狂犬病病毒分子生物学研究进展 被引量：10

1

作者 鞠美芳 殷相平 +1 位作者 焦文强 柳纪省 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2012年第2期159-163,共5页

狂犬病是一种感染中枢神经系统的烈性人兽共患传染病,所有温血动物均可感染,一旦发病目前无有效方法治疗,病死率几乎100%。狂犬病病毒基因组编码的5种结构蛋白在病毒转录和复制中发挥重要作用,其抗原性及基因序列可作为病毒分型的重要依... 狂犬病是一种感染中枢神经系统的烈性人兽共患传染病,所有温血动物均可感染,一旦发病目前无有效方法治疗,病死率几乎100%。狂犬病病毒基因组编码的5种结构蛋白在病毒转录和复制中发挥重要作用,其抗原性及基因序列可作为病毒分型的重要依据,文章对其特点作一综述。 展开更多

关键词 狂犬病 狂犬病病毒 结构蛋白

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中国部分地区绵羊肺炎支原体的基因多态性分析 被引量：11

2

作者 许健 储岳峰 +4 位作者 赵萍 高鹏程 贺英 剡根强 逯忠新 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第9期1295-1301,共7页

为了解绵羊肺炎支原体(Mycoplasma ovipneumoniae,Mo)在我国部分地区的流行病学特征,采用随机扩增多态性DNA(RAPD)及限制性片段长度多态性(RFLP)方法对26株Mo基因多态性进行了研究,并利用NTsys-2.10e软件对获得的多态性图谱进行了聚类... 为了解绵羊肺炎支原体(Mycoplasma ovipneumoniae,Mo)在我国部分地区的流行病学特征,采用随机扩增多态性DNA(RAPD)及限制性片段长度多态性(RFLP)方法对26株Mo基因多态性进行了研究,并利用NTsys-2.10e软件对获得的多态性图谱进行了聚类分析。结果在相似系数为0.70时,26株Mo可分成6个RAPD群或6个RFLP群;相似系数为0.90时,分成18个RAPD群或18个RFLP群;相似系数为1.00时,分成25个RAPD群或26个RFLP群。结果表明,我国Mo存在高度的基因多态性,这种多态性与地域差异相关,与宿主来源也具有一定的相关性。研究结果为了解我国Mo的分子流行病学特征打下了基础,也为建立有效的Mo诊断方法和疫苗研制提供了参考依据。 展开更多

关键词 绵羊肺炎支原体 随机扩增多态性DNA 限制性片段长度多态性 基因多态性 流行病学

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山羊支原体山羊肺炎亚种湖北株的鉴定及其外膜蛋白的免疫原性研究 被引量：12

3

作者 赵萍 郭晗 +3 位作者 贺英 高鹏程 张念章 逯忠新 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期593-599,共7页

从湖北某地山羊肺脏中分离支原体,经多次克隆纯化后进行生化试验、显微镜观察、PCR及酶切分析、基因特征鉴定以及用动物致病性试验对该菌株进行了鉴定,命名为GH2,进一步通过免疫印迹对GH2株外膜蛋白及GH2株全菌蛋白免疫原性进行分析,并... 从湖北某地山羊肺脏中分离支原体,经多次克隆纯化后进行生化试验、显微镜观察、PCR及酶切分析、基因特征鉴定以及用动物致病性试验对该菌株进行了鉴定,命名为GH2,进一步通过免疫印迹对GH2株外膜蛋白及GH2株全菌蛋白免疫原性进行分析,并用抗Y98血清和抗PG3血清进行比较,筛选GH2株特异性的外膜蛋白,结果表明GH2株为山羊支原体山羊肺炎亚种,存在于GH2外膜蛋白中的相对分子质量大约为60和49.7ku的蛋白可能是其主要的免疫原性蛋白,也是GH2株区别于丝状支原体山羊亚种标准株PG3和绵羊肺炎支原体标准株的主要特异性抗原。这一结果为山羊支原体山羊肺炎亚种的诊断和疫苗研制提供了良好的理论基础。 展开更多

关键词 山羊支原体山羊肺炎亚种 鉴定 外膜蛋白 免疫原性

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结核分枝杆菌耐药机制与检测技术研究进展 被引量：8

4

作者 刘永安 李学瑞 刘永生 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2017年第6期1884-1889,共6页

近年来耐药结核分枝杆菌的不断出现给结核病的治疗带来前所未有的压力。研究发现,不但牛型分枝杆菌可感染人,人型结核分枝杆菌也可感染牛,这也给养牛业的发展带来了威胁与挑战。如何建立快速、简便、敏感性强、特异性好、价格低廉的耐... 近年来耐药结核分枝杆菌的不断出现给结核病的治疗带来前所未有的压力。研究发现,不但牛型分枝杆菌可感染人,人型结核分枝杆菌也可感染牛,这也给养牛业的发展带来了威胁与挑战。如何建立快速、简便、敏感性强、特异性好、价格低廉的耐药性检测方法是控制该病蔓延的关键。作者阐述了常用药物异烟肼、利福平、链霉素、乙胺丁醇、吡嗪酰胺等的作用机制及传统分枝杆菌耐药性检测方法(荧光素酶系统、显微镜观察药敏检测技术(MODS)、比例法、Bactec MGIT 960系统)和以分子生物学为基础的分枝杆菌耐药性检测方法(单链探针反向杂交试验(LiPA)、Gene Xpert全自动检测系统、PCR-单链构象多态性分析(PCR-SSCP)、PCR-限制性片段长度多态性分析(PCR-RFLP)、DNA测序、基因芯片技术)的研究进展,以期为进一步的研究与应用提供参考。 展开更多

关键词 结核分枝杆菌 耐药性检测 耐药机制

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产气荚膜梭菌ε毒素及其疫苗研究进展 被引量：5

5

作者 王光华 黄生莲 +1 位作者 周继章 邱昌庆 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2009年第5期73-75,共3页

产气荚膜梭菌病是由产气荚膜梭菌引起的一种重要的人兽共患传染病,可导致山羊、绵羊等动物的肠毒血症或坏死性肠炎,并且可引起动物脑、心、肺和肾组织的水肿。B型和D型产气荚膜梭菌所产生的ε毒素是引起动物上述病理变化和死亡的重要因... 产气荚膜梭菌病是由产气荚膜梭菌引起的一种重要的人兽共患传染病,可导致山羊、绵羊等动物的肠毒血症或坏死性肠炎,并且可引起动物脑、心、肺和肾组织的水肿。B型和D型产气荚膜梭菌所产生的ε毒素是引起动物上述病理变化和死亡的重要因素之一。虽然甲醛灭活的毒素疫苗能对动物产生保护性抗体,但是,灭活苗潜在的安全性原因使其在应用上受到限制。因此,基于ε毒素基因的重组疫苗和弱毒疫苗就成为人们研究的目标。 展开更多

关键词 产气荚膜梭菌 ε毒素 疫苗

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布鲁菌外膜蛋白OMP10表达及其抗原性的研究 被引量：10

6

作者 宫晓炜 周继章 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2009年第12期25-29,共5页

设计1对特异性引物对羊布鲁菌16M总DNA进行外膜蛋白omp10的PCR扩增,得到了一个大小为330bp的目的基因片段(去掉17个氨基酸编码的信号肽),测序证实它与国外报道的羊布鲁菌omp10基因完全一致。将其克隆到表达载体PET-30a中,经酶切、PCR扩... 设计1对特异性引物对羊布鲁菌16M总DNA进行外膜蛋白omp10的PCR扩增,得到了一个大小为330bp的目的基因片段(去掉17个氨基酸编码的信号肽),测序证实它与国外报道的羊布鲁菌omp10基因完全一致。将其克隆到表达载体PET-30a中,经酶切、PCR扩增和测序分析,表明重组表达载体构建成功。将此重组质粒转化入大肠埃希菌BL21(DE3)中,IPTG诱导表达,该基因以包涵体的形式在大肠埃希菌中表达,经过包涵体的变性、复性和亲和层析纯化,成功获得大小为14.2ku的融合蛋白,与理论推测的蛋白分子质量一致;Westernblot和间接ELISA试验证明,纯化之后的OMP10重组蛋白可以被布鲁菌阳性血清识别。 展开更多

关键词 布鲁菌 0MPIO重组蛋白 抗原性

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布鲁菌病血清学诊断抗原研究进展 被引量：4

7

作者 宫晓炜 周继章 《动物医学进展》 CSCD 2008年第12期48-51,共4页

布鲁菌病的临床特征复杂而多变,病原的流行特点和免疫原性存在较大的差异,给人类及动物布鲁菌病诊断带了诸多的困难。目前常用的血清学诊断抗原如菌悬液,脂多糖等特异性差,敏感性低,制备涉及活菌的培养,不能广泛的应用,从而使患者和患... 布鲁菌病的临床特征复杂而多变,病原的流行特点和免疫原性存在较大的差异,给人类及动物布鲁菌病诊断带了诸多的困难。目前常用的血清学诊断抗原如菌悬液,脂多糖等特异性差,敏感性低,制备涉及活菌的培养,不能广泛的应用,从而使患者和患畜得不到有效的治疗和预防。随着分子生物学技术的发展,基因重组蛋白可代替传统的抗原,为布鲁菌病的诊断带来了新的契机,文章从以上方面对可用于布鲁菌病诊断的抗原做了综述。 展开更多

关键词 布鲁菌病 布鲁菌 血清学诊断 抗原

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梅迪-维斯纳病毒研究进展 被引量：1

8

作者 张念章 储岳峰 +3 位作者 赵萍 高鹏程 贺英 逯忠新 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2011年第3期104-107,共4页

梅迪-维斯纳病毒又称绵羊进行性肺炎病毒,是绵羊进行性肺炎的病原,属于逆转录病毒科、慢病毒属。其致病过程与人类免疫缺陷病毒(HIV)相似,因此可以作为HIV感染的动物的研究模型。论文综述了梅迪-维斯纳病毒的病原学,阐述了致病机理、免... 梅迪-维斯纳病毒又称绵羊进行性肺炎病毒,是绵羊进行性肺炎的病原,属于逆转录病毒科、慢病毒属。其致病过程与人类免疫缺陷病毒(HIV)相似,因此可以作为HIV感染的动物的研究模型。论文综述了梅迪-维斯纳病毒的病原学,阐述了致病机理、免疫逃避机理及引起宿主的免疫反应,并对未来的防控研究工作进行展望。 展开更多

关键词 梅迪-维斯纳病毒 病原学 致病机理 免疫学

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牛支原体的分离鉴定及16S rRNA基因序列分析 被引量：13

9

作者 伍晓红 储岳峰 +4 位作者 张轩 赵萍 高鹏程 贺英 逯忠新 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2012年第12期35-37,共3页

为明确甘肃某牛场发生的疑似犊牛支原体肺炎的病原,利用支原体培养基从2份患肺炎的犊牛肺脏病料中分离到2个分离株,分别命名为GT-01和GT-02。通过菌落形态观察、生化试验、特异性PCR鉴定和16SrRNA测序比对对分离株进行鉴定。结果2个分... 为明确甘肃某牛场发生的疑似犊牛支原体肺炎的病原,利用支原体培养基从2份患肺炎的犊牛肺脏病料中分离到2个分离株,分别命名为GT-01和GT-02。通过菌落形态观察、生化试验、特异性PCR鉴定和16SrRNA测序比对对分离株进行鉴定。结果2个分离株在固体培养基上生长的菌落呈典型的"油煎蛋状",不能水解葡萄糖、甘露醇、精氨酸,不消化酪蛋白,PCR能扩增出牛支原体特异的1 911bp目的片段,16SrRNA基因序列与牛支原体国际标准株PG45的同源性分别为99.4%和99.6%。结果表明,2个分离株属于牛支原体。 展开更多

关键词 牛支原体 分离 鉴定 16 S RRNA

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一种山羊支原体山羊肺炎亚种多重抗原肽的小鼠免疫试验 被引量：5

10

作者 赵萍 陈胜利 +4 位作者 郝华芳 李学瑞 贺英 储岳峰 刘永生 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第12期2476-2482,共7页

旨在构建一种由山羊支原体山羊肺炎亚种(Mycoplasma capricolum Subsp.capripneumoniae,Mccp)六个B细胞表位和三个T细胞表位组成的多重抗原肽(multiple antigenic peptide,MAP),将其在大肠杆菌中表达后免疫小鼠,评估其体液免疫和细胞免... 旨在构建一种由山羊支原体山羊肺炎亚种(Mycoplasma capricolum Subsp.capripneumoniae,Mccp)六个B细胞表位和三个T细胞表位组成的多重抗原肽(multiple antigenic peptide,MAP),将其在大肠杆菌中表达后免疫小鼠,评估其体液免疫和细胞免疫。分别用MAP、单个B细胞表位及全菌超破抗原作为抗原,检测免疫小鼠抗体水平,结果显示三种抗原均能和小鼠免疫血清发生很好的反应(P<0.01)。体外代谢抑制试验显示,1∶64倍稀释的免疫小鼠血清可以有效抑制Mccp的生长。淋巴细胞增殖试验显示,当用单个T细胞表位及Mccp超破抗原分别刺激免疫小鼠的淋巴细胞时均产生明显的增殖现象(P<0.01)。细胞因子检测结果显示,免疫小鼠的IFN-γ、TNF-α、IL-1β和IL-10产量明显升高(P<0.001),而IL-12产量明显下降(P<0.001)。数据显示,构建的MAP能够引起小鼠的免疫反应,这一结果为由Mccp引起的山羊传染性胸膜肺炎亚单位疫苗的研制奠定了一定的基础。 展开更多

关键词 免疫反应 小鼠 多重抗原肽 山羊支原体山羊肺炎亚种

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江西省部分猪场副猪嗜血杆菌病血清学调查 被引量：8

11

作者 赵萍 贺英 +2 位作者 储岳峰 高鹏程 逯忠新 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2009年第12期107-109,共3页

为调查江西省副猪嗜血杆菌病的流行情况,采集未进行疫苗免疫接种的11个猪场150份血清,应用间接血凝试验检测其抗体滴度,结果表明本地区副猪嗜血杆菌抗体总阳性率为44%,其中母猪阳性率偏高,说明该省猪场存在一定程度的副猪嗜血杆菌的感染。

关键词 副猪嗜血杆菌 血清学调查 猪场

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绵羊肺炎支原体GH3-3株在改良KM2培养基中的增殖情况 被引量：6

12

作者 许健 储岳峰 +5 位作者 赵萍 高鹏程 贺英 张莹 剡根强 逯忠新 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2011年第11期46-48,共3页

绵羊肺炎支原体GH3-3MoGH3-3株是我国绵羊支原体肺炎灭活疫苗制苗菌株。为研究MoGH3-3株在改良KM2培养基中的生长及繁殖特性,利用活菌计数方法对其在不同培养阶段的生长滴度(颜色变化单位)进行测定,并绘制生长曲线。结果表明,传代稳定的... 绵羊肺炎支原体GH3-3MoGH3-3株是我国绵羊支原体肺炎灭活疫苗制苗菌株。为研究MoGH3-3株在改良KM2培养基中的生长及繁殖特性,利用活菌计数方法对其在不同培养阶段的生长滴度(颜色变化单位)进行测定,并绘制生长曲线。结果表明,传代稳定的MoGH3-3株在改良KM2培养基中培养12h开始进入对数生长期,培养72h进入稳定期,培养120h时进入衰亡期。本研究可为绵羊肺炎支原体培养特性研究和疫苗生产工艺研究提供参考数据。 展开更多

关键词 绵羊肺炎支原体 MoGH3-3株 增殖

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青海省山羊支原体山羊肺炎亚种抗体检测 被引量：5

13

作者 赵萍 贺英 +4 位作者 储岳峰 高鹏程 张念章 赵海燕 逯忠新 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2010年第35期20096-20096,20107,共2页

[目的]调查山羊传染性胸膜肺炎在青海省的流行状况。[方法]利用山羊支原体山羊肺炎亚种抗体检测间接血凝试剂盒对青海各地区的208份山羊血清进行检测。[结果]山羊血清阳性率为16.3%,不同地区山羊的阳性率范围为6.7%～24.3%。[结论]青海... [目的]调查山羊传染性胸膜肺炎在青海省的流行状况。[方法]利用山羊支原体山羊肺炎亚种抗体检测间接血凝试剂盒对青海各地区的208份山羊血清进行检测。[结果]山羊血清阳性率为16.3%,不同地区山羊的阳性率范围为6.7%～24.3%。[结论]青海地区的山羊支原体山羊肺炎亚种的感染率较高,应该加强对该病的防控。 展开更多

关键词 山羊支原体山羊肺炎亚种 抗体检测 青海省

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奶牛衣原体ompA基因的克隆及序列分析 被引量：1

14

作者 宋竹青 魏彦明 +3 位作者 周继章 曹小安 王光华 邱昌庆 《甘肃农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期6-9,15,共5页

以流产奶牛肝组织块内提取的基因组DNA为模板,根据GenBank数据库中的衣原体ompA基因序列设计2对引物,采用套式PCR进行扩增.PCR产物经纯化后连接到pMD18-T载体,转化至大肠杆菌DH5α后,进行序列测定和生物信息学分析.结果表明:ompA基因的... 以流产奶牛肝组织块内提取的基因组DNA为模板,根据GenBank数据库中的衣原体ompA基因序列设计2对引物,采用套式PCR进行扩增.PCR产物经纯化后连接到pMD18-T载体,转化至大肠杆菌DH5α后,进行序列测定和生物信息学分析.结果表明:ompA基因的开放阅读框架全长1 170 bp,编码由389个氨基酸组成的多肽,理论分子质量为41.9 ku,等电点为7.61;SMART分析表明,ompA基因编码的氨基酸中,1-22位氨基酸为信号肽序列,另外还有7个保守的半胱氨酸残基形成二硫键;BLAST同源性分析表明,ompA基因的核苷酸序列与已发表的衣原体ompA序列的同源性均达到了98%以上. 展开更多

关键词 奶牛衣原体ompA克隆 序列分析

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屎肠球菌新序列型ST989菌株的分离鉴定及多重耐药性分析 被引量：1

15

作者 张芬芬 李学瑞 杨建设 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2015年第5期1274-1282,共9页

试验从青海民和县某羊场致病性感染半月龄羔羊中分离出革兰氏阳性菌，感染羔羊临床症状有精神萎靡，采食减少，发病1～2h后死亡。两只濒死羔羊剖检结果发现，其中一只出现肝脏肿大及肝包膜脱落，其余脏器无明显病理变化；另一只各脏器... 试验从青海民和县某羊场致病性感染半月龄羔羊中分离出革兰氏阳性菌，感染羔羊临床症状有精神萎靡，采食减少，发病1～2h后死亡。两只濒死羔羊剖检结果发现，其中一只出现肝脏肿大及肝包膜脱落，其余脏器无明显病理变化；另一只各脏器均未发现病理变化。分离病料，革兰氏染色发现，从病料中分离到的细菌均为革兰氏阳性球菌。对分离菌株进行Tuf基因PCR扩增。BLASTn比对结果显示与屎肠球菌AUS0085核苷酸序列相似性为99．8％，据此初步确定这些菌株为屎肠球菌。药敏试验结果表明，这些菌株可分为两类，第1类对p内酰胺类、氨基糖苷类、大环内酯类、四环素类、喹诺酮类、利福霉素类抗生素及林可霉素和克林霉素耐药，对氯霉素和万古霉素敏感；第2类对β-内酰胺类、氨基糖苷类、四环素类、喹诺酮类、利福霉素类抗生素耐药，对红霉素和罗红霉素中度耐药，但对克拉霉素、阿奇霉素、克林霉素、林可霉素、氯霉素和万古霉素敏感。对第1类耐药性代表菌株lby1和第2类耐药性代表菌株lbg3进行多位点序列分析（MLsT），结果发现这些菌株为一个屎肠球菌的新序列型，为ST989。系统进化树结果显示屎肠球菌lbg3与屎肠球菌ST468亲缘关系最近，致病力试验结果表明屎肠球菌lby1和lbg3均具有致病性。 展开更多

关键词 羔羊 致死性感染 多重耐药屎肠球菌 致病性

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青海地区丝状支原体山羊亚种的流行病学调查 被引量：1

16

作者 韩赟 郭晗 逯忠新 《中国动物检疫》 CAS 2010年第5期41-42,共2页

为弄清楚丝状支原体山羊亚种在青海省地区的流行状况,笔者利用丝状支原体山羊亚种抗体检测正向间接血凝试剂盒对2007至2009年采自青海各地区的1200份山羊血清进行了检测。结果显示,平均阳性率为16.08%。不同地区山羊血清的阳性率从5%-20... 为弄清楚丝状支原体山羊亚种在青海省地区的流行状况,笔者利用丝状支原体山羊亚种抗体检测正向间接血凝试剂盒对2007至2009年采自青海各地区的1200份山羊血清进行了检测。结果显示,平均阳性率为16.08%。不同地区山羊血清的阳性率从5%-20.9%不等。从季节上看,冬春季节发病率要高于夏秋季节。结果提示青海地区的丝状支原体山羊亚种的感染率偏高,应该加强对由丝状支原体山羊亚种的防控。 展开更多

关键词 丝状支原体山羊亚种 抗体检测 血清学调查 青海省

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青海地区丝状支原体山羊亚种的流行病学调查 被引量：2

17

作者 韩赟 郭晗 逯忠新 《现代农业科技》 2010年第2期325-325,327,共2页

为了解丝状支原体山羊亚种在青海地区的流行状况,利用丝状支原体山羊亚种抗体检测正向间接血凝试剂盒对2007～2009年采自青海各地区的1 200份山羊血清进行检测。结果显示:不同地区山羊血清的阳性率从5.0%～21.0%不等,平均阳性率为16.1%... 为了解丝状支原体山羊亚种在青海地区的流行状况,利用丝状支原体山羊亚种抗体检测正向间接血凝试剂盒对2007～2009年采自青海各地区的1 200份山羊血清进行检测。结果显示:不同地区山羊血清的阳性率从5.0%～21.0%不等,平均阳性率为16.1%。从季节上看,冬春季节发病率要高于夏秋季节。青海地区的丝状支原体山羊亚种的感染率偏高,应该加强对由丝状支原体山羊亚种的防控。 展开更多

关键词 丝状支原体山羊亚种 抗体检测 血清学调查 青海地区

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