(2008ZDKG211); 文摘设计5对引物P1-P5,利用PCR-SSCP技术检测227头荷斯坦母牛促破骨细胞因子1(osteoclaststimulating factor 1,OSTF1)基因部分序列的多态性。结果发现只有P3扩增的外显子7区域存在A45416G和C45436T2个突变位点,其中A45416G突变位点导致蛋氨酸(M)变为缬氨酸(V)。经SSCP分析存在AA、AB、BB、AC和CC 5种基因型,其频率分别为0.515、0.366、0.075、0.035、0.009。用最小二乘法分析OSTF1基因多态性与荷斯坦母牛体细胞评分(somatic cell score,SCS)的关系,结果表明:对于P3扩增产物多态位点,BB基因型SCS最小二乘均值显著低于AA、AB、AC基因型所对应的值(均为P<0.05);AA、AB、AC之间SCS最小二乘均值差异不显著(P>0.05)。BB基因型为乳房炎抗性基因型。在中国荷斯坦奶牛群体中,OSTF1基因BB基因型可作为改良奶牛乳房炎抗性性状的分子遗传标记。; 关键词荷斯坦母牛 OSTF1基因乳房炎体细胞评分 PCR-SSCP; Keywords Holstein cows OSTF1 gene mastitis somatic cell score PCR-SSCP; 分类号 S823.36 [农业科学—畜牧学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名开展健康养殖实现养猪业的持续发展: 5; 作者梁如意; 机构南京农业大学动物科技学院中国农业科学院北京畜牧兽医研究所/农业部畜禽遗传资源与利用重点开放实验室; 出处《今日畜牧兽医》 2013年第2期15-18,共4页; 文摘近年来．我国的养猪业得到了巨大的发展，与此同时猪病的发生率不断上升，对环境的污染日益严重，猪肉产品的质量也存在一些问题，危害越来越严重。随着养猪业规模化的发展，以及人们对猪肉品质的要求不断提高，猪的健康养殖成了人们关注的焦点。; 关键词健康养殖可持续发展养猪业生态养猪策划猪肉产品猪肉品质发生率; 分类号 S968.229 [农业科学—水产养殖]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	整合型诱导表达猪生长激素(pGH)载体的构建及表达研究	鞠辉明白立景姜星李奎	《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心	2013	8	在线阅读下载PDF 职称材料
2	大肠杆菌植酸酶appA2基因联合人MxA基因真核表达载体的构建及表达研究	鞠辉明白立景牟玉莲杨述林刘宗平李奎	《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心	2010	3	在线阅读下载PDF 职称材料
3	孕酮受体基因多态性及其与小尾寒羊产羔数的关系	查丽莎储明星狄冉陈宏权方丽张宝云马月辉李奎	《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2011	5	在线阅读下载PDF 职称材料
4	荷斯坦母牛OSTF1基因多态性及其与体细胞评分的关系	郎咸政刘小林储明星安永福狄冉方丽	《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2011	1	在线阅读下载PDF 职称材料
5	开展健康养殖实现养猪业的持续发展	梁如意	《今日畜牧兽医》	2013	0	在线阅读下载PDF 职称材料