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A型口蹄疫病毒结构蛋白VP1的表达·纯化及活性检测
被引量：
4
1
作者
李菁
林彤
+4 位作者
高闪电
丛国正
独军政
邵军军
常惠芸
《安徽农业科学》
CAS
北大核心
2010年第10期5248-5250,共3页
[目的]表达口蹄疫病毒结构蛋白VP1,并对其进行纯化和相关活性的检测。[方法]以A型口蹄疫病毒结构蛋白VP1重组质粒pGEM-VP1为模板,用特异性表达引物扩增其编码区,经酶切后与pGEX-4T-1、pPROExHTb等原核表达载体相连,转化大肠杆菌BL21(DE3...
[目的]表达口蹄疫病毒结构蛋白VP1,并对其进行纯化和相关活性的检测。[方法]以A型口蹄疫病毒结构蛋白VP1重组质粒pGEM-VP1为模板,用特异性表达引物扩增其编码区,经酶切后与pGEX-4T-1、pPROExHTb等原核表达载体相连,转化大肠杆菌BL21(DE3)pLysS表达菌株,经IPTG诱导表达,以实现VP1蛋白的表达,SDS-PAGE鉴定融合蛋白的表达并对2种载体重组菌进行超声裂解,取上清和沉淀电泳,用金属螯合亲合层析法对His-VP1进行纯化。[结果]SDS-PAGE电泳分析显示pPRO-VP1诱导后目的条带为33ku,与预期结果相符;目的蛋白纯化后,在电泳图片上显示较为清晰的单一条带;His-VP1可与A型口蹄疫病毒豚鼠灭活阳性血清发生特异性的反应。[结论]表达及纯化了具有高特异性的A型口蹄疫病毒结构蛋白VP1,为深入研究结构蛋白VP1在口蹄疫病毒致病机制中的作用奠定了基础。
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关键词
A型口蹄疫病毒
结构蛋白VP1
表达及纯化
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题名
A型口蹄疫病毒结构蛋白VP1的表达·纯化及活性检测
被引量：
4
1
作者
李菁
林彤
高闪电
丛国正
独军政
邵军军
常惠芸
机构
中国农业科学院
兰州
兽医
研究所
国家
口蹄疫参考
实验室
中国农业科学院
兰州
兽医
研究所
农业
部畜禽病毒学
重点
开放实验室
中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疾病病原生物学国家重点开放实验室
出处
《安徽农业科学》
CAS
北大核心
2010年第10期5248-5250,共3页
基金
国家科技支撑计划(2006BAD06A14)
转基因重大专项(2008ZX08011-004)
文摘
[目的]表达口蹄疫病毒结构蛋白VP1,并对其进行纯化和相关活性的检测。[方法]以A型口蹄疫病毒结构蛋白VP1重组质粒pGEM-VP1为模板,用特异性表达引物扩增其编码区,经酶切后与pGEX-4T-1、pPROExHTb等原核表达载体相连,转化大肠杆菌BL21(DE3)pLysS表达菌株,经IPTG诱导表达,以实现VP1蛋白的表达,SDS-PAGE鉴定融合蛋白的表达并对2种载体重组菌进行超声裂解,取上清和沉淀电泳,用金属螯合亲合层析法对His-VP1进行纯化。[结果]SDS-PAGE电泳分析显示pPRO-VP1诱导后目的条带为33ku,与预期结果相符;目的蛋白纯化后,在电泳图片上显示较为清晰的单一条带;His-VP1可与A型口蹄疫病毒豚鼠灭活阳性血清发生特异性的反应。[结论]表达及纯化了具有高特异性的A型口蹄疫病毒结构蛋白VP1,为深入研究结构蛋白VP1在口蹄疫病毒致病机制中的作用奠定了基础。
关键词
A型口蹄疫病毒
结构蛋白VP1
表达及纯化
Keywords
A-type FMDV
Structural protein VP1
Expression and purification
分类号
S852.65 [农业科学—基础兽医学]
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作者
出处
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被引量
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1
A型口蹄疫病毒结构蛋白VP1的表达·纯化及活性检测
李菁
林彤
高闪电
丛国正
独军政
邵军军
常惠芸
《安徽农业科学》
CAS
北大核心
2010
4
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