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新疆部分地区兔球虫种类调查研究 被引量:23
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作者 孟庆玲 田广孚 +1 位作者 闫鸿斌 张冬峰 《动物医学进展》 CSCD 2007年第8期44-47,共4页
对新疆部分地区家兔球虫的种类进行调查,发现兔的艾美耳球虫检出率为100%,并检出10种兔艾美耳球虫,即斯氏艾美耳球虫(Eimera stiedai)、大型艾美耳球虫(E.magna)、无残艾美耳球虫(E.irrestidua)、梨型艾美耳球虫(E.piriformis)、小型艾... 对新疆部分地区家兔球虫的种类进行调查,发现兔的艾美耳球虫检出率为100%,并检出10种兔艾美耳球虫,即斯氏艾美耳球虫(Eimera stiedai)、大型艾美耳球虫(E.magna)、无残艾美耳球虫(E.irrestidua)、梨型艾美耳球虫(E.piriformis)、小型艾美耳球虫(Eexigua)、肠艾美耳球虫(E.intestinalis)、盲肠艾美耳球虫(E.coecicola)、穿孔艾美耳球虫((E.perforans)、野兔艾美耳球虫(E.leporis)、黄艾美耳球虫(E.flsvescens),其中穿孔艾美耳球虫、小型艾美耳球虫和斯氏艾美耳球虫为优势虫种。 展开更多
关键词 球虫 种类 调查
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牦牛α-干扰素基因的克隆及其原核表达的研究 被引量:2
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作者 景志忠 李玉萍 +3 位作者 窦永喜 陈国华 房永祥 才学鹏 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期194-199,共6页
植物血凝素(PHA)诱导培养牦牛外周血淋巴细胞,提取总RNA,采用RT-PCR技术扩增牦牛IFN-α-A和IFN-α-Ⅱ基因,分别经PCR、酶切鉴定及测序分析后,再分别构建原核表达重组质粒,用SDS-PAGE和Western blot分析IPTG诱导表达的重组蛋白。序列分... 植物血凝素(PHA)诱导培养牦牛外周血淋巴细胞,提取总RNA,采用RT-PCR技术扩增牦牛IFN-α-A和IFN-α-Ⅱ基因,分别经PCR、酶切鉴定及测序分析后,再分别构建原核表达重组质粒,用SDS-PAGE和Western blot分析IPTG诱导表达的重组蛋白。序列分析表明,牦牛IFN-α-A基因ORF为570 bp,与NCBI上发表的奶牛IFN-α-A参考序列同源性为94.4%,与黄牛IFN-α-B基因(M10953)的同源性最高,为97.0%;牦牛IFN-α-Ⅱ基因ORF为588 bp,与NCBI上发表的奶牛IFN-α-Ⅱ参考序列同源性为94.2%,与黄牛IFN-δ-1基因(XM-871297)的同源性最高,为96.1%。分子遗传进化树分析表明牦牛IFN-α-A和IFN-α-Ⅱ与黄牛、奶牛和水牛亲缘关系最近,与猪、马、人的次之,与其它动物都较远,说明这两基因均具有种属差异性。诱导表达重组蛋白分析表明,pGEX4T/IFN-α-A和pGEX4T/IFN-α-Ⅱ在大肠杆菌中得到了正确表达,均可表达约44 ku的融合蛋白,主要以包涵体形式存在,且具有与抗血清发生反应的生物活性。 展开更多
关键词 牦牛IFN-α-A基因 牦牛IFN-α-Ⅱ基因 分子克隆 遗传演化关系 表达分析
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小亚璃眼蜱对牛巴贝斯虫未定种和环形泰勒虫传播的试验研究 被引量:13
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作者 罗建勋 殷宏 +6 位作者 关贵全 马米玲 孙彩琴 鲁炳义 白启 吕文顺 陈溥言 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第11期1197-1201,共5页
利用蜱传播试验确定小亚璃眼蜱对中国新分离的牛的巴贝斯虫未定种和环形泰勒虫的传播能力与传播方式,进而明确其在中国牛梨形虫病传播中的流行病学意义。试验结果表明:小亚璃眼蜱可在雌虫阶段受到巴贝斯虫未定种的感染,并可在次代若虫(2... 利用蜱传播试验确定小亚璃眼蜱对中国新分离的牛的巴贝斯虫未定种和环形泰勒虫的传播能力与传播方式,进而明确其在中国牛梨形虫病传播中的流行病学意义。试验结果表明:小亚璃眼蜱可在雌虫阶段受到巴贝斯虫未定种的感染,并可在次代若虫(2/2)和成虫(3/3)阶段将病原传播给试验牛;小亚璃眼蜱幼虫和若虫吸入环形泰勒虫,饱血脱落的幼虫和若虫所蜕化发育的饥饿若虫(2/2)和成虫(2/2)均可将病原传递给敏感动物;感染巴贝斯虫未定种的小亚璃眼蜱饱血雌虫所孵育出的次代幼虫和若虫仍可被环形泰勒虫感染,所发育出的若虫(2/2)和成虫(2/2)可在一次传播试验中将环形泰勒虫和巴贝斯虫未定种同时传播给试验动物。 展开更多
关键词 小亚璃眼蜱 巴贝斯虫未定种 环形泰勒虫 传播试验
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猪CD8β基因的克隆、表达及其结构与功能分析 被引量:5
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作者 王生富 景志忠 +4 位作者 陈国华 房永祥 莫斯科 段凤云 何延华 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第9期737-742,共6页
本研究应用RT-PCR技术,从猪胸腺细胞总RNA中扩增、克隆了猪CD8β基因,序列分析表明CD8β含621bp的开放阅读框,编码207个氨基酸,与NCBI/GeneBank已发表的参考基因的核苷酸及推导氨基酸序列的同源性分别为97.8%和96.8%,与人、小鼠和鸡CD8... 本研究应用RT-PCR技术,从猪胸腺细胞总RNA中扩增、克隆了猪CD8β基因,序列分析表明CD8β含621bp的开放阅读框,编码207个氨基酸,与NCBI/GeneBank已发表的参考基因的核苷酸及推导氨基酸序列的同源性分别为97.8%和96.8%,与人、小鼠和鸡CD8β蛋白的氨基酸同源性分别为75.7%、67.9%和33.3%。根据大肠杆菌密码子偏嗜性改造目的基因,构建了pET28a/PCD8β原核表达系统,并经诱导获得高效表达的分子量为24ku的重组蛋白(rPCD8β),表达量占菌体蛋白总量的30%。利用生物信息学和分子生物学软件对猪CD8β基因编码的蛋白进行结构预测,表明猪CD8β成熟蛋白为跨膜蛋白,其中172aa在胞外区,22aa在跨膜区,10aa在胞内区;蛋白骨架内含有较多的柔性区域,而且分布不均匀,能形成结构松散的球状蛋白;猪CD8β分子V区三维结构与鼠的具有非常相似的空间结构,与人的差别较大,这为猪CD8β蛋白结构与功能的进一步研究奠定了基础。 展开更多
关键词 猪CD8 Β基因 克隆 表达 结构预测
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猪TOLL样受体2基因在CHO-K1细胞中的表达 被引量:3
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作者 房永祥 景志忠 +3 位作者 陈国华 段凤云 蒙学莲 窦永喜 《甘肃农业大学学报》 CAS CSCD 2008年第1期14-17,共4页
将含猪TLR2(猪Toll样受体2,pTLR2)基因的真核表达载体PcDNA3.1/CT-GFP-pTLR2,采用脂质体法转染到CHO-K1细胞,用G418持续筛选获得了阳性细胞克隆.阳性细胞克隆系经PCR和RT-PCR检测表明:pTLR2基因得到稳定整合并能成功地转录.荧光显微镜观... 将含猪TLR2(猪Toll样受体2,pTLR2)基因的真核表达载体PcDNA3.1/CT-GFP-pTLR2,采用脂质体法转染到CHO-K1细胞,用G418持续筛选获得了阳性细胞克隆.阳性细胞克隆系经PCR和RT-PCR检测表明:pTLR2基因得到稳定整合并能成功地转录.荧光显微镜观察,转染细胞可见绿色荧光,表明获得了表达pTLR2的克隆细胞系. 展开更多
关键词 猪Toll样受体2 CHO-K1细胞 转染
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猪IL-18在毕赤酵母中分泌表达条件的优化 被引量:1
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作者 宋世斌 陈国华 +3 位作者 王颖 王笑笑 宗瑞谦 景志忠 《甘肃农业大学学报》 CAS CSCD 2008年第1期38-42,共5页
采用PCR方法从pGEM-IL-18重组质粒中亚克隆出IL-18基因并完成了真核融合表达载体pPIC9K-IL-18的构建和IL-18在毕赤酵母中的表达,在此基础上从发酵时间、不同诱导型、pH值、诱导剂量和接种量等方面对重组基因工程菌的摇瓶发酵条件进行了... 采用PCR方法从pGEM-IL-18重组质粒中亚克隆出IL-18基因并完成了真核融合表达载体pPIC9K-IL-18的构建和IL-18在毕赤酵母中的表达,在此基础上从发酵时间、不同诱导型、pH值、诱导剂量和接种量等方面对重组基因工程菌的摇瓶发酵条件进行了优化,进一步探索了酵母菌表达猪IL-18的发酵工艺.结果表明,摇瓶发酵时,诱导最佳时间为72 h,甲醇最适浓度为20 g/L,最适pH范围为6.0-8.0,最适接种量1∶1.与单纯甲醇诱导相比,甘油/甲醇诱导后的表达量明显提高. 展开更多
关键词 猪IL-18 毕赤酵母 摇瓶发酵 表达条件
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鸡传染性支气管炎弱毒苗的毒力返强检测 被引量:1
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作者 王凡 殷宏 +1 位作者 罗建勋 曾巧英 《甘肃农业大学学报》 CAS CSCD 2007年第4期35-37,共3页
将鸡传染性支气管炎疫苗毒接种10日龄鸡胚,并传至12代,观察鸡胚病变,于72 h收集尿囊液进行负染电镜观察和血凝试验.透射电镜观察到典型的冠状病毒颗粒,致鸡胚的典型病变作用和血凝活性随培养代次的增加显著增强.结果表明,该弱毒苗病毒... 将鸡传染性支气管炎疫苗毒接种10日龄鸡胚,并传至12代,观察鸡胚病变,于72 h收集尿囊液进行负染电镜观察和血凝试验.透射电镜观察到典型的冠状病毒颗粒,致鸡胚的典型病变作用和血凝活性随培养代次的增加显著增强.结果表明,该弱毒苗病毒毒力返强,存在安全隐患. 展开更多
关键词 鸡传染性支气管炎病毒 弱毒疫苗 毒力返强
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