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题名小麦ERF转录因子W17互作蛋白的筛选和解析
被引量：9
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作者
邱志刚
徐兆师
郑天慧
李连城
陈明
马有志
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机构
中国农业科学院作物科学研究所/农作物基金资源和基因改良国家重大科学工程/农业部作物遗传改良与育种重点开放实验室
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出处
《作物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第5期803-810,共8页
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基金
国家自然科学基金项目(30700504)
国家转基因生物新品种培育重大专项(2009ZX08009-083B和2009ZX08002-008B)资助
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文摘
来自小麦的ERF转录因子W17基因参与胁迫应答,过表达W17可显著提高转基因拟南芥的抗旱性和抗病性。本研究构建了小麦cDNA文库,通过酵母双杂技术筛选W17的互作蛋白,进一步解析ERF蛋白的作用机制。将pGBKT7-W17质粒、pGADT7和小麦文库混合转入酵母细胞AH109,在SD/-Trp/-Leu/-His/-Ade营养缺陷型平板上培养,挑选直径大于2mm的克隆,在SD/Raf/Gal/X-gal平板上划线培养,筛选蓝色克隆。将筛出的克隆测序、BLAST分析,得到4类与W17相互作用的候选蛋白,分别是胁迫相关功能蛋白、翻译后修饰蛋白、1,5-二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶(Rubisco)大亚基/小亚基以及功能未知蛋白。互作验证表明,HSP90和PPR蛋白与W17有相互作用关系。这些候选蛋白参与信号转导或免疫过程,暗示W17在植物的逆境信号转导、下游基因转录调控,甚至在翻译过程都有重要作用。
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关键词
酵母双杂交系统
ERF
蛋白互作
信号转导
小麦
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Keywords
Yeast two-hybrid system
Ethylene responsive factor （ERF）
Protein interaction
Signal transduction
Common wheat
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分类号
S512.1
[农业科学—作物学]
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