狮棘球绦虫(Echinococcus felidis)生物学特性研究进展

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作者 刘聪暖 娄忠子 +3 位作者 李立 范彦雷 闫鸿斌 贾万忠 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第8期860-865,874,共7页

本文比较了狮棘球绦虫(Echinococcus felidis)线粒体cox1(细胞色素C氧化酶亚基1)和nad1(烟酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶亚单位1)基因片段序列,核基因编码基因elp(埃兹-根蛋白-膜突蛋白样蛋白)、ef1a(延伸因子1α)、pepck(磷酸烯醇式丙酮酸... 本文比较了狮棘球绦虫(Echinococcus felidis)线粒体cox1(细胞色素C氧化酶亚基1)和nad1(烟酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶亚单位1)基因片段序列,核基因编码基因elp(埃兹-根蛋白-膜突蛋白样蛋白)、ef1a(延伸因子1α)、pepck(磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶)和pold(DNA聚合酶δ)序列,核糖体rRNA基因(ITS1和18SrRNA)序列,以及狮棘球绦虫与其它棘球绦虫之间的DNA序列的差异度,并简述了其吻钩皱褶明显的形态学特征和以独特的狮类为终末宿主的生物学特性。通过对狮棘球绦虫分子遗传标记特征、种地位的确立、种系发生、鉴定方法、宿主范围、地理分布、流行病学特征和未来研究方向的阐述,为从事该领域研究的学者和临床工作者提供了背景知识,并对棘球蚴病的临床流行病学调查和防治工作提供了依据。 展开更多

关键词 狮棘球绦虫 分类学 种系发生 生物学特性 分子遗传标记 流行病学

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棘球属绦虫分子种系发生研究进展 被引量：11

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作者 李立 娄忠子 +4 位作者 闫鸿斌 范彦雷 李建秋 殷宏 贾万忠 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第11期1155-1162,共8页

棘球属绦虫引起的棘球蚴病是一种严重危害人和动物健康的人兽共患寄生虫病。棘球属绦虫分子种系发生分类研究的最新结果表明,其传统的形态学分类需要修正,从原有的5个种增加到9个种。特对棘球属绦虫分子种系发生研究新进展作一综述,为... 棘球属绦虫引起的棘球蚴病是一种严重危害人和动物健康的人兽共患寄生虫病。棘球属绦虫分子种系发生分类研究的最新结果表明,其传统的形态学分类需要修正,从原有的5个种增加到9个种。特对棘球属绦虫分子种系发生研究新进展作一综述,为棘球蚴病的病原生物学鉴定和分类提供参考。 展开更多

关键词 棘球属绦虫 分类学 分子种系发生 进化 流行病学

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带科绦虫线粒体基因组全序列研究进展 被引量：10

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作者 贾万忠 闫鸿斌 +3 位作者 郭爱疆 史万贵 詹芳 付宝权 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期596-600,共5页

关键词 带科绦虫 基因组全序列 线粒体 INFECTIONS 人兽共患寄生虫病 基因组序列分析 棘球蚴病 囊尾蚴病

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CpG DNA重组质粒对猪O型口蹄疫病毒抗原的免疫佐剂效应 被引量：8

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作者 景志忠 蒙学莲 +7 位作者 窦永喜 陈国华 房永祥 黄银君 王超英 刘西兰 张军 才学鹏 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期862-866,共5页

作者应用含CpG基序序列的重组质粒（即CpG DNA）作为免疫佐剂,评价其对猪O型口蹄疫病毒抗原疫苗的免疫增强效果。结果表明：CpG DNA重组质粒与猪口蹄疫灭活病毒抗原疫苗配伍免疫小鼠,CpG DNA重组质粒对小鼠具有较强的免疫佐剂效应,能促... 作者应用含CpG基序序列的重组质粒（即CpG DNA）作为免疫佐剂,评价其对猪O型口蹄疫病毒抗原疫苗的免疫增强效果。结果表明：CpG DNA重组质粒与猪口蹄疫灭活病毒抗原疫苗配伍免疫小鼠,CpG DNA重组质粒对小鼠具有较强的免疫佐剂效应,能促进口蹄疫病毒抗原诱导产生较高水平的特异性抗体,其抗体滴度是空载体疫苗对照的2倍。CpG DNA重组质粒与商品化猪口蹄疫灭活疫苗配伍免疫试验猪,其增强抗原诱导的特异性抗体滴度最高可达标准疫苗的4倍以上,也显著高于空载体疫苗对照 与病毒纯化抗原配伍免疫动物,攻毒后其免疫保护效力的PD50高达13.00,远高于标准疫苗对照（PD504.69）。在CpG DNA重组质粒剂量选择试验中,含低剂量的CpG DNA疫苗（50、200μg.头份-1）都比高剂量组（500μg.头份-1）诱导的抗体滴度高,其中50和200μg.头份-1的CpG DNA剂量,在接种后14~32 d诱导的抗体滴度高达1∶1500,是标准疫苗的4~5倍,而500μg.头份-1剂量诱导的抗体仅是标准疫苗的2倍,说明CpG DNA重组质粒在低剂量时即可发挥强烈的佐剂效应。研究表明CpG DNA对猪O型口蹄疫病毒抗原疫苗有较强的免疫佐剂效应,且使用剂量低,应用前景广阔。 展开更多

关键词 CPGDNA O型口蹄疫病毒 抗原 佐剂效应

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犬科动物棘球绦虫感染检测方法研究进展 被引量：11

5

作者 贾万忠 闫鸿斌 +1 位作者 王玉朝 郭爱疆 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期179-182,共4页

关键词 棘球绦虫 感染检测 动物 人畜共患寄生虫病 犬科 棘球蚴病 畜牧业发展 世界性分布

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甘肃合作猪白细胞抗原经典Ⅱ类分子DR基因克隆及生物信息学分析 被引量：5

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作者 莫斯科 房永祥 +1 位作者 冯海燕 景志忠 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第11期1662-1668,共7页

为了克隆甘肃合作猪白细胞抗原(SLA)DRA和DRB基因,分析SLA-DR基因特性和抗原多态性,首次研究了甘肃合作猪在异种移植等研究领域中的应用前景。应用RT-PCR分别扩增合作猪SLA-DRA和SLA-DRB基因并进行测序,将所获得基因序列登录GenBank(登... 为了克隆甘肃合作猪白细胞抗原(SLA)DRA和DRB基因,分析SLA-DR基因特性和抗原多态性,首次研究了甘肃合作猪在异种移植等研究领域中的应用前景。应用RT-PCR分别扩增合作猪SLA-DRA和SLA-DRB基因并进行测序,将所获得基因序列登录GenBank(登录号分别为FJ905823和FJ9058258),再用NCBI中的BLAST和ExPASy等相关软件进行生物信息学分析。发现在猪-人异种移植中,近亲繁殖的合作猪种在与人类主要组织相容性复合体遗传基因水平相似性方面有一定优势,也可作为备选猪种对相关基因进行必要的修饰和改造。 展开更多

关键词 猪白细胞抗原 合作猪 RT-PCR 生物信息学

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小反刍兽疫病毒血凝素蛋白与受体蛋白SLAM的相互作用 被引量：3

7

作者 蒙学莲 窦永喜 +2 位作者 朱学亮 骆学农 才学鹏 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期426-433,共8页

旨在利用免疫共沉淀技术验证小反刍兽疫病毒血凝素蛋白和受体蛋白SLAM间的相互作用。鉴于截短的H蛋白仍具有正常的与细胞受体结合的能力,分别构建pcDNA3.1-tH真核表达载体和SLAM及其缺失突变体(m1-胞外区、m2-无信号肽胞外区、m3-胞外区... 旨在利用免疫共沉淀技术验证小反刍兽疫病毒血凝素蛋白和受体蛋白SLAM间的相互作用。鉴于截短的H蛋白仍具有正常的与细胞受体结合的能力,分别构建pcDNA3.1-tH真核表达载体和SLAM及其缺失突变体(m1-胞外区、m2-无信号肽胞外区、m3-胞外区N端29-136位氨基酸和m4-胞外区C端137-240位氨基酸)编码基因的pEGFP-N1系列真核表达载体,将测序正确的重组质粒共转染中国仓鼠卵巢细胞CHO-K1细胞株,利用免疫共沉淀技术验证tH蛋白与SLAM蛋白相互作用的关键氨基酸区段。结果表明,成功构建了预期的重组表达载体,转染CHO细胞后目的蛋白正确表达;免疫共沉淀时,tH能与SLAM、m1、m2和m3蛋白发生反应,但没有与m4蛋白发生反应。由此可知,SLAM N端29-136位氨基酸是决定SLAM与PPRV H蛋白结合的关键氨基酸区段,这与麻疹病毒属其他宿主SLAM受体的研究结果一致。 展开更多

关键词 血凝素蛋白 SLAM 转染 免疫共沉淀 相互作用

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人兽共患痘病毒病流行现状及其宿主谱研究进展 被引量：2

8

作者 周涛 贾怀杰 +2 位作者 何小兵 房永祥 景志忠 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期159-163,166,共6页

以天花病毒（Variolavirus，VARV）为代表的痘病毒（Poxvirus）是人类最早认识并深受其害的病毒家族，同时也是严重影响公共卫生安全的重要病原。根据痘病毒的自然宿主、病毒特征以及特异性抗原的差异，可将痘病毒科（Poxviridae）分为... 以天花病毒（Variolavirus，VARV）为代表的痘病毒（Poxvirus）是人类最早认识并深受其害的病毒家族，同时也是严重影响公共卫生安全的重要病原。根据痘病毒的自然宿主、病毒特征以及特异性抗原的差异，可将痘病毒科（Poxviridae）分为两个亚科。 展开更多

关键词 病毒病 流行现状 人兽共患 宿主谱 痘病毒科 公共卫生安全 特异性抗原 天花病毒

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绦虫线粒体基因组学研究进展

9

作者 贾万忠 闫鸿斌 +4 位作者 娄忠子 倪兴维 史万贵 郭爱疆 詹芳 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第11期910-914,共5页

绦虫大约有1 500多种,隶属于扁形动物门（Platyhel-minthes）绦虫纲（Cestoda）,营寄生生活,由成虫及其幼虫（蚴）所致的绦虫病和绦虫蚴病严重危害人和动物的健康。绦虫线粒体基因组有许多独特的特征如基因组很小,基因位置排列相对稳定... 绦虫大约有1 500多种,隶属于扁形动物门（Platyhel-minthes）绦虫纲（Cestoda）,营寄生生活,由成虫及其幼虫（蚴）所致的绦虫病和绦虫蚴病严重危害人和动物的健康。绦虫线粒体基因组有许多独特的特征如基因组很小,基因位置排列相对稳定等,tRNA和两个主要非编码区的二级结构、碱基组成和变异等有也其自身特点,这些特征已经在研究物种分类、基因进化、现有物种进化史等方面得到应用[1-4]。 展开更多

关键词 线粒体基因组 基因组学 绦虫纲 扁形动物门 物种分类 相对稳定 二级结构 非编码区

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猪带绦虫TSOL18特异性单克隆抗体的制备及其体外杀虫作用的研究

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作者 郭爱疆 吴润 +4 位作者 贾万忠 刘斌 闫鸿斌 骆学农 才学鹏 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期208-213,共6页

本研究目的在于制备抗猪带绦虫TSOL18单克隆抗体,并分析单抗对六钩蚴的杀伤作用。采用SephadexG-100纯化在毕赤酵母中表达的猪带绦虫六钩蚴TSOL18蛋白;纯化的蛋白免疫BALB/c小鼠,运用杂交瘤技术建立能分泌抗TSOL18单克隆抗体的细胞株;通... 本研究目的在于制备抗猪带绦虫TSOL18单克隆抗体,并分析单抗对六钩蚴的杀伤作用。采用SephadexG-100纯化在毕赤酵母中表达的猪带绦虫六钩蚴TSOL18蛋白;纯化的蛋白免疫BALB/c小鼠,运用杂交瘤技术建立能分泌抗TSOL18单克隆抗体的细胞株;通过ELISA叠加试验进行mAb的抗原表位分析;采用间接ELISA法测定TSOL18单克隆抗体特异性及腹水效价;采用抗TSOL18单克隆抗体对激活的猪带绦虫六钩蚴进行体外六钩蚴杀伤试验,观察单抗对猪带绦虫六钩蚴活力的影响。结果成功获得12株稳定分泌抗TSOL18单克隆抗体的杂交瘤细胞株,识别2个不同抗原表位,不同抗原表位的2株单克隆抗体腹水效价分别为1×102、1×106。抗体体外六钩蚴杀伤试验结果证明,在有补体的情况下,多抗和单抗作用6 d后,六钩蚴结构模糊,边缘不清晰。表明单抗对六钩蚴有一定的杀伤作用。 展开更多

关键词 猪带绦虫六钩蚴 TSOL18 单抗 体外杀六钩蚴作用

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重组产单核细胞李斯特菌溶血素的应用研究

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作者 赵松波 张少华 +3 位作者 周邦信 窦永喜 孙晓林 骆学农 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2010年第3期105-108,共4页

李氏杆菌溶血素（Listeriolysin,LLO）是产单核细胞李斯特菌的主要毒力因子,为探索LLO的免疫保护性和作为诊断抗原的可行性,本研究用重组LLO抗原和单核细胞增多性李氏杆菌（Listeria monocytogenes,LM）全菌分别免疫BALB/c小鼠和家兔,... 李氏杆菌溶血素（Listeriolysin,LLO）是产单核细胞李斯特菌的主要毒力因子,为探索LLO的免疫保护性和作为诊断抗原的可行性,本研究用重组LLO抗原和单核细胞增多性李氏杆菌（Listeria monocytogenes,LM）全菌分别免疫BALB/c小鼠和家兔,定期采血,ELISA检测抗LLO的抗体水平,并分别对免疫和对照动物攻毒致死剂量的LM,分析重组LLO抗原的免疫保护性。结果表明,小鼠和家兔在二免后10-20 d内LLO的抗体即可达到峰值,而且免疫动物能有效抵抗LM的感染。因此,重组LLO不仅可以用作动物LM的诊断抗原,而且具有作为基因工程疫苗的潜力。 展开更多

关键词 重组LLO蛋白 ELISA 免疫 保护性

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猪带绦虫六钩蚴TSOL18重组蛋白快速诊断试纸条研制 被引量：8

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作者 张少华 骆学农 +5 位作者 郑亚东 李克生 景志忠 蒋韬 赵松波 才学鹏 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第10期968-972,共5页

目的以猪带绦虫六钩蚴重组蛋白(TSOL18)为抗原,建立一种简便快速的猪囊虫抗体检测方法,评价其血清学诊断的价值。方法用胶体金颗粒标记纯化的TSOL18重组蛋白,将兔抗TSOL18-GST-IgG和TSOL18重组抗原分别喷涂于硝酸纤维素膜的质控线和检... 目的以猪带绦虫六钩蚴重组蛋白(TSOL18)为抗原,建立一种简便快速的猪囊虫抗体检测方法,评价其血清学诊断的价值。方法用胶体金颗粒标记纯化的TSOL18重组蛋白,将兔抗TSOL18-GST-IgG和TSOL18重组抗原分别喷涂于硝酸纤维素膜的质控线和检测线上,与PVC垫板等部件按顺序装配成猪囊虫抗体快速检测试纸条;用该试纸条检测猪血清样品测定敏感性和特异性。结果该试纸条与全囊虫抗原ELISA的相对敏感性和特异性分别为75.0%(12/16)和95.2%(40/42),与剖检计数法的相对敏感性达80.0%(12/15)。试纸条在4℃存放12个月,检测结果稳定,重复性好。结论基于TSOL18建立的胶体金免疫层析试纸条操作简单、快速敏感、稳定性好,可用于猪囊虫病感染的诊断和筛查。 展开更多

关键词 猪囊虫病 TSOL18重组蛋白 胶体金 试纸条

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猪Toll样受体7基因的克隆及序列分析 被引量：5

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作者 段凤云 房永祥 +3 位作者 陈国华 王生富 何延华 景志忠 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期599-601,共3页

目的:研究猪TLR7基因的分子结构与功能。方法:用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增技术,从猪脾脏淋巴细胞中克隆猪Toll样受体7基因(pTLR7),利用生物信息学技术预测其结构与功能。结果:基因序列分析表明,克隆的pTLR7基因为3153bp,编码1... 目的:研究猪TLR7基因的分子结构与功能。方法:用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增技术,从猪脾脏淋巴细胞中克隆猪Toll样受体7基因(pTLR7),利用生物信息学技术预测其结构与功能。结果:基因序列分析表明,克隆的pTLR7基因为3153bp,编码1050个氨基酸,富含16.2%的亮氨酸;同源性分析显示,与GenBank上登载的猪TLR7参考序列(DQ333222)的同源性为98.8%,与牛和绵羊的同源性较高,与马、狗、人、家鼠、褐鼠的次之,其遗传演化关系与亲缘关系密切;推导氨基酸的分子结构预测表明,该分子属于I型跨膜受体,由胞外区(588个氨基酸)、跨膜区(23个氨基酸)和胞内区(174个氨基酸)组成,有信号肽序列、富含亮氨酸的重复序列(LRR)和Toll/IL-1R同源区结构域。结论:成功克隆了猪TLR7基因,预测分析证实具有典型的TLR家族结构特征,这为进一步研究其参与病原分子模式识别和信号传导奠定了基础。 展开更多

关键词 猪Toll样受体7 分子克隆 序列分析 结构预测

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正痘病毒干扰宿主免疫应答的分子及其作用途径 被引量：3

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作者 景志忠 贾怀杰 +1 位作者 周涛 何小兵 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第11期1503-1512,共10页

正痘病毒属的牛痘病毒、痘苗病毒以及猴痘病毒等成员是最重要的动物源性人兽共患病病原。作者围绕这些正痘病毒编码的干扰宿主免疫应答的分子及其作用途径,重点介绍了病毒阻断宿主干扰素反应、抑制宿主TNF诱导的反应以及失活宿主防御反... 正痘病毒属的牛痘病毒、痘苗病毒以及猴痘病毒等成员是最重要的动物源性人兽共患病病原。作者围绕这些正痘病毒编码的干扰宿主免疫应答的分子及其作用途径,重点介绍了病毒阻断宿主干扰素反应、抑制宿主TNF诱导的反应以及失活宿主防御反应的免疫成分等策略,以加深对痘病毒感染的宿主特异性、免疫逃避以及致病的分子机制的理解。 展开更多

关键词 正痘病毒 病毒感染 宿主免疫反应 调节宿主免疫蛋白 分子机制

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猪繁殖与呼吸综合征病毒JX0708株的分离鉴定及其Nsp2基因的遗传变异分析 被引量：3

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作者 贾怀杰 陈国华 +5 位作者 房永祥 王晓霞 李小庆 莫斯科 瞿惠玲 景志忠 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2010年第10期58-63,共6页

采集江西省某猪场疑似猪繁殖与呼吸综合征病料,RT-PCR检测可扩增出PRRSV ORF7特异性片段,序列分析发现其与美洲型毒株序列一致性达93.9%以上,与欧洲型毒株仅为69.8%。将采集的脑和肺脏处理后接种Marc-145细胞盲传,在盲传的细胞中可扩增... 采集江西省某猪场疑似猪繁殖与呼吸综合征病料,RT-PCR检测可扩增出PRRSV ORF7特异性片段,序列分析发现其与美洲型毒株序列一致性达93.9%以上,与欧洲型毒株仅为69.8%。将采集的脑和肺脏处理后接种Marc-145细胞盲传,在盲传的细胞中可扩增到PRRSV ORF7特异性片段,传至第6代时出现明显的细胞病变;将该毒株NSP2非结构蛋白基因测序分析,发现其编码的氨基酸与国内近年来分离的高致病性PRRSV毒株有较高的同源性,与美洲型代表株VR-2332相比缺失第482位和533-561位共30个氨基酸;纯化病毒并进行电镜观察,可见典型的PRRSV病毒粒子。第8代的细胞毒回归30日龄仔猪,可观察到猪繁殖与呼吸综合征典型症状和病理变化。这表明已成功地分离到1株美洲型PRRSV变异株,命名为JX0708株。 展开更多

关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 JX0708株 分离鉴定 NSP2基因 遗传变异分析

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抑制性消减杂交技术的应用 被引量：8

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作者 李小庆 景志忠 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期46-50,共5页

基因的差异表达是调控各种生命活动的核心分子机制,而分离、克隆并进一步研究差异表达基因已成为现代分子生物学研究的热点,也是功能基因组学研究的重要内容。在研究差异表达基因的诸多项技术中,抑制性消减杂交(SSH)技术具有特异性强、... 基因的差异表达是调控各种生命活动的核心分子机制,而分离、克隆并进一步研究差异表达基因已成为现代分子生物学研究的热点,也是功能基因组学研究的重要内容。在研究差异表达基因的诸多项技术中,抑制性消减杂交(SSH)技术具有特异性强、假阳性率低、灵敏度高和快速简便等优点,被广泛地应用于生命科学和医学领域的基因差异表达的研究中。近年来,抑制性消减杂交(SSH)技术得到了相应的改进和完善,而在许多研究领域,该技术在广度和深度上都有了一些新进展。主要就抑制性消减杂交技术的产生背景、原理、技术流程、特点及其最新应用研究进展等方面作简要综述。 展开更多

关键词 抑制性消减杂交 差异表达 功能基因DSN均一化技术 CDNA微阵列

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DNA识别受体在天然免疫反应中的作用 被引量：1

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作者 何小兵 房永祥 +3 位作者 贾怀杰 陈国华 曾爽 景志忠 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期159-166,共8页

近年来，随着人们对哺乳动物模式识别受体（Patternrecognition receptors，PRRs）的发现和研究的不断深入，PRRs对病原，尤其是对病原生命物质基础——DNA和RNA的识别成为天然免疫学研究的热点和重点领域^[1]。PRRs主要包括Toll样受体... 近年来，随着人们对哺乳动物模式识别受体（Patternrecognition receptors，PRRs）的发现和研究的不断深入，PRRs对病原，尤其是对病原生命物质基础——DNA和RNA的识别成为天然免疫学研究的热点和重点领域^[1]。PRRs主要包括Toll样受体（TLRs）家族、RIG-I样受体（RLRs）家族和蛋白激酶R（RNA-ativated protein kinase R， 展开更多

关键词 TOLL样受体 DNA识别 免疫反应 天然 KINASE PRRS 模式识别 哺乳动物

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猪T细胞受体β链的基因结构及其多样性分析 被引量：1

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作者 曾爽 李玩生 +5 位作者 房永祥 冯海燕 陈国华 何小兵 贾怀杰 景志忠 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第11期1874-1882,共9页

设计猪TCRβ链基因的一对特异性引物,用RT-PCR法从合作小型猪外周血、淋巴结和脾淋巴细胞中高通量克隆和鉴定了82个猪TCRβ基因(简称STB)。测序分析表明,克隆的猪TCRβ链的基因都含有可变的信号肽区和V区、高变的D区和J区以及恒定的C区... 设计猪TCRβ链基因的一对特异性引物,用RT-PCR法从合作小型猪外周血、淋巴结和脾淋巴细胞中高通量克隆和鉴定了82个猪TCRβ基因(简称STB)。测序分析表明,克隆的猪TCRβ链的基因都含有可变的信号肽区和V区、高变的D区和J区以及恒定的C区的基因片段,绝大部分基因间的核苷酸序列组成都不完全相同,且具有十分复杂的多态性和多样性,基因间的相似性在36.6%~99.9%,这与TCRβ链的基本基因结构特征相一致。猪TCRβ基因的分子结构、遗传演化关系和归类分析发现,在同一类基因分子中其信号肽区、FR1区和CDR1区、FR2区和CDR2区以及FR3区之间的差异主要由V基因片段的多态性引起,而CDR3区的差异主要由其D、J基因片段的多样性造成。同时发现猪TCRβ与人类的遗传演化关系较近,大部分基因序列都能找到与人类对应的TRBV、TRBD、TRBJ基因片段,但又存在一定的差异性。这表明,猪TCRβ基因既有应对外界复杂微生物环境的免疫多样性分子遗传基础,也有物种间的相似性与特异性。 展开更多

关键词 合作小型猪 TCRβ基因 生物信息学 多样性

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猪MyD88基因的原核表达 被引量：2

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作者 曾爽 陈国华 +2 位作者 崔青 房永祥 景志忠 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2010年第12期1-5,共5页

采用PCR方法从pGEM-pMyD88重组质粒中克隆了猪MyD88分子全长基因,构建了无信号肽序列的原核表达载体pET-30a-pMyD88-ED,在不同IPTG浓度和时间下进行诱导表达,利用切胶洗脱法纯化表达的融合蛋白。结果表明,在IPTG诱导浓度为0.05 mmol/L,... 采用PCR方法从pGEM-pMyD88重组质粒中克隆了猪MyD88分子全长基因,构建了无信号肽序列的原核表达载体pET-30a-pMyD88-ED,在不同IPTG浓度和时间下进行诱导表达,利用切胶洗脱法纯化表达的融合蛋白。结果表明,在IPTG诱导浓度为0.05 mmol/L,诱导时间为6 h时表达量达到最大,SDS-PAGE分析表明表达出约35 ku的融合蛋白,主要以包涵体的形式存在;通过切胶纯化后,融合蛋白的纯度可达90%;Western blot分析显示,表达的融合蛋白能被抗His标签的单克隆抗体识别,说明目的蛋白在大肠埃希菌中得到了成功表达。 展开更多

关键词 猪MyD88分子 原核表达 大肠埃希菌

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蕨麻猪生长激素基因的克隆及多态性分析 被引量：2

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作者 李军成 路彩霞 景志忠 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2010年第12期6227-6230,共4页

[目的]探索蕨麻猪生长激素基因与其生理学和生物学特性的关系。[方法]从蕨麻猪血液细胞中提取基因组DNA,通过PCR技术扩增出蕨麻猪生长激素基因序列,进行碱基组成多态性和突变分析。[结果]蕨麻猪生长激素(pGH)基因序列全长1671bp,有5个... [目的]探索蕨麻猪生长激素基因与其生理学和生物学特性的关系。[方法]从蕨麻猪血液细胞中提取基因组DNA,通过PCR技术扩增出蕨麻猪生长激素基因序列,进行碱基组成多态性和突变分析。[结果]蕨麻猪生长激素(pGH)基因序列全长1671bp,有5个外显子和4个内含子。外显子1、2、3、4和5的碱基数依次是10、161、117、162和201bp,内含子1、2、3和4的碱基数分别是244、210、192和277bp。除第1外显子和第1内含子碱基剪切有明显的例外,其余全部符合GT-AG规则;蕨麻猪生长激素基因4种碱基含量依次为G>C>T>A。(G+C)含量和(A+T)含量分别在62%和37%以上。蕨麻猪编码区第4外显子在+1046位处A→G,为错义突变,其余均为同义突变。蕨麻猪生长激素基因编码的前体蛋白含216个氨基酸,成熟蛋白是由190个氨基酸残基组成的一个分泌性蛋白;二级结构中含有6个α螺旋结构,三级结构是结构松散的球状蛋白,含有6个α螺旋前区。[结论]为蕨麻猪生长激素基因序列的研究提供了参考依据和借鉴。 展开更多

关键词 蕨麻猪 生长激素基因 多态性

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