作物抗病基因工程研究进展 被引量：4

1

作者 刘宝业 张增艳 梁国鲁 《植物遗传资源学报》 CAS CSCD 2008年第2期253-257,共5页

控制植物病害的关键,取决于对植物与病原菌相互作用的分子机理的了解。将抗病基因、信号传导/调控基因、抗菌蛋白基因等导入拟改良的作物、选育抗病新品系,是当前作物抗病基因工程研究的主要策略。本文介绍利用植物抗病反应中系列重要... 控制植物病害的关键,取决于对植物与病原菌相互作用的分子机理的了解。将抗病基因、信号传导/调控基因、抗菌蛋白基因等导入拟改良的作物、选育抗病新品系,是当前作物抗病基因工程研究的主要策略。本文介绍利用植物抗病反应中系列重要基因进行作物抗病基因工程的研究进展,讨论了目前作物抗病基因工程中存在的问题及其解决的方法。 展开更多

关键词 抗病基因 信号传导/调控基因 转录因子 病程相关蛋白

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植物组织培养再生相关基因鉴定、克隆和应用研究进展 被引量：30

2

作者 叶兴国 佘茂云 +2 位作者 王轲 杜丽璞 徐惠君 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期191-201,共11页

离体植物组织体细胞胚胎发生是一个复杂的无性繁殖过程,依次经历外源植物激素信号应答、已分化细胞的脱分化、静止细胞的再分裂以及特定组织、器官原基或分生组织的形成等,是多个基因在外界因素刺激下协调、有序表达和互作的结果,不但... 离体植物组织体细胞胚胎发生是一个复杂的无性繁殖过程,依次经历外源植物激素信号应答、已分化细胞的脱分化、静止细胞的再分裂以及特定组织、器官原基或分生组织的形成等,是多个基因在外界因素刺激下协调、有序表达和互作的结果,不但受培养基中植物激素和营养成分的影响,也与外植体的生理状态关系密切。本文综述了外源激素和内源激素在植物组织培养中的作用,以及外源激素对内源激素的调节功能;重点介绍了5类与植物体细胞胚胎发生有关的候选基因,包括体细胞胚胎发生相关类受体蛋白激酶、阿拉伯葡聚糖酶、亚硝酸还原酶、生长素结合蛋白和抗氧化酶。再生相关基因的利用不但有助于提高植物组织培养植株再生率和遗传转化率,而且有助于获得安全型转基因植物,在基因工程育种中具有潜在应用前景。不同植物和同种植物不同外植体组织培养中调控体细胞胚胎发生的主效基因可能不同,关键再生相关基因的克隆和功能鉴定是今后需要加强的方向。 展开更多

关键词 植物 组织培养 体细胞胚胎发生 器官发生 再生相关基因

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植物基因启动子的克隆及其功能研究进展 被引量：87

3

作者 聂丽娜 夏兰琴 +6 位作者 徐兆师 高东尧 李琳 于卓 陈明 李连城 马有志 《植物遗传资源学报》 CAS CSCD 2008年第3期385-391,共7页

启动子在植物基因表达调控过程中起着重要作用。对于植物基因启动子的克隆及其功能研究有助于了解信号传递途径和基因表达调控模式,为植物转基因工程研究提供理论依据。本文综述了植物基因启动子的基本结构、类型、克隆方法及功能研究进... 启动子在植物基因表达调控过程中起着重要作用。对于植物基因启动子的克隆及其功能研究有助于了解信号传递途径和基因表达调控模式,为植物转基因工程研究提供理论依据。本文综述了植物基因启动子的基本结构、类型、克隆方法及功能研究进展,着重介绍了广泛应用于转基因工程的诱导型启动子及启动子功能分析,展望了今后植物启动子的研究方向。 展开更多

关键词 植物基因启动子 诱导型启动子 克隆 功能分析

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TaPIMP1过量表达提高转基因小麦纹枯病抗性的研究 被引量：8

4

作者 周淼平 周小青 +3 位作者 张增艳 董娜 马鸿翔 姚金保 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期421-426,442,共7页

小麦纹枯病是由禾谷丝核菌和立枯丝核菌引起的世界性土传真菌病害,培育并推广小麦纹枯病抗病品种是控制该病害最经济和最有效的途径。本研究采用基因枪法将由Ubiquitin启动子驱动的TaPIMP1基因导入常规小麦品种扬麦158、扬麦12号和Alond... 小麦纹枯病是由禾谷丝核菌和立枯丝核菌引起的世界性土传真菌病害,培育并推广小麦纹枯病抗病品种是控制该病害最经济和最有效的途径。本研究采用基因枪法将由Ubiquitin启动子驱动的TaPIMP1基因导入常规小麦品种扬麦158、扬麦12号和Alondra,获得转TaPIMP1基因小麦阳性植株17株;对上述转基因小麦T1和T2代植株进行PCR检测,结果表明转入的TaPIMP1基因能稳定遗传;对15株转基因T2代植株叶片中TaPIMP1的半定量RT-PCR结果显示,14个植株中的表达量均比相应的对照有不同程度的提高,表明转入的TaPIMP1基因能够在转基因小麦植株中表达;对PCR检测阳性的T2代转基因植株纹枯病抗性鉴定结果显示,大部分转基因植株由于TaPIMP1基因的导入和表达,植株的纹枯病抗性得到提高。 展开更多

关键词 小麦 转基因 TaPIMP1 纹枯病

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小麦Vp-1基因RNA干扰表达载体的构建及遗传转化 被引量：5

5

作者 高东尧 夏兰琴 +9 位作者 马有志 徐兆师 徐惠君 杜丽璞 聂丽娜 李彦舫 原亚萍 李连城 陈明 孙金海 《植物遗传资源学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期9-15,共7页

小麦成熟期穗发芽是世界性的自然灾害,严重影响小麦的产量和品质。Viviparous-1(Vp-1)是促进胚成熟和休眠的主要转录调节因子,与小麦穗发芽抗性有着密切的关系。本实验根据小麦Vp-1基因序列,以植物表达载体pAHC25为基础,成功构建了含有... 小麦成熟期穗发芽是世界性的自然灾害,严重影响小麦的产量和品质。Viviparous-1(Vp-1)是促进胚成熟和休眠的主要转录调节因子,与小麦穗发芽抗性有着密切的关系。本实验根据小麦Vp-1基因序列,以植物表达载体pAHC25为基础,成功构建了含有反向重复序列的RNA干扰表达载体pAHC-WVpRi。采用基因枪法轰击小麦品种新春9号幼胚材料1825个,共获得34株T0再生植株。利用Bar基因引物和干扰片段特异引物对再生植株进行PCR检测,获得Bar基因和干扰片段均为阳性的植株3株,转化率为0.16%。本研究为深入分析Vp-1基因功能,进而通过分子育种进行小麦穗发芽抗性的遗传改良提供了科学依据。 展开更多

关键词 成熟期穗发芽 Vp-1基因 RNAI 遗传转化

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安全型转基因植物培育技术研究进展 被引量：3

6

作者 高翔 别晓敏 +1 位作者 佘茂云 叶兴国 《植物遗传资源学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期607-612,共6页

由于关系到转基因植物的产业化前景,安全型转基因植物培育越来越受到公众的关注。在植物遗传转化体系中,绝大多数选择标记基因来源于细菌,对人类健康和环境安全存在潜在风险,因此无选择标记转基因植物培育受到科研工作者的高度重视。本... 由于关系到转基因植物的产业化前景,安全型转基因植物培育越来越受到公众的关注。在植物遗传转化体系中,绝大多数选择标记基因来源于细菌,对人类健康和环境安全存在潜在风险,因此无选择标记转基因植物培育受到科研工作者的高度重视。本文综述了安全型转基因植物的培育途径,包括共转化系统、位点特异性重组系统、转座子系统、同源重组系统、不依赖于组织培养的简易转化技术及再生相关基因利用等技术,探讨了各种途径的优缺点,以期推动安全型转基因植物培育和转基因植物产业化进程。 展开更多

关键词 转基因植物 产业化 生物安全 选择标记

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小麦WVp-1基因表达载体的Gateway技术构建及其遗传转化 被引量：1

7

作者 高东尧 夏兰芹 +6 位作者 徐兆师 马有志 李彦舫 原亚萍 李连城 陈明 孙金海 《麦类作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期189-194,共6页

为了利用中国特有的抗穗发芽小麦遗传资源,并深入分析Viviparous-1(Vp-1)基因在小麦穗发芽抗性中的作用,从抗穗发芽小麦品种西农979的干种子中分离了Vp-1基因的同源基因,命名为WVp-1。利用Gate-way技术,以植物表达载体pLeela为基础,成... 为了利用中国特有的抗穗发芽小麦遗传资源,并深入分析Viviparous-1(Vp-1)基因在小麦穗发芽抗性中的作用,从抗穗发芽小麦品种西农979的干种子中分离了Vp-1基因的同源基因,命名为WVp-1。利用Gate-way技术,以植物表达载体pLeela为基础,成功构建了含有双35S启动子的高效表达载体,并转化拟南芥突变体abi3-4,获得了8株阳性植株。 展开更多

关键词 小麦 WVp-1基因 克隆 转化

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巢式PCR检测转基因小麦的研究 被引量：2

8

作者 庄洪涛 张学文 张增艳 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2010年第19期9972-9972,9992,共2页

利用巢式PCR方法对转RSSP1-TiERF1基因的T0代小麦进行了DNA检测。结果表明,该方法对于检测基因组庞大、外源基因序列GC含量高且与内源基因同源性高的转基因小麦十分有效。

关键词 巢式PCR 纹枯病 特异性

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人工合成小麦CI191抗条锈病基因的鉴定及分子标记定位 被引量：14

9

作者 任强 刘慧娟 +4 位作者 陈洋 徐世昌 何名召 辛志勇 张增艳 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期721-727,共7页

抗病性鉴定结果表明,硬粒小麦-粗山羊草人工合成小麦CI191(CPI/GEDIZ/3/GOO//JO69/CRA/4/AE.SQ629),对我国曾经或现在流行的小麦条锈菌生理小种CY28、CY29、CY30、CY31、CY32和水源11致病类型4表现免疫或近免疫。基因推导结果显示,CI19... 抗病性鉴定结果表明,硬粒小麦-粗山羊草人工合成小麦CI191(CPI/GEDIZ/3/GOO//JO69/CRA/4/AE.SQ629),对我国曾经或现在流行的小麦条锈菌生理小种CY28、CY29、CY30、CY31、CY32和水源11致病类型4表现免疫或近免疫。基因推导结果显示,CI191对条锈菌的反应型不同于24份已知抗条锈病基因品种(系),对21个条锈菌生理小种表现抗性,对条锈病菌生理小种86107表现感病反应型(IT3)。对CI191/铭贤169杂交组合的正交、反交的F1材料以及F2代群体进行抗病鉴定与遗传分析,结果表明,CI191对条锈菌小种CY31的抗性受细胞核内的显性单基因控制。利用集群分离分析法(BSA)和简单重复序列(SSR)分子标记分析,发现7个SSR标记与YrC191连锁。构建了包含YrC191的SSR标记遗传图谱,其中Xbarc240与YrC191共分离,Xcfd65、Xbarc187、Xgwm18、Xgwm11位于Xbarc8与YrC191的同侧,与YrC191间遗传距离3.2cM,Xbarc8与YrC191间遗传距离为1.6cM,Xwmc419位于YrC191另一侧、遗传距离为3.1cM。根据SSR分子标记的遗传图谱和在中国春的缺体-四体和双端体的定位结果,将YrC191定位到小麦染色体1BS上。YrC191基因的4个SSR标记和Yr26的1个STS标记可以明显地区分YrC191与染色体1BS上的其他抗条锈病基因,如Yr24、Yr26/YrCH42、Yr10、Yr15和YrC142等。 展开更多

关键词 合成小麦 条锈病抗性基因 基因推导 遗传分析 SSR标记

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利用BSMV-VIGS技术快速分析小麦TNBL1基因的抗黄矮病功能 被引量：9

10

作者 赵丹 赵继荣 +4 位作者 黄茜 李宁 刘艳 黄占景 张增艳 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第11期2106-2110,共5页

小麦黄矮病是由蚜虫介导的大麦黄矮病毒(Barley yellow dwarfvirus,BYDV)侵染引起的小麦重要病害之一。利用cDNA-AFLP分析,筛选出在抗黄矮病小麦易位系YW642中特异表达的长度为292bp的cDNA片段,以此片段为启始序列,利用RACE和RT-PCR技... 小麦黄矮病是由蚜虫介导的大麦黄矮病毒(Barley yellow dwarfvirus,BYDV)侵染引起的小麦重要病害之一。利用cDNA-AFLP分析,筛选出在抗黄矮病小麦易位系YW642中特异表达的长度为292bp的cDNA片段,以此片段为启始序列,利用RACE和RT-PCR技术克隆出该基因的全长cDNA序列,推导该基因编码1个NBS-LRR蛋白,将其命名为TNBL1。本研究利用大麦条纹花叶病毒(BSMV)诱导的基因沉默(virus-inducing gene silencing,VIGS)技术,快速分析TNBL1是否参与小麦抗黄矮病反应。通过PCR添加酶切位点、定向酶切与连接,将TNBL1特异的292bp片段反向整合到BSMV-γ链的多克隆位点上,获得重组载体BSMV-γ:TNBL1as,体外转录BSMV-VIGS载体的3个组分(BSMV-TNBL1as、BSMV-α和BSMV-β),等量混合、摩擦接种到抗黄矮病的小麦易位系YW642幼苗叶片上,使YW642中TNBL1基因沉默,然后接种BYDV病原进行黄矮病抗性鉴定。结果表明,TNBL1基因沉默后的YW642对BYDV敏感、显现感病症状,其体内BYDV含量较未发生基因沉默的YW642中的明显增加,证明TNBL1基因是正向调控小麦抗BYDV反应的1个重要基因。 展开更多

关键词 小麦 中间偃麦草 黄矮病 病毒诱导的基因沉默 NBS-LRR

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抗纹枯病、赤霉病的转TaPIEP1基因小麦的分子鉴定与选育 被引量：7

11

作者 刘欣 蔡士宾 +7 位作者 张伯桥 周淼平 路妍 吴继中 杜丽璞 李斯深 臧淑江 张增艳 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期1144-1150,共7页

小麦纹枯病(主要病原为禾谷丝核菌)和赤霉病(主要病原为禾谷镰刀菌)已成为我国小麦生产的重要病害。TaPIEP1是从小麦中分离到的1个病原诱导的基因,其编码蛋白是可与GCC-box顺式元件结合、转录激活型的ERF转录因子。本研究以8个转TaPIEP... 小麦纹枯病(主要病原为禾谷丝核菌)和赤霉病(主要病原为禾谷镰刀菌)已成为我国小麦生产的重要病害。TaPIEP1是从小麦中分离到的1个病原诱导的基因,其编码蛋白是可与GCC-box顺式元件结合、转录激活型的ERF转录因子。本研究以8个转TaPIEP1基因小麦株系的T4和T5代植株为试材,进行了外源转TaPIEP1基因的PCR检测、Southern杂交、RT-PCR与Q-RT-PCR的分析以及纹枯病菌、赤霉病菌接种与抗性鉴定。结果表明,外源TaPIEP1基因在转基因小麦中能够稳定遗传,以单拷贝或双拷贝整合到7个转基因小麦株系基因组的不同位点;外源TaPIEP1基因在转基因小麦中能超量表达;与受体扬麦12相比,TaPIEP1表达水平高的8个转基因小麦株系对纹枯病抗性显著提高,4个株系中一些材料对赤霉病抗性显著提高,3个株系中一些材料兼抗纹枯病和赤霉病,说明TaPIEP1正向参与了小麦对纹枯病和赤霉病抗性反应,利用该基因通过基因工程可创制抗纹枯病、赤霉病的小麦新种质。 展开更多

关键词 小麦 ERF转录因子 转基因 纹枯病 赤霉病 抗性

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小麦TaPIM1基因的克隆及其转基因烟草的抗病性分析 被引量：10

12

作者 周贤尧 董娜 +2 位作者 刘红霞 张怀渝 张增艳 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期911-917,共7页

TaPIM1是从小麦中克隆获得的1个病原诱导的小麦MYB基因,编码由323个氨基酸残基组成的蛋白TaPIM1。TaPIM1具有R2R3类MYB转录因子的典型结构,即2个保守的MYBDNA结合域(R2和R3)、核定位位点和酸性激活区。TaPIM1的全长氨基酸序列与已克隆MY... TaPIM1是从小麦中克隆获得的1个病原诱导的小麦MYB基因,编码由323个氨基酸残基组成的蛋白TaPIM1。TaPIM1具有R2R3类MYB转录因子的典型结构,即2个保守的MYBDNA结合域(R2和R3)、核定位位点和酸性激活区。TaPIM1的全长氨基酸序列与已克隆MYB蛋白的一致性仅为43.69%以下,为植物MYB转录因子家族R2R3亚群的一个新成员。小麦纹枯病菌(Rhizoctonia cerealis)、根腐病菌(Bipolaris sorokiniana)侵染可快速诱导抗病小麦中TaPIM1基因的上调表达,说明TaPIM1可能参与小麦对纹枯病菌、根腐病菌的防御反应。将TaPIM1基因构建到由组成型强启动子CaMV35S控制的双子叶转化载体pBI121上,通过农杆菌介导法将其转入烟草W38品系。通过卡那霉素抗性筛选和PCR检测,鉴定出转TaPIM1基因烟草T0代株系M66、M102、M110等12个株系。对转基因烟草T1代株系进行PCR、RT-PCR分析和青枯病菌抗性分析,结果表明,TaPIM1超量表达的转基因烟草株系M66、M102和M110对青枯病菌(Ralstonia solanacearum)的抗性显著高于未转基因烟草对照,TaPIM1正向调控烟草对某些病原菌的防御反应。 展开更多

关键词 小麦 MYB转录因子 转基因烟草 青枯病抗性

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病原诱导的中间偃麦草ERF转录因子基因的克隆及其表达特性 被引量：3

13

作者 姚乌兰 张增艳 +1 位作者 陈亮 辛志勇 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第9期1405-1410,共6页

应用RT-PCR、RACE技术,从病原诱导的中间偃麦草叶片cDNA中,分离出1个编码ERF基因的全长cDNA序列,该基因暂命名为TiERF1 a,编码由292个氨基酸组成的蛋白质,具有ERF转录因子典型的结构,即保守的AP2/ERF DNA结合域、核定位位点和酸性激活区... 应用RT-PCR、RACE技术,从病原诱导的中间偃麦草叶片cDNA中,分离出1个编码ERF基因的全长cDNA序列,该基因暂命名为TiERF1 a,编码由292个氨基酸组成的蛋白质,具有ERF转录因子典型的结构,即保守的AP2/ERF DNA结合域、核定位位点和酸性激活区。TiERF1a的氨基酸序列与一个水稻ERF蛋白OsBIERF3具有66%的一致性,与拟南芥AtERF1(O80337)一致性仅39.7%,为植物ERF转录因子家族B3亚群的一个新成员。表达分析结果表明,纹枯病菌、赤霉病菌侵染可诱导TiERF1 a基因的上调表达,与防卫相关的激素乙烯、茉莉酸也可诱导该基因上调表达,且TiERF1 a对外源乙烯、茉莉酸的响应时期早于对纹枯病菌、赤霉病菌响应时期,说明TiERF1 a可能通过乙烯、茉莉酸信号途径参与寄主调控对纹枯病菌、赤霉病菌的防御反应。 展开更多

关键词 中间偃麦草 ERF转录因子 克隆 表达

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小麦抗病基因类似序列BRG1的分离与功能分析 被引量：2

14

作者 李宁 黄茜 +4 位作者 刘燕 赵丹 刘艳 黄占景 张增艳 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期998-1004,共7页

利用cDNA-AFLP技术筛选到1个在抗黄矮病的小麦-中间偃麦草易位系YW642中特异表达的小麦抗病基因类似序列(BYDV resistance-related gene1,BRG1)的基因片段。利用cDNA末端快速扩增技术(RACE)和RT-PCR技术,从YW642中分离出BRG1基因全长cDN... 利用cDNA-AFLP技术筛选到1个在抗黄矮病的小麦-中间偃麦草易位系YW642中特异表达的小麦抗病基因类似序列(BYDV resistance-related gene1,BRG1)的基因片段。利用cDNA末端快速扩增技术(RACE)和RT-PCR技术,从YW642中分离出BRG1基因全长cDNA序列,获得了一个通读的抗病同源基因cDNA序列,编码由645个氨基酸组成的蛋白质,包含1个NB-ARC保守结构域和3个LRR结构域,该蛋白属于nucleotide-site binding,leucine-rich repeats(NBS-LRR)家族。荧光定量或半定量RT-PCR表达分析表明,BRG1在抗病小麦易位系YW642叶片中优势表达,受BYDV的诱导,BYDV接种后48h表达量最高,BRG1在感病小麦亲本中8601中表达量始终较低,随BYDV接种时间延长呈轻微的下调趋势;而且外源激素水杨酸(SA)与茉莉酸(JA)处理可上调该基因在YW642中的表达。利用病毒介导的基因沉默技术分析了BRG1基因的功能,结果表明该基因沉默的抗病小麦易位系YW642中BYDV相对含量增加,但未造成抗病性表型显著改变,说明该基因参与抗黄矮病反应,但不是小麦抗黄矮病重要基因。 展开更多

关键词 小麦-中间偃麦草易位系 小麦黄矮病抗性 CDNA-AFLP 抗病基因类似序列 病毒介导的基因沉默

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大豆抗逆基因GmDREB3启动子的克隆及调控区段分析 被引量：8

15

作者 孙啸 董建辉 +5 位作者 陈明 徐兆师 叶兴国 李连城 曲延英 马有志 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第8期1475-1479,共5页

GmDREB3基因能提高转基因烟草和拟南芥的抗逆性。利用SiteFinding-PCR技术,从大豆品种铁丰8号基因组中分离到大豆抗逆基因GmDREB3启动子片段,长度1648bp。该片段富含A/T碱基,还含有TATA-box、低温响应元件MYC及其他顺式元件MYB、CAAT-bo... GmDREB3基因能提高转基因烟草和拟南芥的抗逆性。利用SiteFinding-PCR技术,从大豆品种铁丰8号基因组中分离到大豆抗逆基因GmDREB3启动子片段,长度1648bp。该片段富含A/T碱基,还含有TATA-box、低温响应元件MYC及其他顺式元件MYB、CAAT-box等。将该启动子分区段与GUS报告基因连接构建表达载体,利用基因枪法转化小麦愈伤组织,并进行干旱、高盐、低温等处理,通过组织化学染色和GUS荧光定量测定分析各区段调控元件的活性。结果表明,在干旱和低温的诱导下,该启动子能激活下游GUS基因的表达,在–285～–1117区域存在与低温和干旱应答有关的重要调控元件,在–1464～–1648区域内存在抑制启动子活性的调控元件。由此推断,在逆境条件下通过启动子区域正、负调控元件的共同作用,使GmDREB3基因的表达维持在一个恰当的水平。 展开更多

关键词 干旱应答元件结合蛋白质 启动子 顺式作用元件 瞬时表达

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植物抗病相关启动子及其研究进展 被引量：3

16

作者 李宁 樊守金 张增艳 《植物遗传资源学报》 CAS CSCD 2007年第2期234-239,共6页

启动子是调控基因表达的重要顺式元件。植物抗病相关启动子的调控特性研究、分离及其应用对于提高植物抗病性极其关键。本文综述了植物基因启动子的基本结构、克隆方法,着重介绍了组成型、组织特异型、天然与人工合成的病原诱导型启动... 启动子是调控基因表达的重要顺式元件。植物抗病相关启动子的调控特性研究、分离及其应用对于提高植物抗病性极其关键。本文综述了植物基因启动子的基本结构、克隆方法,着重介绍了组成型、组织特异型、天然与人工合成的病原诱导型启动子的研究进展,及其在植物抗病基因工程中的应用现状和存在问题,并展望了植物抗病相关启动子的应用前景。 展开更多

关键词 植物启动子 启动子类型 抗病性

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中间偃麦草转录因子TiERF1a的结合与转录调控特性的研究

17

作者 梁红霞 刘红霞 +2 位作者 张增艳 王丽丽 辛志勇 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第10期1720-1723,共4页

构建了含中间偃麦草ERF转录因子基因TiERF1a的酵母表达载体pYepGAP-TiERF1a及含GCCbox/mGCCbox和lacZ基因的酵母报告子,将pYepGAP-TiERF1a成功转到报告子酵母细胞中,对转化的酵母细胞内lacZ基因表达产物(β-半乳糖苷酶)活性进行定性和... 构建了含中间偃麦草ERF转录因子基因TiERF1a的酵母表达载体pYepGAP-TiERF1a及含GCCbox/mGCCbox和lacZ基因的酵母报告子,将pYepGAP-TiERF1a成功转到报告子酵母细胞中,对转化的酵母细胞内lacZ基因表达产物(β-半乳糖苷酶)活性进行定性和定量分析。结果表明,TiERF1a在酵母体内能与GCCbox顺式元件结合并激活下游lacZ基因的表达。本方法还可用于比较和研究其他转录因子的转录调控特性。 展开更多

关键词 ERF转录因子 转录激活特性 GCC box顺式元件 LACZ基因 Β-半乳糖苷酶

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不同生长素类型及ABA搭配对小麦幼胚再生效果的影响 被引量：10

18

作者 别晓敏 杜丽璞 +2 位作者 佘茂云 徐惠君 叶兴国 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期1023-1028,共6页

生长素是小麦幼胚产生胚性愈伤组织的关键成分,培养基中适宜的生长素种类、浓度和组合决定着小麦幼胚再生效果。本研究以小麦基因型CB037幼胚为材料,在分别确定dicamba、2,4,5-T和picloram的适宜用量的基础上,比较了2,4-D、dicamba、2,4... 生长素是小麦幼胚产生胚性愈伤组织的关键成分,培养基中适宜的生长素种类、浓度和组合决定着小麦幼胚再生效果。本研究以小麦基因型CB037幼胚为材料,在分别确定dicamba、2,4,5-T和picloram的适宜用量的基础上,比较了2,4-D、dicamba、2,4,5-T、picloram在适宜浓度下诱导再生的效果,筛选出ABA搭配2,4-D的最佳浓度组合。结果表明,dicamba、2,4,5-T和picloram的适宜用量分别为2.5mg/L、3.0mg/L和3.0mg/L,2,4-D诱导小麦幼胚再生效果最好,其次为dicamba,picloram和2,4,5-T诱导效果较差;在含有2,4-D 2.0mg/L的培养基中加入ABA 0.3mg/L能明显抑制幼胚直接萌发,显著提高胚性愈伤组织诱导率和再生率。 展开更多

关键词 小麦 幼胚 生长素 胚性愈伤组织诱导率 植株再生率

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培养基中CuSO_4和Fe盐浓度对小麦胚培养再生效果的影响 被引量：7

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作者 别晓敏 杜丽璞 +1 位作者 徐惠君 叶兴国 《植物遗传资源学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期975-981,共7页

以小麦基因型CB037、新春9号和Bobwhite为材料进行成熟胚和幼胚培养,研究了CuSO4和Fe2-EDTA对小麦组织培养再生效果的影响。结果发现,培养基中添加0.1～4.1μmol/L CuSO4对小麦成熟胚组织培养无显著效果,超过6.1μmol/L对愈伤组织有毒... 以小麦基因型CB037、新春9号和Bobwhite为材料进行成熟胚和幼胚培养,研究了CuSO4和Fe2-EDTA对小麦组织培养再生效果的影响。结果发现,培养基中添加0.1～4.1μmol/L CuSO4对小麦成熟胚组织培养无显著效果,超过6.1μmol/L对愈伤组织有毒害作用;培养基中添加40μmol/L Fe盐对小麦成熟胚组织培养和植株再生具有促进作用;不同小麦基因型其幼胚培养对Fe盐的反应不同,40μmol/L～50μmol/L Fe盐处理对CB037幼胚再生效果最好,20μmol/L Fe盐浓度对新春9号和Bobwhite幼胚再生效果较好,高浓度铁盐抑制作用显著;在相同培养条件下,CB037幼胚再生率最高,新春9号次之,Bob-white最低。 展开更多

关键词 小麦 组织培养 CUSO4 Fe盐

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病原诱导的小麦ERF转录因子TaERF1b的原核表达及纯化 被引量：7

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作者 董娜 张增艳 辛志勇 《植物遗传资源学报》 CAS CSCD 2008年第3期283-287,共5页

为了得到纯化的TaERF1b活性蛋白,将TaERF1 b基因含有AP2/ERF结构域的片段插入原核表达载体pGEX-4T-1的多克隆位点中,构建GST-TaERF1b融合蛋白表达载体,并转化到大肠杆菌BL21(DE3)中。0.1mmol/L IPTG即能诱导融合蛋白表达,37℃诱导4h或3... 为了得到纯化的TaERF1b活性蛋白,将TaERF1 b基因含有AP2/ERF结构域的片段插入原核表达载体pGEX-4T-1的多克隆位点中,构建GST-TaERF1b融合蛋白表达载体,并转化到大肠杆菌BL21(DE3)中。0.1mmol/L IPTG即能诱导融合蛋白表达,37℃诱导4h或30℃诱导8h,融合蛋白均以包涵体的形式表达,16℃诱导12h,融合蛋白不表达。包涵体经溶解及稀释复性后,过GST亲和层析柱,获得纯化的融合蛋白,考马斯亮蓝法测得纯化蛋白的浓度约为0.5μg/μl,凝胶阻滞实验表明包涵体复性成功,所得蛋白具有生物活性。 展开更多

关键词 ERF(ethylene-responsive factor) TaERFlb 原核蛋白表达 包涵体

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