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几种动物来源的蜱携带的细菌和原虫的检测 被引量:3
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作者 姚佳玲 陈兆国 龚海燕 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2021年第3期107-113,共7页
蜱是一类呈全球分布,种类繁多,宿主广泛的嗜血性体外寄生虫,且携带和传播病毒、细菌、立克次体、螺旋体、寄生虫等170多种病原,给人类健康、畜牧业生产及野生动物生存带来极大威胁。我国地形复杂,气候多变,蜱种及其携带的微生物也繁杂... 蜱是一类呈全球分布,种类繁多,宿主广泛的嗜血性体外寄生虫,且携带和传播病毒、细菌、立克次体、螺旋体、寄生虫等170多种病原,给人类健康、畜牧业生产及野生动物生存带来极大威胁。我国地形复杂,气候多变,蜱种及其携带的微生物也繁杂而难以防控。为了充分了解我国不同地区的动物体表蜱的种类及其携带的微生物和原虫,本研究对河北、河南、湖北及上海采集的蜱样本进行了分子生物学鉴定,并对蜱体内携带的微生物和原虫进行扩增子测序和分析。结果显示:动物体表获得的蜱共有4种,长角血蜱(Haemaphysalis longicornis)、图兰扇头蜱(Rhipicephalus turanicus)、血红扇头蜱(Rhipicephalus sanguineus)和微小牛蜱(Rhipicephalus microplus);经16S rDNA测序分析,在所有蜱中共鉴定得到16个门的微生物类群,其中丰度最高的是变形菌门,其次为厚壁菌门和芽单胞菌门;所检测的蜱样本均携带葡萄球菌属等人兽共患病原菌和柯克斯体属共生菌;18S rDNA测序表明,河北犬羊及湖北牛体表的蜱均携带巴贝斯虫,而河北羊体表的蜱携带泰勒虫。此结果揭示了蜱种存在地域性差异,蜱携带微生物和原虫有感染当地动物和人的危险,为蜱及蜱传病的防控提供了警示信息。 展开更多
关键词 扩增子测序 微生物 原虫
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柔嫩艾美耳球虫泛素蛋白功能初步研究
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作者 李志行 朱顺海 +6 位作者 赵其平 韩红玉 王璐 刘桂玲 赵焕之 黄兵 董辉 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2022年第1期6-14,共9页
泛素是真核生物中普遍存在的一种小分子蛋白,广泛参与细胞内蛋白质的平衡代谢过程,对维持细胞内环境的稳态具有重要作用。为研究泛素在柔嫩艾美耳球虫中的功能,本研究利用PCR方法克隆了柔嫩艾美耳球虫泛素(Et Ub)基因,将其亚克隆至原核... 泛素是真核生物中普遍存在的一种小分子蛋白,广泛参与细胞内蛋白质的平衡代谢过程,对维持细胞内环境的稳态具有重要作用。为研究泛素在柔嫩艾美耳球虫中的功能,本研究利用PCR方法克隆了柔嫩艾美耳球虫泛素(Et Ub)基因,将其亚克隆至原核表达载体pET28a(+),转入大肠杆菌BL21,诱导表达制备rEt Ub蛋白,用纯化的重组蛋白免疫新西兰白兔获得多克隆抗体。用qPCR和Western blot方法检测柔嫩艾美耳球虫不同发育阶段EtUb基因的转录和蛋白质翻译水平。结果显示:EtUb基因在柔嫩艾美耳球虫第二代裂殖子中的转录和翻译水平均高于未孢子化卵囊、孢子化卵囊和子孢子阶段;间接免疫荧光实验显示该蛋白主要分布于子孢子和第二代裂殖子的顶端表面;抗体入侵抑制实验显示兔抗rEt Ub-IgG能明显抑制子孢子入侵BHK细胞,浓度为300μg/mL时,抑制率达到36%;免疫共沉淀实验共筛选出10个与Et Ub潜在互作的虫体蛋白,包括Myosin A、Microneme protein 3等。研究结果为深入研究EtUb基因在球虫中的功能奠定了基础。 展开更多
关键词 柔嫩艾美耳球虫 泛素 入侵 互作蛋白
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日本血吸虫融合表达抗原rSjELAV-like 1和rSjELAV-like 2的免疫保护研究
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作者 秦芳林 李肖纯 +3 位作者 程贵凤 吴洛滨 任雨琪 金亚美 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2020年第4期65-70,共6页
本研究通过克隆、表达、纯化日本血吸虫胚胎致死异常视觉基因1和2(SjELAV-like 1和SjELAV-like 2),并将获得的纯化蛋白rSjELAV-like 1和rSjELAV-like 2与206佐剂混合免疫BALB/c小鼠,评估rSjELAV-like 1和rSjELAV-like 2的免疫保护效果... 本研究通过克隆、表达、纯化日本血吸虫胚胎致死异常视觉基因1和2(SjELAV-like 1和SjELAV-like 2),并将获得的纯化蛋白rSjELAV-like 1和rSjELAV-like 2与206佐剂混合免疫BALB/c小鼠,评估rSjELAV-like 1和rSjELAV-like 2的免疫保护效果。结果显示:rSjELAV-like 1和rSjELAV-like 2在减轻宿主虫荷和肝卵方面均有一定的免疫保护作用,rSjELAV-like 2免疫可明显影响虫卵孵化能力;在第1次免疫后rSjELAV-like 2 的特异性IgG抗体水平与对照相比,呈显著升高,具有统计学意义。本研究结果表明,rSjELAV-like 2 比rSjELAV-like 1更适合作为疫苗候选分子,为日本血吸虫疫苗的研发奠定了物质基础。 展开更多
关键词 日本血吸虫 rSjELAV-like 1 rSjELAV-like 2 免疫保护
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蜱与巴贝斯虫之间互作分子的研究进展
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作者 姚佳玲 龚海燕 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2020年第4期96-102,共7页
蜱(Ticks)是专性吸血的体外寄生虫,其在吸血过程一方面会造成宿主的皮肤损伤和血液流失,另一方面会引起人畜的蜱传病感染,给畜牧业经济和人类健康带来的影响日益严重。巴贝斯虫(Babesia)是由蜱传播的重要血液原虫之一,会引起人和宿主动... 蜱(Ticks)是专性吸血的体外寄生虫,其在吸血过程一方面会造成宿主的皮肤损伤和血液流失,另一方面会引起人畜的蜱传病感染,给畜牧业经济和人类健康带来的影响日益严重。巴贝斯虫(Babesia)是由蜱传播的重要血液原虫之一,会引起人和宿主动物发热、贫血、血尿,甚至死亡,严重危害人类健康,阻碍巴贝斯虫在蜱体内的携带和传播是防范人畜感染的第一道屏障。本文综述了蜱-巴贝斯虫相互作用的分子,包括蜱中肠中的线粒体电压依赖性阴离子选择性通道多肽(VDAC)、半胱氨酸蛋白酶抑制剂(cystatin)等分子,卵巢中的免疫亲和素、卵黄蛋白原受体等分子,以及巴贝斯虫的转甲基酶、HAP2等,以期为后续蜱-巴贝斯虫的互作机制研究提供参考,进一步为蜱和巴贝斯虫疫苗和药物的研发提供信息和基础。 展开更多
关键词 巴贝斯虫 互相作用
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日本血吸虫7d童虫cDNA文库构建及免疫筛选
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作者 韩宏晓 洪炀 +2 位作者 傅志强 彭金彪 林矫矫 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2020年第2期92-97,共6页
为了从7 d童虫cDNA文库筛选出童虫发育阶段特异性表达抗原基因。本研究首先构建了日本血吸虫7 d童虫cDNA文库,其次再采用日本吸血虫感染血清进行筛选。结果显示:建立的文库插入片段为0.5~3.0 kb,文库重组率为98%,初始文库滴度为2.4×... 为了从7 d童虫cDNA文库筛选出童虫发育阶段特异性表达抗原基因。本研究首先构建了日本血吸虫7 d童虫cDNA文库,其次再采用日本吸血虫感染血清进行筛选。结果显示:建立的文库插入片段为0.5~3.0 kb,文库重组率为98%,初始文库滴度为2.4×10~6 pfu/mL,扩增后滴度为1.6×10~9 pfu/mL,利用感染日本血吸虫10 d和42 d的小鼠血清免疫筛选该文库,初筛和复筛后获得17条有效EST序列,其编码7个基因,分别为复制蛋白(2 ESTs)、肝再生增强因子(3 ESTs)、血小板活化因子(6 ESTs)、钙调理蛋白基因(3 EST)、丝束蛋白(1 ESTs)、核糖体RNA(1 EST)和还原型辅酶脱氢酶基因(1 EST)。该研究结果对今后探讨血吸虫的生长发育机制及筛选血吸虫早期诊断抗原具有重要意义。 展开更多
关键词 日本血吸虫 童虫cDNA文库 免疫学筛选
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免疫共沉淀联合质谱技术筛选柔嫩艾美耳球虫钙依赖蛋白激酶3互作蛋白 被引量:3
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作者 赵焕之 赵其平 +6 位作者 朱顺海 王璐 刘桂玲 李志行 董辉 黄兵 韩红玉 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2020年第5期1-7,共7页
为探究柔嫩艾美耳球虫钙依赖蛋白激酶3(EtCDPK3)在钙离子信号通路中是如何将信号传递给下游效应分子,进一步促进虫体入侵宿主细胞的机制,以柔嫩艾美耳球虫子孢子蛋白及其单克隆抗体和多克隆抗体为实验材料,利用免疫共沉淀技术筛选EtCDPK... 为探究柔嫩艾美耳球虫钙依赖蛋白激酶3(EtCDPK3)在钙离子信号通路中是如何将信号传递给下游效应分子,进一步促进虫体入侵宿主细胞的机制,以柔嫩艾美耳球虫子孢子蛋白及其单克隆抗体和多克隆抗体为实验材料,利用免疫共沉淀技术筛选EtCDPK3的互作蛋白并进行质谱鉴定分析,使用Maxquant软件对获得的原始数据进行分析。SDS-PAGE结果显示,与阴性对照组相比,2个样品组出现差异条带;免疫共沉淀洗脱液质谱鉴定分析结果显示,获得6个可能与EtCDPK3相互作用的相关蛋白。以上实验结果为进一步深入研究EtCDPK3在柔嫩艾美耳球虫入侵宿主细胞过程中的作用奠定基础。 展开更多
关键词 柔嫩艾美耳球虫 钙依赖蛋白激酶3 免疫共沉淀 质谱 互作蛋白
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快速震荡法分离培养东方田鼠腹腔巨噬细胞 被引量:1
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作者 何静 杨珊珊 +6 位作者 黄明月 张倩 洪炀 林矫矫 柏熊 谢建芸 傅志强 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2022年第4期99-103,共5页
为建立一种东方田鼠腹腔巨噬细胞体外分离培养的简便方法,本研究应用DMEM灌洗东方田鼠腹腔后快速水平振荡,分离培养并贴壁筛选纯化巨噬细胞,利用HE染色和墨汁吞噬试验鉴定细胞,通过细胞内酸性磷酸酶及α-醋酸奈酚酯酶染色鉴定细胞活性... 为建立一种东方田鼠腹腔巨噬细胞体外分离培养的简便方法,本研究应用DMEM灌洗东方田鼠腹腔后快速水平振荡,分离培养并贴壁筛选纯化巨噬细胞,利用HE染色和墨汁吞噬试验鉴定细胞,通过细胞内酸性磷酸酶及α-醋酸奈酚酯酶染色鉴定细胞活性。结果显示:获得了大量高纯度的腹腔巨噬细胞,细胞形态正常,活细胞比例为98%,细胞培养3 d后具有良好的吞噬功能,胞质内含有较丰富的水解酶。结果表明,快速震荡法是简易实用的东方田鼠腹腔巨噬细胞分离培养方法,为研究巨噬细胞在抗性机制中的作用提供了基础。 展开更多
关键词 东方田鼠 巨噬细胞 分离培养 鉴定
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