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题名木聚糖酶基因的克隆与表达
被引量：2
- 1
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作者
宋立立
顿宝庆
张亚楠
田景汉
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机构
沧州师范学院生命科学学院
中国农业科学研究院作物科学研究所/国家农作物基因资源与基因改良重大科学工程/生物质能源研究中心
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出处
《江苏农业科学》
2018年第10期43-46,共4页
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基金
公益性行业(农业)科研专项(编号:201503135-16)
河北省科技计划(编号:16273306)
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文摘
用PCR技术从桔青霉基因组DNA反转录扩增得到木聚糖酶编码基因xyl,并构建基因表达载体p PAL7-xyl重组质粒,转化受体菌E.coli BL21进行原核表达分析。IPTG诱导6 h酶活性达到最高,为2.07 IU/m L;表达产物进行SDS-PAGE电泳分析,在22 ku处呈现蛋白条带,与理论的蛋白大小相一致,37℃条件下诱导6 h蛋白表达量最高;同时进行构建基因表达载体p PIC9K-xyl重组质粒,转化受体菌毕赤酵母GS115作真核表达分析,经甲醇诱导96 h后酶活性达到最高,为23.84 IU/m L。
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关键词
木聚糖酶
基因克隆
基因表达
酶活性
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分类号
S188.3
[农业科学—农业基础科学]
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题名果胶裂解酶基因与木聚糖酶基因的共表达
被引量：1
- 2
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作者
宋立立
顿宝庆
张亚楠
张兆英
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机构
沧州师范学院生命科学学院
中国农业科学研究院作物科学研究所/国家农作物基因资源与基因改良重大科学工程/生物质能源研究中心
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出处
《江苏农业科学》
2018年第17期46-48,共3页
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基金
公益性行业(农业)科研专项(编号:201503135-16)
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文摘
利用重叠引物PCR方法将从海栖热袍杆菌中克隆得到的果胶裂解酶基因和从桔青霉CR-2菌株中克隆得到的木聚糖酶基因做重叠引物PCR扩增,扩增后得到融合基因plyxyl,将其构建载体后转化到大肠杆菌菌株BL21,克隆子经IPTG诱导在原核系统中实现了表达,p H值为中性,诱导6 h后最高酶活性分别达30.11 U/m L、2.03 IU/m L。
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关键词
果胶裂解酶基因
木聚糖酶基因
原核系统
共表达
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分类号
S188
[农业科学—农业基础科学]
Q786
[生物学—分子生物学]
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