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猪戊型肝炎病毒swCH189株衣壳蛋白基因CP239片段原核表达条件的优化
1
作者
郝宝成
梁剑平
+5 位作者
兰喜
刑小勇
项海涛
温峰琴
胡永浩
柳纪省
《湖北农业科学》
北大核心
2011年第15期3116-3119,共4页
为了提高猪戊型肝炎病毒swCH189株衣壳蛋白基因CP239片段在大肠杆菌中的表达量,研究了载体、温度、转速、诱导时间以及诱导剂IPTG浓度等不同条件对衣壳蛋白基因CP239片段融合蛋白表达量的影响。结果表明,用LB培养基于37℃培养3.5 h后,...
为了提高猪戊型肝炎病毒swCH189株衣壳蛋白基因CP239片段在大肠杆菌中的表达量,研究了载体、温度、转速、诱导时间以及诱导剂IPTG浓度等不同条件对衣壳蛋白基因CP239片段融合蛋白表达量的影响。结果表明,用LB培养基于37℃培养3.5 h后,采用终浓度为0.3 mmol/L的IPTG在37℃、200r/min诱导培养4 h,pET32a-CP239融合蛋白表达量最大;SDS-PAGE检测结果表明pET32a-CP239融合蛋白的分子质量与预期大小一致,约为45.3 ku;Western blotting结果表明,pET32a-CP239融合蛋白可以与抗-HEV阳性血清发生特异性反应,并具有良好的反应原性,说明衣壳蛋白基因CP239片段蛋白得到正确表达。
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关键词
猪戊型肝炎病毒
衣壳蛋白
CP239片段
原核表达
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职称材料
牛源金黄色葡萄球菌凝固酶分型与致病因子检测
被引量：
5
2
作者
徐结
侯晓
+1 位作者
张雪婧
蒲万霞
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第2期196-199,共4页
为了解青海和甘肃地区奶牛养殖场的金黄色葡萄球菌(S.aureus)基因型分布状况,本研究对来自该两个地区的210份奶样进行了S.aureus的分离与鉴定,利用凝固酶基因(Coa)扩增和限制性内切酶AluⅠ酶切方法对所有分离株进行了凝固酶多态性分型...
为了解青海和甘肃地区奶牛养殖场的金黄色葡萄球菌(S.aureus)基因型分布状况,本研究对来自该两个地区的210份奶样进行了S.aureus的分离与鉴定,利用凝固酶基因(Coa)扩增和限制性内切酶AluⅠ酶切方法对所有分离株进行了凝固酶多态性分型。并对不同凝固酶基因型的S.aureus进行了白细胞毒素F (LukF)、白细胞毒素S (LukS)、α溶血素(α-hemolysin)、β溶血素(β-hemolysin)等主要致病因子检测。结果显示,共分离鉴定出35株S.aureus (青海13株,甘肃22株),所有分离株均能够扩增出Coa基因片段,并有5种PCR分型结果(本文简称PCR1～PCR5型),其中PCR 1、4和5型只有1种亚型,而PCR 2型有3种亚型,PCR 3型有2种亚型。PCR3型是青海(6/13)和甘肃地区(8/22)主要流行的基因型。致病因子检测结果显示,所有分离株均携带致病因子LukS和α溶血素;致病因子LukF和β溶血素检出率也很高,分别是30株(85.7%)和31株(88.6%)。β溶血素基因在甘肃地区检出率为95.5%(21/22),青海地区检出率为76.9%(10/13),致病因子LukF在甘肃地区检出率为91.0%(20/22),青海地区检出率为76.9%(10/13),且在各基因型中均有分布,甘肃地区S.aureus致病因子LukF和β溶血素检出率高于青海地区。本研究首次对青海和甘肃地区致奶牛乳房炎S.aureus进行了鉴定分析,为这两个地区奶牛乳房炎的防治提供了参考依据。
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关键词
奶牛乳房炎
金黄色葡萄球菌
凝固酶分型
致病因子
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职称材料
题名
猪戊型肝炎病毒swCH189株衣壳蛋白基因CP239片段原核表达条件的优化
1
作者
郝宝成
梁剑平
兰喜
刑小勇
项海涛
温峰琴
胡永浩
柳纪省
机构
中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所/新兽药重点开放实验室/甘肃省新兽药工程重点实验室
中国农业科学院
兰州
兽
医
研究所
/家畜疫病病原生物学国家
重点
实验室
/
农业
部畜禽病毒学
重点
开放实验室
/
农业
部草食动物疫病
重点
开放实验室
甘肃
农业
大学动物医
学院
出处
《湖北农业科学》
北大核心
2011年第15期3116-3119,共4页
基金
中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金(BRF090402)
文摘
为了提高猪戊型肝炎病毒swCH189株衣壳蛋白基因CP239片段在大肠杆菌中的表达量,研究了载体、温度、转速、诱导时间以及诱导剂IPTG浓度等不同条件对衣壳蛋白基因CP239片段融合蛋白表达量的影响。结果表明,用LB培养基于37℃培养3.5 h后,采用终浓度为0.3 mmol/L的IPTG在37℃、200r/min诱导培养4 h,pET32a-CP239融合蛋白表达量最大;SDS-PAGE检测结果表明pET32a-CP239融合蛋白的分子质量与预期大小一致,约为45.3 ku;Western blotting结果表明,pET32a-CP239融合蛋白可以与抗-HEV阳性血清发生特异性反应,并具有良好的反应原性,说明衣壳蛋白基因CP239片段蛋白得到正确表达。
关键词
猪戊型肝炎病毒
衣壳蛋白
CP239片段
原核表达
Keywords
swine hepatitis E virus
capsid protein
CP239 fragment
prokaryotic expression
分类号
Q786 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
牛源金黄色葡萄球菌凝固酶分型与致病因子检测
被引量：
5
2
作者
徐结
侯晓
张雪婧
蒲万霞
机构
中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所/新兽药重点开放实验室/甘肃省新兽药工程重点实验室
出处
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第2期196-199,共4页
基金
国家重点研发计划(2016YFD0501305)
中央级公益性科研院所基本科研业务费基金项目(610322016014)
文摘
为了解青海和甘肃地区奶牛养殖场的金黄色葡萄球菌(S.aureus)基因型分布状况,本研究对来自该两个地区的210份奶样进行了S.aureus的分离与鉴定,利用凝固酶基因(Coa)扩增和限制性内切酶AluⅠ酶切方法对所有分离株进行了凝固酶多态性分型。并对不同凝固酶基因型的S.aureus进行了白细胞毒素F (LukF)、白细胞毒素S (LukS)、α溶血素(α-hemolysin)、β溶血素(β-hemolysin)等主要致病因子检测。结果显示,共分离鉴定出35株S.aureus (青海13株,甘肃22株),所有分离株均能够扩增出Coa基因片段,并有5种PCR分型结果(本文简称PCR1～PCR5型),其中PCR 1、4和5型只有1种亚型,而PCR 2型有3种亚型,PCR 3型有2种亚型。PCR3型是青海(6/13)和甘肃地区(8/22)主要流行的基因型。致病因子检测结果显示,所有分离株均携带致病因子LukS和α溶血素;致病因子LukF和β溶血素检出率也很高,分别是30株(85.7%)和31株(88.6%)。β溶血素基因在甘肃地区检出率为95.5%(21/22),青海地区检出率为76.9%(10/13),致病因子LukF在甘肃地区检出率为91.0%(20/22),青海地区检出率为76.9%(10/13),且在各基因型中均有分布,甘肃地区S.aureus致病因子LukF和β溶血素检出率高于青海地区。本研究首次对青海和甘肃地区致奶牛乳房炎S.aureus进行了鉴定分析,为这两个地区奶牛乳房炎的防治提供了参考依据。
关键词
奶牛乳房炎
金黄色葡萄球菌
凝固酶分型
致病因子
Keywords
bovine mastitis
Staphylococcus aureus
coagulase genotype
virulence
分类号
S852.61 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
猪戊型肝炎病毒swCH189株衣壳蛋白基因CP239片段原核表达条件的优化
郝宝成
梁剑平
兰喜
刑小勇
项海涛
温峰琴
胡永浩
柳纪省
《湖北农业科学》
北大核心
2011
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
牛源金黄色葡萄球菌凝固酶分型与致病因子检测
徐结
侯晓
张雪婧
蒲万霞
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2019
5
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职称材料
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