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Tollip敲除猪肾细胞系的构建
被引量:
1
1
作者
王家丽
杨帆
+5 位作者
邵文华
黄梦瑶
曹伟军
蒲秀瑛
张伟
郑海学
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第4期1810-1818,共9页
旨在探究Toll作用蛋白(toll-interacting protein, Tollip)对口蹄疫病毒(foot-and-mouth disease virus, FMDV)增殖的影响,利用CRISPR/Cas9基因编辑技术构建Tollip基因缺失的猪肾细胞系(porcine kidney cell line, PK-15),并通过PCR测序...
旨在探究Toll作用蛋白(toll-interacting protein, Tollip)对口蹄疫病毒(foot-and-mouth disease virus, FMDV)增殖的影响,利用CRISPR/Cas9基因编辑技术构建Tollip基因缺失的猪肾细胞系(porcine kidney cell line, PK-15),并通过PCR测序和Western blot确认敲除效果,然后利用CCK-8试剂盒测定Tollip缺失后细胞活力变化,确认敲除细胞与野生细胞无显著差异,用FMDV感染敲除细胞后,采用Western blot、间接免疫荧光、实时荧光定量和病毒滴度测定等方法测定病毒在敲除细胞系中复制情况。结果显示:感染FMDV后,敲除细胞与野生细胞相比,显著促进了病毒的复制。综上,在PK-15细胞上,成功构建Tollip缺失细胞系,且试验表明Tollip的缺失有助于FMDV的复制。研究结果为后续Tollip功能研究及抗病毒机制研究提供理论依据。
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关键词
CRISPR/Cas9
Tollip基因
细胞系
口蹄疫病毒
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职称材料
题名
Tollip敲除猪肾细胞系的构建
被引量:
1
1
作者
王家丽
杨帆
邵文华
黄梦瑶
曹伟军
蒲秀瑛
张伟
郑海学
机构
中国农业科学院兰州兽医研究所兰州大学动物医学与生物安全学院动物疫病防控全国重点实验室国家口蹄疫参考实验室
兰州
理工
大学
生命
科学
与工程
学院
甘肃省病原
生物
学基础学科
研究
中心
出处
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第4期1810-1818,共9页
基金
国家自然科学基金项目(32102639,32072831)
国家重点研发计划项目(2021YFD1800300)
+3 种基金
甘肃省杰出青年基金(21JR7RA026)
兰州大学中央高校基本科研业务费专项资金(lzujbky-2022-ey20)
甘肃省科技重大专项(22ZD6NA001)
国家生猪产业技术体系(CARS-35)。
文摘
旨在探究Toll作用蛋白(toll-interacting protein, Tollip)对口蹄疫病毒(foot-and-mouth disease virus, FMDV)增殖的影响,利用CRISPR/Cas9基因编辑技术构建Tollip基因缺失的猪肾细胞系(porcine kidney cell line, PK-15),并通过PCR测序和Western blot确认敲除效果,然后利用CCK-8试剂盒测定Tollip缺失后细胞活力变化,确认敲除细胞与野生细胞无显著差异,用FMDV感染敲除细胞后,采用Western blot、间接免疫荧光、实时荧光定量和病毒滴度测定等方法测定病毒在敲除细胞系中复制情况。结果显示:感染FMDV后,敲除细胞与野生细胞相比,显著促进了病毒的复制。综上,在PK-15细胞上,成功构建Tollip缺失细胞系,且试验表明Tollip的缺失有助于FMDV的复制。研究结果为后续Tollip功能研究及抗病毒机制研究提供理论依据。
关键词
CRISPR/Cas9
Tollip基因
细胞系
口蹄疫病毒
Keywords
CRISPR/Cas9
Tollip gene
cell lines
foot-and-mouth disease virus
分类号
Q789 [生物学—分子生物学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
Tollip敲除猪肾细胞系的构建
王家丽
杨帆
邵文华
黄梦瑶
曹伟军
蒲秀瑛
张伟
郑海学
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2024
1
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