猪戊型肝炎病毒分子生物学与流行病学研究进展 被引量：7

1

作者 郝宝成 兰喜 +4 位作者 刑小勇 项海涛 胡永浩 柳纪省 梁剑平 《中国动物传染病学报》 CAS 2010年第5期67-73,共7页

戊型肝炎病毒(Hepatitis E virus,HEV)是20世纪80年代发现的又一新型肝炎病毒,近年来对戊型肝炎病毒病原学、流行病学、实验室诊断、基因结构等方面研究取得了重大进展,本文就HEV的形态、基因分型、分子生物学特性、戊型肝炎(Hepatitis ... 戊型肝炎病毒(Hepatitis E virus,HEV)是20世纪80年代发现的又一新型肝炎病毒,近年来对戊型肝炎病毒病原学、流行病学、实验室诊断、基因结构等方面研究取得了重大进展,本文就HEV的形态、基因分型、分子生物学特性、戊型肝炎(Hepatitis E,HE)的流行病学特点作一简要概述。 展开更多

关键词 戊型肝炎病毒 形态 基因分型 分子生物学特性 流行病学

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猪繁殖与呼吸综合征病毒分子生物学研究进展 被引量：6

2

作者 李国娟 田永强 +2 位作者 李建强 李宝玉 柳纪省 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第12期37-41,共5页

猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)是严重危害养猪业的病原,对PRRSV的分子生物学研究进展进行了综述,主要包括PRRSV的基因组结构、病毒的非结构蛋白和结构蛋白及其功能、致病机理及复制与转录等。

关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒分子生物学研究进展

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表达狂犬病毒糖蛋白和核蛋白的重组腺病毒的生物学特性及免疫研究 被引量：1

3

作者 殷相平 李志勇 +5 位作者 李江涛 李宝玉 兰喜 杨彬 李学瑞 柳纪省 《甘肃农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期19-24,共6页

对狂犬病毒G+N双基因复制缺陷型腺病毒穿梭载体进行转染,以获得融合表过狂犬病毒糖蛋白和核蛋白重组腺病毒,并对其进行生物学特性和免疫学研究.结果表明:将含有狂犬病毒G+N的重组穿梭质粒pAdTrack-CMV/G+N与腺病毒骨架载体pAdEasy-1在... 对狂犬病毒G+N双基因复制缺陷型腺病毒穿梭载体进行转染,以获得融合表过狂犬病毒糖蛋白和核蛋白重组腺病毒,并对其进行生物学特性和免疫学研究.结果表明:将含有狂犬病毒G+N的重组穿梭质粒pAdTrack-CMV/G+N与腺病毒骨架载体pAdEasy-1在大肠杆菌细胞内同源重组,可获得带有目的基因的重组腺病毒载体pAd/G+N,经PacI酶切后转染HEK-293细胞,可获得带有目的基因的重组腺病毒.重组腺病毒在HEK-293细胞中连续传代15代次后,在细胞内的病变时间缩短为20 h以内.经测定,重组腺病毒对HEK-293细胞的TCID50为10-8.0.mL-1,用RT-PCR法可检测到狂犬病毒糖蛋白和核蛋白基因片段;重组腺病毒经口服免疫小白鼠,对狂犬病毒CVS毒株的免疫保护率可达80%. 展开更多

关键词 狂犬病毒 重组腺病毒 生物学特性 免疫

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口蹄疫病毒抗原保护剂的筛选和优化

4

作者 李正丰 王永录 +12 位作者 张永光 方玉珍 蒋守田 潘丽 刘力宽 吕建亮 张淑刚 杜进鑫 张昱 张中旺 周鹏 陈启伟 王刚 《浙江农业科学》 2009年第5期1016-1020,共5页

用三因素、三水平、双重复正交试验筛选出对口蹄疫病毒(FMDV)抗原保护效果较好的4号保护剂配方,该保护剂保存的病毒在37℃静置40 h和50 h后毒价TCID50分别为4.5和2.0,而对照组病毒则分别降至1.5和0。通过方差分析4号保护剂保存病毒测得T... 用三因素、三水平、双重复正交试验筛选出对口蹄疫病毒(FMDV)抗原保护效果较好的4号保护剂配方,该保护剂保存的病毒在37℃静置40 h和50 h后毒价TCID50分别为4.5和2.0,而对照组病毒则分别降至1.5和0。通过方差分析4号保护剂保存病毒测得TCID50极显著的高于1、3、5、6、7、8号,显著高于2、9号。保护剂配方优化试验结果表明,加该保护剂的病毒,分别于-20℃和4℃下保存90 d、120 d、150 d,其?TCID50分别为6.0、6.0、5.8和5.3、5.0、4.5,而未加保护剂的对照病毒则为5.8、5.3、5.0和5.0、4.5、4.3;FMDV 146 s抗原含量测定结果表明,分别于-20℃和4℃下保存150 d,37℃下保存40 h,测得结果分别为1.116μg.mL-1、0.896μg.mL-1、0.888μg.mL-1,而未加保护剂的对照病毒则为0.846μg.mL-1、0.802μg.mL-1、0.307μg.mL-1;反复冻融试验表明对照组冻融6次即为临界点,病毒保护剂组达10次;通过对主要保护性抗原VP1基因,试验病毒株(O/NX/99/1)、对照病毒株(O/NX/99/2)测序比对,结果表明保护剂不会使病毒产生基因突变。试验结果说明该保护剂对FMDV有效抗原确实有较好的保护作用。 展开更多

关键词 口蹄疫病毒 抗原 保护剂 筛选 优化

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环介导等温扩增技术原理及其在检测诊断病原微生物中的应用 被引量：12

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作者 焦文强 殷相平 柳纪省 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第9期50-53,共4页

环介导等温扩增技术（loop-mediated isothermal amplification,LAMP）是近年来发展出来的一种核酸扩增技术。通过设计识别目的片段6个序列的4个特异引物,整个反应可以在恒温（60-65℃）条件下1 h内完成,由于采用4个引物,与传统的核酸... 环介导等温扩增技术（loop-mediated isothermal amplification,LAMP）是近年来发展出来的一种核酸扩增技术。通过设计识别目的片段6个序列的4个特异引物,整个反应可以在恒温（60-65℃）条件下1 h内完成,由于采用4个引物,与传统的核酸扩增技术相比,它具有敏感、特异的特点;且产物中有大量的副产物——白色焦磷酸镁沉淀,扩增产物可通过肉眼观察或浊度计即可判定结果;反应不需要精密控温设备和高级复杂的分析仪器,对操作人员的熟练度和专业水平要求不高,因此该方法特别适合基层或者实验条件较差的试验室进行病原微生物的快速检测。就其原理及其在病原微生物的检测中的应用做一综述。 展开更多

关键词 环介导等温扩增 原理 应用

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狂犬病病毒CVS株糖蛋白、核蛋白生物信息学分析 被引量：5

6

作者 李江涛 殷相平 +2 位作者 张金卫 丁农 柳纪省 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第7期179-184,共6页

对狂犬病毒(rabies virus,RV)CVS株糖蛋白、核蛋白基因进行了克隆与测序,推导出相应的氨基酸序列。后采用Gamier-Robson方法和Chou-Fasman方法预测了蛋白的二级结构,用Kyte-Doolittle方法对蛋白的亲水性进行了分析,用Emi-ni方法预测了... 对狂犬病毒(rabies virus,RV)CVS株糖蛋白、核蛋白基因进行了克隆与测序,推导出相应的氨基酸序列。后采用Gamier-Robson方法和Chou-Fasman方法预测了蛋白的二级结构,用Kyte-Doolittle方法对蛋白的亲水性进行了分析,用Emi-ni方法预测了蛋白的表面可能性,以Jameson-Wolf方法预测了蛋白的抗原指数;综合分析预测蛋白的B细胞抗原表位。结果表明,糖蛋白在序列的121-126、133-137、161-165、191-193、201-204、214-216、221-225、264-267区域,核蛋白在序列的143-152、166-172、263-273、411-427区域或其附近最有可能是B细胞抗原表位的优势区域。 展开更多

关键词 狂犬病毒 糖蛋白 核蛋白 二级结构 B细胞表位

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猪戊型肝炎病毒swCH-GS189株ORF2基因的克隆及序列分析 被引量：4

7

作者 郝宝成 兰喜 +1 位作者 柳纪省 胡永浩 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期122-126,共5页

为进行猪戊型肝炎病毒(HEV)ORF2基因特征研究,参照GenBank中已发表的戊型肝炎病毒(HEV)核酸序列,设计了一对扩增HEVORF2基因的引物,利用RT-PCR等方法克隆出了一株猪戊型肝炎病毒甘肃分离株GS189的ORF2基因cDNA片段。序列测定结果表明,sw... 为进行猪戊型肝炎病毒(HEV)ORF2基因特征研究,参照GenBank中已发表的戊型肝炎病毒(HEV)核酸序列,设计了一对扩增HEVORF2基因的引物,利用RT-PCR等方法克隆出了一株猪戊型肝炎病毒甘肃分离株GS189的ORF2基因cDNA片段。序列测定结果表明,swCH-GS189株的ORF2基因长2 025 bp,编码674个氨基酸,与GenBank中公布的其它毒株间的核苷酸序列同源性为79.1%～91.8%,推导的氨基酸序列同源性为89.5%～98.8%。系统发育进化树结果表明,该分离株为基因Ⅳ型。 展开更多

关键词 戊型肝炎病毒 ORF2基因 克隆 序列分析

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猪流感的诊断技术研究进展 被引量：3

8

作者 李国娟 柳纪省 +1 位作者 李宝玉 田永强 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期75-79,共5页

猪流感是由猪流感病毒引起的一种猪的急性、高度接触性呼吸道传染病,不仅给畜禽养殖造成重大经济损失,而且还对人类健康造成威胁,因此快速、敏感、准确诊断猪流感,具有重要的经济价值和公共卫生意义。从传统的实验室诊断技术和分子生物... 猪流感是由猪流感病毒引起的一种猪的急性、高度接触性呼吸道传染病,不仅给畜禽养殖造成重大经济损失,而且还对人类健康造成威胁,因此快速、敏感、准确诊断猪流感,具有重要的经济价值和公共卫生意义。从传统的实验室诊断技术和分子生物学诊断技术两方面综合阐述了猪流感的诊断研究进展。 展开更多

关键词 猪流感 诊断技术 研究进展

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保护剂及其在口蹄疫疫苗中的研究进展 被引量：3

9

作者 李正丰 王永录 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期6-10,共5页

保护剂在动物疫苗中具有重要的作用,直接影响疫苗的质量。以保护剂为核心介绍了在疫苗保存前病毒抗原和保护剂的准备,保护剂的选用原则,分类、作用机理,着重讨论了保护剂在口蹄疫疫苗中的研究进展以及当前存在的问题,并对其应用前景提... 保护剂在动物疫苗中具有重要的作用,直接影响疫苗的质量。以保护剂为核心介绍了在疫苗保存前病毒抗原和保护剂的准备,保护剂的选用原则,分类、作用机理,着重讨论了保护剂在口蹄疫疫苗中的研究进展以及当前存在的问题,并对其应用前景提出展望。 展开更多

关键词 保护剂 口蹄疫疫苗 研究进展

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假基因的发现与研究

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作者 徐娜 李宝玉 柳纪省 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第12期27-29,36,共4页

随着人类基因组计划的顺利实施,人们分离、鉴定新基因的速度越来越快,对于占人类基因组97%的非表达序列的研究,即对所谓"垃圾"DNA的研究已成为全球范围内关注的热点。现就假基因的发现、命名和分类、特性和分布、产生、作用... 随着人类基因组计划的顺利实施,人们分离、鉴定新基因的速度越来越快,对于占人类基因组97%的非表达序列的研究,即对所谓"垃圾"DNA的研究已成为全球范围内关注的热点。现就假基因的发现、命名和分类、特性和分布、产生、作用机理、功能、进化及展望等方面进行论述。 展开更多

关键词 假基因 分类 特性与分布 产生 作用机理 功能与进化

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截短的猪繁殖与呼吸综合征ORF5基因及重组蛋白的原核表达 被引量：3

11

作者 李国娟 柳纪省 +2 位作者 李宝玉 娄忠子 田永强 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期131-134,共4页

通过PCR方法从重组质粒pGEM-ORF5扩增得到缺失N端疏水序列的基因片段dORF5(deleting ORF5)。将dORF5克隆至原核高效表达载体pGEX-4T-1,在E.coliRosetta细胞中成功表达了重组蛋白GST-dORF5。用Western blotting鉴定表达蛋白,证明dORF5基... 通过PCR方法从重组质粒pGEM-ORF5扩增得到缺失N端疏水序列的基因片段dORF5(deleting ORF5)。将dORF5克隆至原核高效表达载体pGEX-4T-1,在E.coliRosetta细胞中成功表达了重组蛋白GST-dORF5。用Western blotting鉴定表达蛋白,证明dORF5基因得到表达。本试验得到的重组蛋白,为进一步研究PRRS病毒结构蛋白的结构和功能奠定了基础。 展开更多

关键词 猪繁殖与呼吸综合征 ORF5基因 原核表达

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