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猪CD8β基因的克隆、表达及其结构与功能分析
被引量：
5
1
作者
王生富
景志忠
+4 位作者
陈国华
房永祥
莫斯科
段凤云
何延华
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第9期737-742,共6页
本研究应用RT-PCR技术,从猪胸腺细胞总RNA中扩增、克隆了猪CD8β基因,序列分析表明CD8β含621bp的开放阅读框,编码207个氨基酸,与NCBI/GeneBank已发表的参考基因的核苷酸及推导氨基酸序列的同源性分别为97.8%和96.8%,与人、小鼠和鸡CD8...
本研究应用RT-PCR技术,从猪胸腺细胞总RNA中扩增、克隆了猪CD8β基因,序列分析表明CD8β含621bp的开放阅读框,编码207个氨基酸,与NCBI/GeneBank已发表的参考基因的核苷酸及推导氨基酸序列的同源性分别为97.8%和96.8%,与人、小鼠和鸡CD8β蛋白的氨基酸同源性分别为75.7%、67.9%和33.3%。根据大肠杆菌密码子偏嗜性改造目的基因,构建了pET28a/PCD8β原核表达系统,并经诱导获得高效表达的分子量为24ku的重组蛋白(rPCD8β),表达量占菌体蛋白总量的30%。利用生物信息学和分子生物学软件对猪CD8β基因编码的蛋白进行结构预测,表明猪CD8β成熟蛋白为跨膜蛋白,其中172aa在胞外区,22aa在跨膜区,10aa在胞内区;蛋白骨架内含有较多的柔性区域,而且分布不均匀,能形成结构松散的球状蛋白;猪CD8β分子V区三维结构与鼠的具有非常相似的空间结构,与人的差别较大,这为猪CD8β蛋白结构与功能的进一步研究奠定了基础。
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关键词
猪CD8
Β基因
克隆
表达
结构预测
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题名
猪CD8β基因的克隆、表达及其结构与功能分析
被引量：
5
1
作者
王生富
景志忠
陈国华
房永祥
莫斯科
段凤云
何延华
机构
中国农业科学院兰州兽医研究所甘肃省动物寄生虫病重点实验室/家畜疫病病原生物学国家重点实验室
出处
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第9期737-742,共6页
基金
“863”项目(2006AA10A203)
国家支撑计划项目(2006BAD31B03)
文摘
本研究应用RT-PCR技术,从猪胸腺细胞总RNA中扩增、克隆了猪CD8β基因,序列分析表明CD8β含621bp的开放阅读框,编码207个氨基酸,与NCBI/GeneBank已发表的参考基因的核苷酸及推导氨基酸序列的同源性分别为97.8%和96.8%,与人、小鼠和鸡CD8β蛋白的氨基酸同源性分别为75.7%、67.9%和33.3%。根据大肠杆菌密码子偏嗜性改造目的基因,构建了pET28a/PCD8β原核表达系统,并经诱导获得高效表达的分子量为24ku的重组蛋白(rPCD8β),表达量占菌体蛋白总量的30%。利用生物信息学和分子生物学软件对猪CD8β基因编码的蛋白进行结构预测,表明猪CD8β成熟蛋白为跨膜蛋白,其中172aa在胞外区,22aa在跨膜区,10aa在胞内区;蛋白骨架内含有较多的柔性区域,而且分布不均匀,能形成结构松散的球状蛋白;猪CD8β分子V区三维结构与鼠的具有非常相似的空间结构,与人的差别较大,这为猪CD8β蛋白结构与功能的进一步研究奠定了基础。
关键词
猪CD8
Β基因
克隆
表达
结构预测
Keywords
porcine CD8β
gene cloning
expression
structure analysis
分类号
S852.42 [农业科学—基础兽医学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
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1
猪CD8β基因的克隆、表达及其结构与功能分析
王生富
景志忠
陈国华
房永祥
莫斯科
段凤云
何延华
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2008
5
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