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布鲁菌外膜蛋白OMP10表达及其抗原性的研究
被引量:
10
1
作者
宫晓炜
周继章
《动物医学进展》
CSCD
北大核心
2009年第12期25-29,共5页
设计1对特异性引物对羊布鲁菌16M总DNA进行外膜蛋白omp10的PCR扩增,得到了一个大小为330bp的目的基因片段(去掉17个氨基酸编码的信号肽),测序证实它与国外报道的羊布鲁菌omp10基因完全一致。将其克隆到表达载体PET-30a中,经酶切、PCR扩...
设计1对特异性引物对羊布鲁菌16M总DNA进行外膜蛋白omp10的PCR扩增,得到了一个大小为330bp的目的基因片段(去掉17个氨基酸编码的信号肽),测序证实它与国外报道的羊布鲁菌omp10基因完全一致。将其克隆到表达载体PET-30a中,经酶切、PCR扩增和测序分析,表明重组表达载体构建成功。将此重组质粒转化入大肠埃希菌BL21(DE3)中,IPTG诱导表达,该基因以包涵体的形式在大肠埃希菌中表达,经过包涵体的变性、复性和亲和层析纯化,成功获得大小为14.2ku的融合蛋白,与理论推测的蛋白分子质量一致;Westernblot和间接ELISA试验证明,纯化之后的OMP10重组蛋白可以被布鲁菌阳性血清识别。
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关键词
布鲁菌
0MPIO重组蛋白
抗原性
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职称材料
布鲁菌病血清学诊断抗原研究进展
被引量:
4
2
作者
宫晓炜
周继章
《动物医学进展》
CSCD
2008年第12期48-51,共4页
布鲁菌病的临床特征复杂而多变,病原的流行特点和免疫原性存在较大的差异,给人类及动物布鲁菌病诊断带了诸多的困难。目前常用的血清学诊断抗原如菌悬液,脂多糖等特异性差,敏感性低,制备涉及活菌的培养,不能广泛的应用,从而使患者和患...
布鲁菌病的临床特征复杂而多变,病原的流行特点和免疫原性存在较大的差异,给人类及动物布鲁菌病诊断带了诸多的困难。目前常用的血清学诊断抗原如菌悬液,脂多糖等特异性差,敏感性低,制备涉及活菌的培养,不能广泛的应用,从而使患者和患畜得不到有效的治疗和预防。随着分子生物学技术的发展,基因重组蛋白可代替传统的抗原,为布鲁菌病的诊断带来了新的契机,文章从以上方面对可用于布鲁菌病诊断的抗原做了综述。
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关键词
布鲁菌病
布鲁菌
血清学诊断
抗原
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职称材料
绵羊肺炎支原体GH3-3株在改良KM2培养基中的增殖情况
被引量:
6
3
作者
许健
储岳峰
+5 位作者
赵萍
高鹏程
贺英
张莹
剡根强
逯忠新
《动物医学进展》
CSCD
北大核心
2011年第11期46-48,共3页
绵羊肺炎支原体GH3-3MoGH3-3株是我国绵羊支原体肺炎灭活疫苗制苗菌株。为研究MoGH3-3株在改良KM2培养基中的生长及繁殖特性,利用活菌计数方法对其在不同培养阶段的生长滴度(颜色变化单位)进行测定,并绘制生长曲线。结果表明,传代稳定的...
绵羊肺炎支原体GH3-3MoGH3-3株是我国绵羊支原体肺炎灭活疫苗制苗菌株。为研究MoGH3-3株在改良KM2培养基中的生长及繁殖特性,利用活菌计数方法对其在不同培养阶段的生长滴度(颜色变化单位)进行测定,并绘制生长曲线。结果表明,传代稳定的MoGH3-3株在改良KM2培养基中培养12h开始进入对数生长期,培养72h进入稳定期,培养120h时进入衰亡期。本研究可为绵羊肺炎支原体培养特性研究和疫苗生产工艺研究提供参考数据。
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关键词
绵羊肺炎支原体
MoGH3-3株
增殖
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职称材料
奶牛衣原体ompA基因的克隆及序列分析
被引量:
1
4
作者
宋竹青
魏彦明
+3 位作者
周继章
曹小安
王光华
邱昌庆
《甘肃农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第3期6-9,15,共5页
以流产奶牛肝组织块内提取的基因组DNA为模板,根据GenBank数据库中的衣原体ompA基因序列设计2对引物,采用套式PCR进行扩增.PCR产物经纯化后连接到pMD18-T载体,转化至大肠杆菌DH5α后,进行序列测定和生物信息学分析.结果表明:ompA基因的...
以流产奶牛肝组织块内提取的基因组DNA为模板,根据GenBank数据库中的衣原体ompA基因序列设计2对引物,采用套式PCR进行扩增.PCR产物经纯化后连接到pMD18-T载体,转化至大肠杆菌DH5α后,进行序列测定和生物信息学分析.结果表明:ompA基因的开放阅读框架全长1 170 bp,编码由389个氨基酸组成的多肽,理论分子质量为41.9 ku,等电点为7.61;SMART分析表明,ompA基因编码的氨基酸中,1-22位氨基酸为信号肽序列,另外还有7个保守的半胱氨酸残基形成二硫键;BLAST同源性分析表明,ompA基因的核苷酸序列与已发表的衣原体ompA序列的同源性均达到了98%以上.
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关键词
奶牛衣原体ompA克隆
序列分析
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职称材料
题名
布鲁菌外膜蛋白OMP10表达及其抗原性的研究
被引量:
10
1
作者
宫晓炜
周继章
机构
中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部草食动物疫病重点开放实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室
出处
《动物医学进展》
CSCD
北大核心
2009年第12期25-29,共5页
基金
家畜疫病病原生物学国家重点实验室基金
文摘
设计1对特异性引物对羊布鲁菌16M总DNA进行外膜蛋白omp10的PCR扩增,得到了一个大小为330bp的目的基因片段(去掉17个氨基酸编码的信号肽),测序证实它与国外报道的羊布鲁菌omp10基因完全一致。将其克隆到表达载体PET-30a中,经酶切、PCR扩增和测序分析,表明重组表达载体构建成功。将此重组质粒转化入大肠埃希菌BL21(DE3)中,IPTG诱导表达,该基因以包涵体的形式在大肠埃希菌中表达,经过包涵体的变性、复性和亲和层析纯化,成功获得大小为14.2ku的融合蛋白,与理论推测的蛋白分子质量一致;Westernblot和间接ELISA试验证明,纯化之后的OMP10重组蛋白可以被布鲁菌阳性血清识别。
关键词
布鲁菌
0MPIO重组蛋白
抗原性
Keywords
Brucella
recombinant OMPIO protein
antigenicity
分类号
S852.614 [农业科学—基础兽医学]
Q786 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
布鲁菌病血清学诊断抗原研究进展
被引量:
4
2
作者
宫晓炜
周继章
机构
中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部草食动物疫病重点开放实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室
出处
《动物医学进展》
CSCD
2008年第12期48-51,共4页
基金
国家支撑计划课题(2006BAD04A05)
文摘
布鲁菌病的临床特征复杂而多变,病原的流行特点和免疫原性存在较大的差异,给人类及动物布鲁菌病诊断带了诸多的困难。目前常用的血清学诊断抗原如菌悬液,脂多糖等特异性差,敏感性低,制备涉及活菌的培养,不能广泛的应用,从而使患者和患畜得不到有效的治疗和预防。随着分子生物学技术的发展,基因重组蛋白可代替传统的抗原,为布鲁菌病的诊断带来了新的契机,文章从以上方面对可用于布鲁菌病诊断的抗原做了综述。
关键词
布鲁菌病
布鲁菌
血清学诊断
抗原
Keywords
Brucellosis
Brucella
serodiagnosis
antigen
分类号
S852.614 [农业科学—基础兽医学]
S852.53 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
绵羊肺炎支原体GH3-3株在改良KM2培养基中的增殖情况
被引量:
6
3
作者
许健
储岳峰
赵萍
高鹏程
贺英
张莹
剡根强
逯忠新
机构
石河子大学
动物
科技
学院
中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部草食动物疫病重点开放实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室
甘肃省
生物
检测工程技术
研究
中心
出处
《动物医学进展》
CSCD
北大核心
2011年第11期46-48,共3页
基金
甘肃省科技支撑计划项目(1011NKCA054)
甘肃省农业生物技术专项(GNSW-2010-09)
+1 种基金
国家科技基础性工作专项(2008FY210200)
国家现代肉羊产业技术体系(CARS-39)
文摘
绵羊肺炎支原体GH3-3MoGH3-3株是我国绵羊支原体肺炎灭活疫苗制苗菌株。为研究MoGH3-3株在改良KM2培养基中的生长及繁殖特性,利用活菌计数方法对其在不同培养阶段的生长滴度(颜色变化单位)进行测定,并绘制生长曲线。结果表明,传代稳定的MoGH3-3株在改良KM2培养基中培养12h开始进入对数生长期,培养72h进入稳定期,培养120h时进入衰亡期。本研究可为绵羊肺炎支原体培养特性研究和疫苗生产工艺研究提供参考数据。
关键词
绵羊肺炎支原体
MoGH3-3株
增殖
Keywords
Mycoplasma ovipneumoniae(Mo)
MoGH3-3 strain
prolieration
分类号
S852.62 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
奶牛衣原体ompA基因的克隆及序列分析
被引量:
1
4
作者
宋竹青
魏彦明
周继章
曹小安
王光华
邱昌庆
机构
甘肃
农业
大学
动物
医
学院
中国农业科学院
兰州
兽医
研究所
家畜
疫病
病原
生物学
国家
重点
实验室
农业部
草食动物
疫病
重点
开放
实验
农业部
兽医
公共
卫生
重点
开放实验室
中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部草食动物疫病重点开放实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室
出处
《甘肃农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第3期6-9,15,共5页
基金
国家科技支撑计划项目(2006BAD04A05)
国家科技基础性工作专项(2008FY210200)
文摘
以流产奶牛肝组织块内提取的基因组DNA为模板,根据GenBank数据库中的衣原体ompA基因序列设计2对引物,采用套式PCR进行扩增.PCR产物经纯化后连接到pMD18-T载体,转化至大肠杆菌DH5α后,进行序列测定和生物信息学分析.结果表明:ompA基因的开放阅读框架全长1 170 bp,编码由389个氨基酸组成的多肽,理论分子质量为41.9 ku,等电点为7.61;SMART分析表明,ompA基因编码的氨基酸中,1-22位氨基酸为信号肽序列,另外还有7个保守的半胱氨酸残基形成二硫键;BLAST同源性分析表明,ompA基因的核苷酸序列与已发表的衣原体ompA序列的同源性均达到了98%以上.
关键词
奶牛衣原体ompA克隆
序列分析
Keywords
bovine Chlamydophila
ompA gene
clone
sequence analysis
分类号
S858.23 [农业科学—临床兽医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
布鲁菌外膜蛋白OMP10表达及其抗原性的研究
宫晓炜
周继章
《动物医学进展》
CSCD
北大核心
2009
10
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
布鲁菌病血清学诊断抗原研究进展
宫晓炜
周继章
《动物医学进展》
CSCD
2008
4
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
绵羊肺炎支原体GH3-3株在改良KM2培养基中的增殖情况
许健
储岳峰
赵萍
高鹏程
贺英
张莹
剡根强
逯忠新
《动物医学进展》
CSCD
北大核心
2011
6
在线阅读
下载PDF
职称材料
4
奶牛衣原体ompA基因的克隆及序列分析
宋竹青
魏彦明
周继章
曹小安
王光华
邱昌庆
《甘肃农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009
1
在线阅读
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职称材料
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