仔猪轮状病毒性腹泻的研究进展 被引量：15

1

作者 王玲 蒲万霞 +2 位作者 常惠芸 华兰英 索朗斯珠 《动物医学进展》 CSCD 2006年第10期50-54,共5页

仔猪轮状病毒性腹泻是由猪轮状病毒引起的急性肠道传染病,是危害养猪业的主要疾病之一。猪轮状病毒是一种条件性病原,一般情况下呈隐性感染,当环境因素发生变化、免疫力下降时可暴发。目前尚无有效治疗药物,预防该病的有效方法是加强饲... 仔猪轮状病毒性腹泻是由猪轮状病毒引起的急性肠道传染病,是危害养猪业的主要疾病之一。猪轮状病毒是一种条件性病原,一般情况下呈隐性感染,当环境因素发生变化、免疫力下降时可暴发。目前尚无有效治疗药物,预防该病的有效方法是加强饲养管理和有效疫苗接种。研制新一代高效、廉价疫苗是重要的研究方向。掌握仔猪轮状病毒性腹泻的动态变化和影响因素,可为其诊断以及疫苗的研制提供科学依据,并为该病发展趋势的科学预测提供数据和信息支持。文章综述了引起仔猪腹泻的猪轮状病毒的分群和分型、培养特性、流行病学、预防治疗及疫苗研制的现状。 展开更多

关键词 猪轮状病毒 仔猪腹泻 流行病学 病原 疫苗接种

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口蹄疫病毒感染细胞的研究进展 被引量：7

2

作者 沈小燕 常惠芸 +3 位作者 丛国正 刘永生 王建华 谢庆阁 《动物医学进展》 CSCD 2005年第6期1-5,共5页

口蹄疫是引起偶蹄动物的急性发热性水泡性疾病,具有高度接触传染性,对发病国家和地区经济有破坏性作用和不良的政治影响。口蹄疫病原体为小RNA病毒科的口蹄疫病毒,是一类单股正链RNA病毒,该病毒有多种血清型及其亚型,相互之间无交叉保... 口蹄疫是引起偶蹄动物的急性发热性水泡性疾病,具有高度接触传染性,对发病国家和地区经济有破坏性作用和不良的政治影响。口蹄疫病原体为小RNA病毒科的口蹄疫病毒,是一类单股正链RNA病毒,该病毒有多种血清型及其亚型,相互之间无交叉保护力或保护力极其有限。目前,口蹄疫病毒感染的分子机理还不是很清楚。口蹄疫病毒感染细胞的过程主要包括病毒与细胞的吸附、病毒穿透细胞壁进入细胞、病毒粒子的脱衣壳、病毒RNA的翻译转录、病毒基因组的复制以及病毒粒子的成熟过程,最后是成熟的病毒粒子衣壳包装成为完整病毒。文章就口蹄疫病毒感染细胞的过程做一概述。 展开更多

关键词 口蹄疫病毒 感染过程 细胞吸附 病毒翻译 病毒转录 基因复制 口蹄疫

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猪口蹄疫病毒对三种动物细胞嗜性的研究 被引量：8

3

作者 吴锦艳 刘湘涛 +5 位作者 胡永浩 尚佑军 田宏 孙世琪 尹双辉 冯霞 《甘肃农业大学学报》 CAS CSCD 2005年第3期306-310,共5页

将猪FMDV毒株(O/GD/MSH/86)分别适应牛肾细胞(Bovinekidney,MD-BK)、幼仓鼠肾细胞(Babyhamsterkidney,BHK-21)和猪肾细胞(Porcinekidney,PK-15),研究了FMDV在宿主细胞上的嗜性。结果发现,该毒株在MD-BK细胞上不产生细胞病变(CPE),从细... 将猪FMDV毒株(O/GD/MSH/86)分别适应牛肾细胞(Bovinekidney,MD-BK)、幼仓鼠肾细胞(Babyhamsterkidney,BHK-21)和猪肾细胞(Porcinekidney,PK-15),研究了FMDV在宿主细胞上的嗜性。结果发现,该毒株在MD-BK细胞上不产生细胞病变(CPE),从细胞液中也未检测到病毒,而在BHK-21和PK-15细胞上能够稳定产生CPE。可见,猪FMDVO/GD/MSH/86毒株不能在MD-BK细胞上增殖,而在BHK-21和PK-15细胞上则增殖较好。 展开更多

关键词 猪 口蹄疫病毒 细胞 嗜性

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口蹄疫病毒O/China/99株多基因植物组成型表达载体的构建及序列分析 被引量：4

4

作者 潘丽 张永光 +8 位作者 王永录 王宝琴 王文秀 方玉珍 蒋守田 张维德 董金杰 吕建亮 谢庆阁 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2005年第10期841-844,905,共5页

目的构建包含FMDV结构蛋白P1、非结构蛋白2A、3C以及部分2B的基因片段P12X3C的植物组成型表达载体,为FMDV可饲疫苗的研制奠定基础。方法通过PCR扩增法,从pGEM/P12A质粒和pGEM/3C质粒中扩增P12A及部分2B基因(P12X)、3C基因,将获得的P12X... 目的构建包含FMDV结构蛋白P1、非结构蛋白2A、3C以及部分2B的基因片段P12X3C的植物组成型表达载体,为FMDV可饲疫苗的研制奠定基础。方法通过PCR扩增法,从pGEM/P12A质粒和pGEM/3C质粒中扩增P12A及部分2B基因(P12X)、3C基因,将获得的P12X与3C片段经BamHI/SpeI和SpeI/SalI双酶切后,与经BamHI/SalI双酶切后的pUC18质粒大片段连接,得到重组质粒pUC18/P12X3C,pUC18/P12X3C质粒经BamHI/SalI双酶切后的大片段与经同样双酶切的植物表达载体pBin438连接,转化子经酶切、PCR及测序鉴定后,获得包含FMDV O/China/99株P12X3C片段的植物组成型表达载体pBin438/P12X3C,最后通过三亲交配法,将表达载体pBin438/P12X3C导入农杆菌。结论成功构建FMDV多基因的植物组成型表达载体。 展开更多

关键词 口蹄疫病毒 O/China/99株 多基因植物 组成型表达载体 基因序列 可饲疫苗

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中草药红茶菌的制备及其体内抗口蹄疫病毒活性 被引量：8

5

作者 符乃方 吴俊才 +11 位作者 符启俊 吕律 何继军 李开绵 叶剑秋 蒋盛军 蒋小强 邱红辉 高李泽 何萍 谢峥嵘 陈吉雄 《安徽农业科学》 CAS 2014年第18期5892-5894,5908,共4页

[目的]研究中草药红茶菌在动物体内对口蹄疫病毒复制的抑制作用。[方法]选取健康猪20头,喷雾和口服中草药红茶菌3 d后,进行O型口蹄疫毒株(猪O型O/China/99株鼠毒)攻毒试验;攻毒后,继续对猪群进行喷雾和口服给药,观察中草药红茶菌对攻毒... [目的]研究中草药红茶菌在动物体内对口蹄疫病毒复制的抑制作用。[方法]选取健康猪20头,喷雾和口服中草药红茶菌3 d后,进行O型口蹄疫毒株(猪O型O/China/99株鼠毒)攻毒试验;攻毒后,继续对猪群进行喷雾和口服给药,观察中草药红茶菌对攻毒猪的保护作用及体内抗口蹄疫病毒的作用。[结果]攻毒结果显示,低剂量给药猪3/5保护,中剂量给药猪1/5保护,高剂量给药猪0/5保护;在低剂量给药条件下,攻毒保护效果优于中剂量和高剂量;从攻毒后的第1天到第7天,陆续从试验猪全血中检测到口蹄疫病毒,其中中草药红茶菌高浓度预防组猪的口蹄疫病毒的复制水平最高,中剂量组较低,低剂量组复制水平最低。[结论]给药合适剂量的中草药红茶菌对猪体内的口蹄疫病毒具有一定的抑制作用。 展开更多

关键词 中草药红茶菌 制备 口蹄疫病毒 体内抗病毒活性 抑制

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反向遗传学技术及其在FMDV研究中的应用 被引量：7

6

作者 刘光清 刘在新 谢庆阁 《生物技术通报》 CAS CSCD 2003年第3期1-4,11,共5页

反向遗传技术是一种新兴的分子生物学技术 ,已广泛应用于生命科学研究的各个领域。综述反向遗传技术研究进展 ,并讨论该技术在口蹄疫病毒研究中的应用。

关键词 反向遗传学 反向遗传技术 全长CDNA 口缔疫病毒 克隆技术

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中草药红茶菌的制备及其体外抗口蹄疫病毒活性 被引量：6

7

作者 符乃方 吴俊才 +11 位作者 符启俊 吕律 何继军 李开绵 叶剑秋 蒋盛军 蒋小强 邱红辉 高李泽 何萍 谢峥嵘 陈吉雄 《安徽农业科学》 CAS 2014年第17期5500-5502,共3页

[目的]研究中草药红茶菌的细胞、乳鼠毒性以及对口蹄疫病毒在体外的抗病毒活性。[方法]将中草药红茶菌过滤,用细胞培养液稀释,分别接种在BHK21细胞上观察细胞生长情况,评价其对细胞的毒性作用。将中草药红茶菌用灭菌水稀释,分别接种3日... [目的]研究中草药红茶菌的细胞、乳鼠毒性以及对口蹄疫病毒在体外的抗病毒活性。[方法]将中草药红茶菌过滤,用细胞培养液稀释,分别接种在BHK21细胞上观察细胞生长情况,评价其对细胞的毒性作用。将中草药红茶菌用灭菌水稀释,分别接种3日龄乳鼠,观察乳鼠生长、健康状态和接种部位变化情况,评价其对乳鼠的毒性作用。用稀释的中草药红茶菌与浓度为1 000 LD50的口蹄疫病毒等量混合,37℃条件下作用30 min,接种3日龄乳鼠,观察乳鼠发病死亡情况,估算中草药红茶菌体外可杀灭口蹄疫病毒的最大使用浓度。用稀释的中草药红茶菌与口蹄疫病毒混合,接种BHK21细胞,观察致细胞病变效应,记录不同稀释度的中草药红茶菌对口蹄疫病毒的杀灭效果。[结果]BHK21细胞和乳鼠试验表明,中草药红茶菌在1∶4稀释后,对BHK21细胞无毒性反应,并可有效抑制1 000TCID50口蹄疫病毒在BHK21细胞生长繁殖;1∶2稀释的红茶菌微生态制剂对3日龄乳鼠无毒性反应,并可有效杀灭1 000 LD50口蹄疫病毒。[结论]中草药红茶菌是一种安全性好且对口蹄疫病毒有较好杀灭作用的口蹄疫预防中草药微生态制剂。 展开更多

关键词 中草药红茶菌 口蹄疫病毒 预防 活性 体外

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A型口蹄疫病毒结构蛋白VP1的表达·纯化及活性检测 被引量：4

8

作者 李菁 林彤 +4 位作者 高闪电 丛国正 独军政 邵军军 常惠芸 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2010年第10期5248-5250,共3页

[目的]表达口蹄疫病毒结构蛋白VP1,并对其进行纯化和相关活性的检测。[方法]以A型口蹄疫病毒结构蛋白VP1重组质粒pGEM-VP1为模板,用特异性表达引物扩增其编码区,经酶切后与pGEX-4T-1、pPROExHTb等原核表达载体相连,转化大肠杆菌BL21(DE3... [目的]表达口蹄疫病毒结构蛋白VP1,并对其进行纯化和相关活性的检测。[方法]以A型口蹄疫病毒结构蛋白VP1重组质粒pGEM-VP1为模板,用特异性表达引物扩增其编码区,经酶切后与pGEX-4T-1、pPROExHTb等原核表达载体相连,转化大肠杆菌BL21(DE3)pLysS表达菌株,经IPTG诱导表达,以实现VP1蛋白的表达,SDS-PAGE鉴定融合蛋白的表达并对2种载体重组菌进行超声裂解,取上清和沉淀电泳,用金属螯合亲合层析法对His-VP1进行纯化。[结果]SDS-PAGE电泳分析显示pPRO-VP1诱导后目的条带为33ku,与预期结果相符;目的蛋白纯化后,在电泳图片上显示较为清晰的单一条带;His-VP1可与A型口蹄疫病毒豚鼠灭活阳性血清发生特异性的反应。[结论]表达及纯化了具有高特异性的A型口蹄疫病毒结构蛋白VP1,为深入研究结构蛋白VP1在口蹄疫病毒致病机制中的作用奠定了基础。 展开更多

关键词 A型口蹄疫病毒 结构蛋白VP1 表达及纯化

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猪水疱病自杀性DNA疫苗的初步研究 被引量：2

9

作者 孙世琪 郭慧琛 +6 位作者 尹双辉 冯霞 尚佑军 代兴国 刘在新 刘湘涛 谢庆阁 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第10期1016-1020,共5页

利用RT-PCR技术,用保真酶扩增获得猪水疱病病毒外壳蛋白1BCD基因,克隆于DNA复制子载体pSCA1中,获得重组质粒pSCA/1BCD。将重组质粒转染BHK-21细胞,RT-PCR法和间接免疫荧光法检测显示,猪水疱病病毒外壳蛋白基因在转染细胞中表达。豚鼠免... 利用RT-PCR技术,用保真酶扩增获得猪水疱病病毒外壳蛋白1BCD基因,克隆于DNA复制子载体pSCA1中,获得重组质粒pSCA/1BCD。将重组质粒转染BHK-21细胞,RT-PCR法和间接免疫荧光法检测显示,猪水疱病病毒外壳蛋白基因在转染细胞中表达。豚鼠免疫试验表明,自杀性DNA疫苗pSCA/1BCD可诱导SVDV特异性抗体和T淋巴细胞增殖。 展开更多

关键词 猪水疱病病毒(SVDV) 甲病毒复制子载体 自杀性DNA疫苗

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猪囊尾蚴病病原入侵与免疫机理以及免疫预防研究进展 被引量：4

10

作者 景志忠 才学鹏 《动物医学进展》 CSCD 2005年第6期13-17,共5页

猪囊尾蚴病是危害严重的人畜共患寄生虫病,其病原是复杂的真核生物,有猪带绦虫成虫、六钩蚴、囊尾蚴等多个发育阶段,在人猪之间循环感染寄生发育。目前国内外已在病原和宿主个体、细胞和分子水平上对猪囊尾蚴入侵与免疫、免疫与免疫逃... 猪囊尾蚴病是危害严重的人畜共患寄生虫病,其病原是复杂的真核生物,有猪带绦虫成虫、六钩蚴、囊尾蚴等多个发育阶段,在人猪之间循环感染寄生发育。目前国内外已在病原和宿主个体、细胞和分子水平上对猪囊尾蚴入侵与免疫、免疫与免疫逃避以及免疫预防等方面进行了大量的研究,初步明确了虫体的组成成分与结构形态以及发育形式,与病原入侵和免疫的关系,为免疫预防控制,特别是分子免疫预防奠定了坚实的基础。但要完全控制和消灭该病,要走的路还很长。 展开更多

关键词 猪囊尾蚴病 阶段发育 免疫机理 免疫预防

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猪瘟病毒p80基因丝氨酸蛋白酶功能区的原核表达及小鼠免疫试验

11

作者 鲁絮 许信刚 +2 位作者 张彦明 张淼涛 李少方 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期14-18,共5页

根据已发表的猪瘟病毒Alfort株的全基因组序列,设计2对引物以Shimen细胞毒株为材料,一步法提取总RNA,利用RT-PCR和套式PCR,成功扩增出p80全长基因,包括丝氨酸蛋白酶以及NTPase/RNA解旋酶功能区,大小约为2.0kb。将p80基因中的丝氨酸蛋白... 根据已发表的猪瘟病毒Alfort株的全基因组序列,设计2对引物以Shimen细胞毒株为材料,一步法提取总RNA,利用RT-PCR和套式PCR,成功扩增出p80全长基因,包括丝氨酸蛋白酶以及NTPase/RNA解旋酶功能区,大小约为2.0kb。将p80基因中的丝氨酸蛋白酶基因克隆到原核表达载体pET-32a中,获得重组质粒pET-p80。将重组质粒转化大肠杆菌Rosetta(DE3)中,IPTG诱导表达得到分子量约为43ku的目的蛋白,与理论大小相符。将菌体蛋白经Ni柱纯化,获得纯化重组p80蛋白,Western blot检测表明,表达的目的蛋白能与CSFV阳性血清发生反应。用纯化的p80蛋白免疫Bal b/c小鼠,成功制备了抗p80蛋白的抗血清。 展开更多

关键词 猪瘟病毒 p80基因 原核表达 免疫

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免疫增强重组流感病毒体

12

作者 郭慧琛 孙世琪 +1 位作者 刘在新 谢庆阁 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期394-397,共4页

自英国医生Edward Tenner提出免疫接种的概念之后,疾病的预防已成为提高人类生活质量的最高要求.由于病原不断进化,自然免疫反应不可能实现理想的免疫保护,而且由于病原体可能影响宿主的免疫反应,甚至在一定程度上抑制宿主免疫系统的抗... 自英国医生Edward Tenner提出免疫接种的概念之后,疾病的预防已成为提高人类生活质量的最高要求.由于病原不断进化,自然免疫反应不可能实现理想的免疫保护,而且由于病原体可能影响宿主的免疫反应,甚至在一定程度上抑制宿主免疫系统的抗感染能力,因此,需要在对病原分子生物学、致病机理以及病原与免疫系统间相互作用的综合理解基础上,研究更安全、有效的免疫方法. 展开更多

关键词 免疫增强 流感病毒体 免疫接种 自然免疫

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口蹄疫多基因杆状病毒转移载体的构建

13

作者 云涛 冷青文 +3 位作者 郭慧琛 刘在新 张居农 谢庆阁 《动物医学进展》 CSCD 2004年第4期104-106,共3页

采用分步 PCR扩增连接的方法将口蹄疫病毒结构蛋白基因 P1 ,非结构蛋白基因 2 A、2 B、3 C蛋白酶和 3 D聚合酶按正确的读码框依次连接克隆入 p GEM-T载体。然后 ,将切取的目的基因亚克隆入杆状病毒转移载体 p Mel Bac B。构建成功的重组... 采用分步 PCR扩增连接的方法将口蹄疫病毒结构蛋白基因 P1 ,非结构蛋白基因 2 A、2 B、3 C蛋白酶和 3 D聚合酶按正确的读码框依次连接克隆入 p GEM-T载体。然后 ,将切取的目的基因亚克隆入杆状病毒转移载体 p Mel Bac B。构建成功的重组 p Mel Bac B/P1 2 X3 C3 D转移载体经测序鉴定 ,含有完整的目的基因表达盒 ,转移载体可与杆状病毒骨架载体进行昆虫 sf9细胞内同源重组 。 展开更多

关键词 口蹄疫 多基因杆状病毒 转移载体 基因工程疫苗

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C型口蹄疫病毒VPI基因的克隆及真核表达载体的构建

14

作者 杨生海 殷宏 +7 位作者 张杰 刘永生 张继乐 曾巧英 陈豪泰 马丽娜 马艳平 丁耀忠 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2009年第10期4416-4419,共4页

应用PT-PCR扩增C型口蹄疫病毒(FMDV)VP1基因,将其克隆到pMD18-T载体中,并对克隆载体和VP1基因进行序列分析。将VP1基因和选择标记基因——二氢叶酸还原酶(dhfr)基因插入真核表达载体pCI-neo中,对所构建的重组真核表达载体进行PCR扩增、... 应用PT-PCR扩增C型口蹄疫病毒(FMDV)VP1基因,将其克隆到pMD18-T载体中,并对克隆载体和VP1基因进行序列分析。将VP1基因和选择标记基因——二氢叶酸还原酶(dhfr)基因插入真核表达载体pCI-neo中,对所构建的重组真核表达载体进行PCR扩增、酶切鉴定和序列分析。结果表明,VP1基因与GenBank中标准毒株(登录号EU553893)VP1的序列同源性为92.8%,VP1基因的真核表达载体pCI-VP1-D构建成功。 展开更多

关键词 C型口蹄疫病毒 VPI基因 真核表达载体

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我国近期7株猪瘟流行野毒E2基因变异研究 被引量：1

15

作者 胡慧 邱昌庆 +1 位作者 周继章 张彦明 《动物医学进展》 CSCD 2005年第6期59-63,共5页

应用RT-PCR和nPCR扩增了7株国内近期(2001年-2003年)流行的猪瘟野毒E2基因,分别克隆至pGEM-T载体并对其进行了核苷酸序列测定及氨基酸序列推导,同时将其与C株、Alfort株、Brecsia株进行了同源性比较及遗传进化分析,构建了CSFV的遗传发生... 应用RT-PCR和nPCR扩增了7株国内近期(2001年-2003年)流行的猪瘟野毒E2基因,分别克隆至pGEM-T载体并对其进行了核苷酸序列测定及氨基酸序列推导,同时将其与C株、Alfort株、Brecsia株进行了同源性比较及遗传进化分析,构建了CSFV的遗传发生树,并对E2结构与功能进行了分析.所测7株野毒均包括完整的信号肽序列及部分跨膜区在内的1 170 bp,与C株、Alfort株、Brescia株核苷酸序列同源性分别为91.6%～94.5%、89.2%～92.7%、85.9%～89.3%,氨基酸同源性分别为91.2%～95.8%、88.9%～92.0%、84.0%～90.1%;而7株野毒之间的差异很小,其核苷酸序列同源性为95.8%～99.7%,氨基酸同源性为96.3%～99.1%.所绘制的遗传发生树分为2个组群,所测得7株流行野毒均属于第1群,而且可分为两亚群,与C株在同一亚群.同时对主要抗原区氨基酸位点变异进行了分析,对其抗原决定簇的变异情况进行了推测. 展开更多

关键词 猪瘟病毒 E2基因 同源性 遗传发生树

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用大肠杆菌表达FMDV NSP3ABC鉴别感染与注苗动物ELISA方法的建立 被引量：15

16

作者 曹轶梅 卢曾军 +1 位作者 刘在新 谢庆阁 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期381-386,共6页

用大肠杆菌表达的FMDV NSP3ABC经纯化复性后作为抗原,建立了鉴别感染动物与注苗动物的间接ELISA方法。用该方法检测了大量的牛血清样品,确定了3ABC-I-ELISA判定标准。3ABC-I-ELISA以(OD样品-OD阴性)÷(OD阳性-OD阴性)来计算待测样... 用大肠杆菌表达的FMDV NSP3ABC经纯化复性后作为抗原,建立了鉴别感染动物与注苗动物的间接ELISA方法。用该方法检测了大量的牛血清样品,确定了3ABC-I-ELISA判定标准。3ABC-I-ELISA以(OD样品-OD阴性)÷(OD阳性-OD阴性)来计算待测样品效价。当效价小于012为阴性,介于012～013之间为可疑,大于013为阳性。根据此判定标准所测试验感染动物血清都为阳性,敏感性达100%;97.06%疫苗注射动物血清为阴性;98.39%的非免疫健康牛(未感染也未注射疫苗牛)血清为阴性。研究证实感染牛在1年以后仍能检测到3ABC抗体。这说明3ABC-I-ELISA能够鉴别FMDV感染动物和注苗动物,可作为大面积疫情监测的方法应用。 展开更多

关键词 大肠杆菌表达 鉴别 间接ELISA方法 FMDV 感染动物 判定标准 动物血清 血清样品 疫苗注射 注射疫苗 方法应用 疫情监测 阳性 敏感性 健康牛 检测 效价 抗原 后作 免疫 抗体

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猪带绦虫六钩蚴TSO18基因的克隆和表达 被引量：11

17

作者 骆学农 郑亚东 +3 位作者 吴旭刚 窦永喜 景志忠 才学鹏 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2005年第3期262-264,共3页

关键词 猪带绦虫 六钩蚴 分子生物学技术 公共卫生问题 免疫相关基因 健康危害 经济损失 免疫预防 猪囊虫病 抗原成分 研究领域 体外克隆 表达产物 感染率 囊尾蚴 寄生虫

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猪带绦虫六钩蚴cDNA文库的构建及免疫原基因的筛选与克隆 被引量：6

18

作者 景志忠 郭爱疆 +2 位作者 海岗 宗瑞谦 才学鹏 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期391-396,共6页

研究避开庞大的猪带绦虫基因组DNA,以构建六钩蚴发育阶段的cDNA表达文库为策略,利用pSPORT1质粒表达载体首次成功构建了表达文库。经库容量、重组率和代表性测定,库容量达5.0×106,重组率100%,用特异性引物能扩增出六钩蚴发育阶段1... 研究避开庞大的猪带绦虫基因组DNA,以构建六钩蚴发育阶段的cDNA表达文库为策略,利用pSPORT1质粒表达载体首次成功构建了表达文库。经库容量、重组率和代表性测定,库容量达5.0×106,重组率100%,用特异性引物能扩增出六钩蚴发育阶段10ku基因、18ku基因和45W基因家族的A型、B型、C型转录本,说明文库质量高,代表性强。应用快速筛选质粒表达文库和克隆免疫原基因的技术,成功地筛选和克隆到TsO1基因,其完整阅读框架(ORF)为393bp。将其登录到GenBank(AY327451),经BLAST分析,证实是猪带绦虫六钩蚴发育阶段的1个新免疫原基因。 展开更多

关键词 猪带绦虫 六钩蚴 免疫原 cDNA文库 克隆 构建 CDNA表达文库 基因组DNA 发育阶段 质粒表达载体 特异性引物 BLAST 基因家族 快速筛选 库容量 代表性 重组率 转录本

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我国近期猪瘟分子流行病学动态 被引量：15

19

作者 孙世琪 靳野 +8 位作者 郭慧琛 尚佑军 魏旭文 马军武 韩雪清 邱伯根 梁原祥 刘湘涛 谢庆阁 《动物医学进展》 CSCD 2004年第6期69-71,共3页

利用反转录聚合酶链式反应 (RT PCR)及测序技术 ,测定 2 0 0 2年分离于我国甘肃、湖南、海南、青海等省的 9株猪瘟野毒的E2基因序列 ,并与C 株疫苗毒进行同源性比较 ,绘制CSFV系统发生树。结果表明 ,近期分离于我国的 9株野毒与C 株核... 利用反转录聚合酶链式反应 (RT PCR)及测序技术 ,测定 2 0 0 2年分离于我国甘肃、湖南、海南、青海等省的 9株猪瘟野毒的E2基因序列 ,并与C 株疫苗毒进行同源性比较 ,绘制CSFV系统发生树。结果表明 ,近期分离于我国的 9株野毒与C 株核苷酸序列间的同源性在80 .7%～ 99.1 %,氨基酸同源性在 89.3%～98.9%。9株野毒分属于 2个不同的组群 ,其中 5株与我国经典的石门强毒和C 株疫苗毒同属于Subgroups1 .1 ,另 4株属于与C 株有较大差异的Subgroup2 .1。 展开更多

关键词 中国 猪瘟 分子流行病学 动态分析

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肉鸽衣原体病病原分离鉴定 被引量：7

20

作者 邱昌庆 陈坤永 +3 位作者 周继章 翁良树 高双娣 程淑敏 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期203-205,共3页

广东某肉鸽场幼龄鸽群发生以结膜炎、鼻炎和口腔炎 ,呼吸困难 ,腹泻 ,消瘦 ,生长发育缓慢为物征的传染病。从发病鸽分离到 2株菌 (SG1、SG2 ) ,经电镜形态学观察、人工培养基接种试验、碘胺敏感性试验及碘染色试验鉴定为鹦鹉热衣原体 (C... 广东某肉鸽场幼龄鸽群发生以结膜炎、鼻炎和口腔炎 ,呼吸困难 ,腹泻 ,消瘦 ,生长发育缓慢为物征的传染病。从发病鸽分离到 2株菌 (SG1、SG2 ) ,经电镜形态学观察、人工培养基接种试验、碘胺敏感性试验及碘染色试验鉴定为鹦鹉热衣原体 (Chlamydiapsittaci)。用IHA试验检查该鸽群衣原体抗体 ,阳性率到达 92 .0 %。本次的鸽子传染病诊断为鸽衣原体病。 展开更多

关键词 鸽衣原体病 婴鹉热衣原体 病原分离鉴定

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