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牛病毒性腹泻病毒遗传多样性与防控研究进展被引量：4: 1; 作者李志孟茹 +4 位作者付永韩元尚佑军高闪电殷宏《动物医学进展》北大核心 2024年第12期106-112,共7页; 牛病毒性腹泻(Bovine viral diarrhea)是由黄病毒科瘟病毒属的牛病毒性腹泻病毒(BVDV)感染引起牛的一种传染病,在全球范围内广泛流行,导致严重的经济损失。BVDV可分为BVDV-1、BVDV-2和BVDV-3基因型和众多的基因亚型,宿主范围比较广泛,... 展开更多; 关键词牛病毒性腹泻病毒基因型与生物型致病性免疫抑制作用; 在线阅读下载PDF 职称材料

甘肃某规模化鸡场禽腺病毒4型感染的诊断与分析: 2; 作者豆玲吉艳红 +5 位作者李鹏飞刘萍杜国玉刘志杰何继军尚佑军《动物医学进展》北大核心 2025年第7期57-63,共7页; 针对近期甘肃某规模化蛋鸡场发生禽腺病毒4型(FAdV-4)感染的疑似疫情,系统开展实验室确诊及病原分子流行病学分析。通过对死亡鸡临床剖检、多组织病理切片分析、根据FAdV-4型Fiber-2基因设计引物进行PCR扩增、测序与核苷酸序列比对、同... 展开更多; 关键词禽腺病毒4型心包水-肝炎综合征蛋鸡; 在线阅读下载PDF 职称材料

TRIF敲除NA与BHK-21细胞系的构建及对狂犬病病毒增殖效率的影响: 3; 作者黄伟涛李家琪 +3 位作者彭瑶殷相平郭霄峰罗均《华南农业大学学报》北大核心 2025年第5期627-636,共10页; 【目的】通过CRISPR/Cas9技术构建β干扰素TIR结构域衔接蛋白(TIR-domain-containing adaptorinducing interferon β,TRIF)基因敲除小鼠NA细胞系与仓鼠BHK-21细胞系,评估狂犬病病毒(Rabies virus,RABV)在敲除细胞系中的增殖能力,探究T... 展开更多; 关键词 CRISPR/Cas9 β干扰素TIR结构域衔接蛋白基因基因敲除狂犬病病毒; 在线阅读下载PDF 职称材料

鹅星状病毒Ⅰ、Ⅱ型和鹅细小病毒多重荧光定量PCR检测方法的建立与应用: 4; 作者朱啟超任曼 +5 位作者张学刚张进进张鑫龙李佳晋曲光刚李升和《中国兽药杂志》 2025年第5期1-9,共9页; 为建立一种可快速、特异检测鹅星状病毒Ⅰ型(GAstVⅠ)、Ⅱ型(GAstVⅡ)及鹅细小病毒(GPV)多重荧光定量PCR方法,根据GAstVⅠ型、GAstVⅡ型及GPV保守基因序列设计合成了特异性引物及三种荧光基团TaqMan探针,分别构建了带有三种病原靶基因... 展开更多; 关键词鹅星状病毒Ⅰ型鹅星状病毒Ⅱ型鹅细小病毒多重荧光定量PCR; 在线阅读下载PDF 职称材料

羊传染性脓疮病毒ORF047酵母双杂交诱饵载体的构建及鉴定: 5; 作者宋世斌陈国华《甘肃畜牧兽医》 2024年第3期62-67,共6页; 为研究羊传染性脓疮病毒(Orf virus,ORFV)ORF047编码IMV上的膜蛋白在病毒与宿主互作过程中的功能,本研究选择pBT3-N和pBT3-SET两种不同表达特性的诱饵载体,分别成功构建了pBT3-N-ORF047、pBT3-SET-ORF047和pBT3-SETORF047-183AA三个诱... 展开更多; 关键词羊传染性脓疮病毒 ORF047 酵母双杂交诱饵载体鉴定; 在线阅读下载PDF 职称材料

山羊痘病毒锚蛋白ORF140对NF-κB信号通路的调控作用被引量：2: 6; 作者冯秋媛余翰维 +8 位作者杨云凤张慧韩武玮怡孙心童邵晓龙刘俊林陈国华景志忠陈轶霞《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第11期5191-5199,共9页; NF-κB通路是病毒调控宿主免疫功能的一个重要靶点,在病毒感染致病的过程中发挥重要作用。研究证明,一些痘病毒编码的锚蛋白可通过多种方式调控NF-κB通路,但山羊痘病毒编码的锚蛋白对NF-κB通路有怎样的调控作用尚未有研究报道。为了... 展开更多; 关键词山羊痘病毒锚蛋白 NF-ΚB ORF140; 在线阅读下载PDF 职称材料

鼠痘病毒EVM135和EVM085蛋白免疫原性及抗体中和活性的鉴定被引量：1: 7; 作者高真贞蒙泽菁 +4 位作者何小兵房永祥田慧慧陈国华景志忠《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期2468-2477,共10页; 正痘病毒属病毒的A33和H3L蛋白是其成员共有的中和抗体的两个主要靶标。为检测鼠痘病毒(ectromelia virus,ECTV)A33和H3L蛋白同源物的免疫原性及抗体中和活性,以ECTV-Moscow株基因组DNA为模板,PCR扩增A33和H3L同源基因EVM135、EVM085目... 展开更多; 关键词 A33 H3L 原核表达多克隆抗体中和活性; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名牛病毒性腹泻病毒遗传多样性与防控研究进展被引量：4: 1; 作者李志孟茹付永韩元尚佑军高闪电殷宏; 机构青海大学/青海省动物疫病病原诊断与绿色防控技术研究重点实验室/青海省畜牧兽医科学院西宁市动物疫病预防控制中心中国农业科学院兰州兽医研究所/动物疫病防控全国重点实验室/甘肃省病原生物学基础学科研究中心; 出处《动物医学进展》北大核心 2024年第12期106-112,共7页; 基金甘肃省重点研发计划项目(22YF7NA030) “十四五”国家重点研发计划项目(2022YFD1302101) +3 种基金国家肉牛牦牛产业技术体系项目(NBCIS,CARSG37)。; 文摘牛病毒性腹泻(Bovine viral diarrhea)是由黄病毒科瘟病毒属的牛病毒性腹泻病毒(BVDV)感染引起牛的一种传染病,在全球范围内广泛流行,导致严重的经济损失。BVDV可分为BVDV-1、BVDV-2和BVDV-3基因型和众多的基因亚型,宿主范围比较广泛,而且可形成持续感染,抑制宿主固有免疫和适应性免疫应答,给防控带来困难。虽然在北欧一些国家利用监测淘汰实现了BVD净化,但在BVD流行率较高的地区,免疫控制策略现实可行。目前我国各地均有BVD报道,基于BVDV-1毒株的灭活疫苗已用于该病的防控,但用于预防多病原引起牛腹泻或牛呼吸道综合征的联合疫苗匮乏,多联多价疫苗的创制将有助于我国BVD防控和净化。; 关键词牛病毒性腹泻病毒基因型与生物型致病性免疫抑制作用; Keywords Bovine viral diarrhea virus genotype and biotype pathogenicity immunosuppression; 分类号 S852.659.6 [农业科学—基础兽医学] S858.23 [农业科学—临床兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名甘肃某规模化鸡场禽腺病毒4型感染的诊断与分析: 2; 作者豆玲吉艳红李鹏飞刘萍杜国玉刘志杰何继军尚佑军; 机构中国农业科学院兰州兽医研究所/动物疫病防控全国重点实验室甘肃省动物疫病预防控制中心; 出处《动物医学进展》北大核心 2025年第7期57-63,共7页; 基金国家重点研发计划项目(2022YFD1801003)。; 文摘针对近期甘肃某规模化蛋鸡场发生禽腺病毒4型(FAdV-4)感染的疑似疫情,系统开展实验室确诊及病原分子流行病学分析。通过对死亡鸡临床剖检、多组织病理切片分析、根据FAdV-4型Fiber-2基因设计引物进行PCR扩增、测序与核苷酸序列比对、同源性分析;对患病鸡、同群未表现症状的假定健康鸡和健康鸡采集血液进行禽腺病毒抗体ELISA检测;对剖检后实质脏器进行细菌培养,进行16S rRNA的PCR扩增,测序后序列同源性比对。结果显示,病鸡表现进行性消瘦、贫血、产蛋停止、腹泻乃至死亡等症状,剖检显示心包积液,肝、肾肿大,弥漫性出血,肝脏质脆;多个组织病理切片检查可见心肌纤维坏死伴炎性细胞浸润,肺脏组织被膜增厚、肺小叶坏死,肾小管溶解坏死,肝细胞灶状坏死,小肠及腺胃组织黏膜层可见溶解坏死等系列病理变化;PCR检测FAdV-4型病毒的Fiber-2基因片段(358 bp)呈阳性,其测序结果与GenBank上公布的Fiber 2基因同源性为99.7%;ELISA检测FAdV-4型病毒血清抗体亦为阳性;病料细菌检测16S rRNA序列比对结果与致病性大肠埃希氏菌的同源性达99.93%。表明该蛋鸡场发病主要是禽腺病毒4型感染所致,同时也存在致病性大肠埃希氏菌混合感染的情况。; 关键词禽腺病毒4型心包水-肝炎综合征蛋鸡; Keywords Fowl adenovirus serotype 4 Hydropericardium hepatitis syndrome Laying hen; 分类号 S858.31 [农业科学—临床兽医学] S852.659.1 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名TRIF敲除NA与BHK-21细胞系的构建及对狂犬病病毒增殖效率的影响: 3; 作者黄伟涛李家琪彭瑶殷相平郭霄峰罗均; 机构华南农业大学兽医学院中国农业科学院兰州兽医研究所/动物疫病防控全国重点实验室; 出处《华南农业大学学报》北大核心 2025年第5期627-636,共10页; 基金国家重点研发计划(2022YFD1800104) 甘肃省联合基金项目(23JRRA1481)。; 文摘【目的】通过CRISPR/Cas9技术构建β干扰素TIR结构域衔接蛋白(TIR-domain-containing adaptorinducing interferon β,TRIF)基因敲除小鼠NA细胞系与仓鼠BHK-21细胞系,评估狂犬病病毒(Rabies virus,RABV)在敲除细胞系中的增殖能力,探究TRIF在RABV感染过程中的功能。【方法】首先,设计单向导RNA(Single guide RNA,sgRNA),构建用于TRIF基因敲除的重组质粒pSpCas9-NA-TRIF-KO和pSpCas9-BHK-21-TRIF-KO,将重组质粒转染野生型NA与BHK-21细胞,通过嘌呤霉素初步筛选阳性细胞,并使用有限稀释法获得单细胞亚克隆。随后,对筛选的细胞扩大培养,并通过PCR扩增、测序以及Western blot鉴定,最终筛选TRIF敲除NA与BHK-21细胞系。最后,将RABV标准攻击毒株CVS-11与疫苗毒株BNSP-SAD分别接种TRIF敲除细胞系与野生型细胞系,通过Western blot检测病毒N蛋白的表达水平,并利用TCID50检测病毒滴度,以评估RABV在不同细胞系中的增殖能力。【结果】成功构建了用于TRIF基因敲除的重组质粒pSpCas9-NA-TRIF-KO与pSpCas9-BHK-21-TRIF-KO,并筛选鉴定出TRIF基因敲除NA细胞系与BHK-21细胞系。与野生型细胞系相比,2种TRIF敲除细胞系接种RABV CVS-11与BNSP-SAD后,N蛋白的表达量均在感染24 h后明显升高,病毒滴度同样均在感染24 h后显著上升。【结论】相较于野生型细胞系,RABV在TRIF基因敲除细胞系中的增殖能力更优,TRIF可能具有抑制病毒复制的能力。研究结果为深入研究TRIF功能提供了有力支持,也为RABV的培养与研究提供了新的细胞模型。; 关键词 CRISPR/Cas9 β干扰素TIR结构域衔接蛋白基因基因敲除狂犬病病毒; Keywords CRISPR/Cas9 TIR-domain-containing adapter-inducing interferonβgene Gene knockout Rabies virus; 分类号 Q789 [生物学—分子生物学] S855.3 [农业科学—临床兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名鹅星状病毒Ⅰ、Ⅱ型和鹅细小病毒多重荧光定量PCR检测方法的建立与应用: 4; 作者朱啟超任曼张学刚张进进张鑫龙李佳晋曲光刚李升和; 机构安徽科技学院动物科学学院中国农业科学院兰州兽医研究所/动物疫病防控全国重点实验室; 出处《中国兽药杂志》 2025年第5期1-9,共9页; 基金甘肃省科技重大专项计划(23ZDNA007)。; 文摘为建立一种可快速、特异检测鹅星状病毒Ⅰ型(GAstVⅠ)、Ⅱ型(GAstVⅡ)及鹅细小病毒(GPV)多重荧光定量PCR方法,根据GAstVⅠ型、GAstVⅡ型及GPV保守基因序列设计合成了特异性引物及三种荧光基团TaqMan探针,分别构建了带有三种病原靶基因的重组质粒标准品。通过筛选引物,优化反应条件,分析了该方法的特异性、敏感性及重复性,并进行临床样品检测评价。结果显示:该方法特异性强,能够特异检测GAstVⅠ型、GAstVⅡ型与GPV,且与其他常见鹅病病原无交叉反应;敏感性高,对GAstVⅠ型、GAstVⅡ型及GPV对相应的标准质粒最低检出限均为10拷贝/μL;重复性好,重复性试验批内及批间变异系数均小于3%;该方法对90份临床样品检测结果与已发表的三种病毒单重荧光定量PCR方法的检测结果进行比较,其中GAstVⅠ型符合率为98.89%,GAstVⅡ型符合率为96.67%,GPV符合率为96.67%。研究建立的多重荧光定量PCR检测方法能够快速、特异、灵敏的检测GAstVⅠ型、GAstVⅡ型及GPV,实现一管检多病,实用性强,效率更高,为GAstVⅠ、Ⅱ型和GPV的监测和防控提供了高效技术手段。; 关键词鹅星状病毒Ⅰ型鹅星状病毒Ⅱ型鹅细小病毒多重荧光定量PCR; Keywords GAstVⅠ GAstVⅡ GPV multiple real-time PCR; 分类号 S852.65 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名羊传染性脓疮病毒ORF047酵母双杂交诱饵载体的构建及鉴定: 5; 作者宋世斌陈国华; 机构甘肃农业职业技术学院中国农业科学院兰州兽医研究所/动物疫病防控全国重点实验室; 出处《甘肃畜牧兽医》 2024年第3期62-67,共6页; 基金国家自然科学基金“羊口疮病毒ORFV047入侵蛋白互作受体筛选、鉴定及功能研究”(31402199)。; 文摘为研究羊传染性脓疮病毒(Orf virus,ORFV)ORF047编码IMV上的膜蛋白在病毒与宿主互作过程中的功能,本研究选择pBT3-N和pBT3-SET两种不同表达特性的诱饵载体,分别成功构建了pBT3-N-ORF047、pBT3-SET-ORF047和pBT3-SETORF047-183AA三个诱饵质粒,并进行自激活作用和对酵母毒性作用的检测。结果表明:用诱饵载体pBT3-N构建的诱饵质粒pBT3-N-ORF047可用于筛选羊睾丸cDNA文库,这为后续以ORF047膜蛋白和羊睾丸细胞膜文库为研究系统、筛选病毒与宿主互作蛋白的研究奠定了基础。; 关键词羊传染性脓疮病毒 ORF047 酵母双杂交诱饵载体鉴定; 分类号 S858.26 [农业科学—临床兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名山羊痘病毒锚蛋白ORF140对NF-κB信号通路的调控作用被引量：2: 6; 作者冯秋媛余翰维杨云凤张慧韩武玮怡孙心童邵晓龙刘俊林陈国华景志忠陈轶霞; 机构西北民族大学生命科学与工程学院中国农业科学院兰州兽医研究所/动物疫病防控全国重点实验室/农业部兽医公共卫生重点实验室; 出处《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第11期5191-5199,共9页; 基金国家自然科学基金项目(32260874)。; 文摘 NF-κB通路是病毒调控宿主免疫功能的一个重要靶点,在病毒感染致病的过程中发挥重要作用。研究证明,一些痘病毒编码的锚蛋白可通过多种方式调控NF-κB通路,但山羊痘病毒编码的锚蛋白对NF-κB通路有怎样的调控作用尚未有研究报道。为了探究山羊痘病毒编码的锚蛋白ORF140对NF-κB通路的调控作用,作者通过双荧光素酶报告系统检测山羊痘病毒锚蛋白ORF140对NF-κB通路的影响;采用间接免疫荧光检测ORF140在HEK293T细胞中的定位;应用Western blot技术分别检测在NF-κB通路被激活的不同时间点ORF140对NF-κB通路相关因子的影响。结果显示:ORF140能够抑制NF-κB通路;ORF140定位于细胞质中,且在NF-κB通路被激活的情况下也未发生核移位;ORF140能够抑制NF-κB-p65的核移位与p-IκBα的降解。山羊痘病毒锚蛋白ORF140定位在细胞质中,通过抑制NF-κB-p65的核移位与p-IκBα的降解来下调NF-κB通路的活性。; 关键词山羊痘病毒锚蛋白 NF-ΚB ORF140; Keywords goat poxvirus ankyrin protein NF-κB ORF140; 分类号 S852.659.1 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名鼠痘病毒EVM135和EVM085蛋白免疫原性及抗体中和活性的鉴定被引量：1: 7; 作者高真贞蒙泽菁何小兵房永祥田慧慧陈国华景志忠; 机构中国农业科学院兰州兽医研究所/动物疫病防控全国重点实验室/农业部兽医公共卫生重点实验室兰州大学公共卫生学院; 出处《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期2468-2477,共10页; 基金中国农业科学院创新工程(CAAS-ASTIP-2019-LVRI-06)。; 文摘正痘病毒属病毒的A33和H3L蛋白是其成员共有的中和抗体的两个主要靶标。为检测鼠痘病毒(ectromelia virus,ECTV)A33和H3L蛋白同源物的免疫原性及抗体中和活性,以ECTV-Moscow株基因组DNA为模板,PCR扩增A33和H3L同源基因EVM135、EVM085目的序列,分别构建pET30a-EVM135、pET30-EVM085原核表达载体,转化Rosetta感受态细胞,IPTG诱导表达,利用镍层析柱纯化并进行逐步透析复性,免疫兔制备多克隆抗体。建立间接ELISA方法测定其抗体效价分别达1∶120000和1∶360000,Western blot和IFA证实该多克隆抗体具有良好的特异性和反应性;ECTV病毒中和试验表明抗EVM135多克隆抗体中和效价为1∶16,而抗EVM085多克隆抗体效价为1∶128。本研究通过高效表达EVM135和EVM085蛋白,并分析其免疫原性及抗体中和活性,为深入研究痘病毒致病和免疫机理,进而快速建立其诊断方法,为猴痘防控技术措施的研究奠定基础。; 关键词 A33 H3L 原核表达多克隆抗体中和活性; Keywords A33 H3L prokaryotic expression polyclonal antibody neutralizing activity; 分类号 S852.659.1 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	牛病毒性腹泻病毒遗传多样性与防控研究进展	李志孟茹付永韩元尚佑军高闪电殷宏	《动物医学进展》北大核心	2024	4	在线阅读下载PDF 职称材料
2	甘肃某规模化鸡场禽腺病毒4型感染的诊断与分析	豆玲吉艳红李鹏飞刘萍杜国玉刘志杰何继军尚佑军	《动物医学进展》北大核心	2025	0	在线阅读下载PDF 职称材料
3	TRIF敲除NA与BHK-21细胞系的构建及对狂犬病病毒增殖效率的影响	黄伟涛李家琪彭瑶殷相平郭霄峰罗均	《华南农业大学学报》北大核心	2025	0	在线阅读下载PDF 职称材料
4	鹅星状病毒Ⅰ、Ⅱ型和鹅细小病毒多重荧光定量PCR检测方法的建立与应用	朱啟超任曼张学刚张进进张鑫龙李佳晋曲光刚李升和	《中国兽药杂志》	2025	0	在线阅读下载PDF 职称材料
5	羊传染性脓疮病毒ORF047酵母双杂交诱饵载体的构建及鉴定	宋世斌陈国华	《甘肃畜牧兽医》	2024	0	在线阅读下载PDF 职称材料
6	山羊痘病毒锚蛋白ORF140对NF-κB信号通路的调控作用	冯秋媛余翰维杨云凤张慧韩武玮怡孙心童邵晓龙刘俊林陈国华景志忠陈轶霞	《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心	2024	2	在线阅读下载PDF 职称材料
7	鼠痘病毒EVM135和EVM085蛋白免疫原性及抗体中和活性的鉴定	高真贞蒙泽菁何小兵房永祥田慧慧陈国华景志忠	《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心	2023	1	在线阅读下载PDF 职称材料