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促红细胞生成素基因表达载体的构建及其在CHO细胞中表达的研究被引量：2: 1; 作者崔振中沈恒 +2 位作者刘维全刘朋朋齐顺章《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 1998年第6期691-696,共6页; 用从基因文库中所克隆的促红细胞生成素（ＥＰＯ）基因组基因，构建了３种由不同启动子调控的表达载体——ｐＯＰ１３／ＥＰＯ，ｐＲＳＶ／ＥＰＯ，ｐＣＭＶ／ＥＰＯ，在这３个表达载体的构建过程中对基因的转录起始效率、内含子的剪接... 展开更多; 关键词促红细胞生成素 CHO细胞瞬时表达稳定表达; 在线阅读下载PDF 职称材料

人促红细胞生成素基因组基因的克隆及全序列分析被引量：1: 2; 作者崔振中寿思明 +2 位作者朱宝利刘朋朋齐顺章《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 1998年第6期684-690,共7页; 为了克隆到全长的人促红细胞生成素基因，从而在真核系统中及转基因动物乳腺中进行表达，从一个中国人的血细胞中提取基因组ＤＮＡ，构建了不完全基因组噬菌体文库，文库效价为５×１０４．这种文库的构建方法是用ＢａｍＨⅠ对基因... 展开更多; 关键词基因文库促红细胞生成素 PCR 序列分析 EPO 人; 在线阅读下载PDF 职称材料

GFP-pl6融合基因表达载体的构建: 3; 作者李华刘维全 +2 位作者崔振中金春元王太一《中国实验动物学报》 CAS CSCD 1997年第2期125-128,共4页; 本文报道了以ＧＦＰ（绿色荧光蛋白）基因为报告基因，ｐｌ６基因为目的基因，将ｐｌ６基因分别插入ＧＦＰ基因的上游和下游，构建成ＧＦＰ－ｐｌ６融合基因表达载体ｐＣｐｌ６Ｇ和ｐＣＧｐ１６，并通过酶切、电泳技术对重组体进行了鉴定。; 关键词融合基因表达载体转基因动物模型 P16基因 GFP基因 CG 构建目的基因重组体绿色荧光蛋白; 在线阅读下载PDF 职称材料

GFP转基因指示系统建立的研究被引量：5: 4; 作者李华刘维全 +4 位作者涂长春崔振中莫日根苟鸿鹰王太一《中国实验动物学报》 CAS CSCD 1998年第1期51-55,共5页; ＧＦＰ（绿色荧光蛋白）是存在于发光水母体内的一种吸收蓝光或紫外光（３９５ｎｍ）后能够发出绿色荧光的天然蛋白质。本文报道了将ＧＦＰ表达质粒导入ＢＨＫ、ＤＫ、ＲＫ等真核细胞，建立ＧＦＰ真核细胞转基因指示系统。研究表明，Ｇ... 展开更多; 关键词突变型 GFP 真核细胞体内转染野生型观察水母绿色荧光蛋白转基因; 全文增补中

GFP-p16融合基因表达载体在BHK HeLa细胞中荧光蛋白表达的研究: 5; 作者李华王禄增 +2 位作者刘维全崔振中王太一《中国实验动物学杂志》 1998年第1期10-13,共4页; 本文报道了通过脂质体转染技术将本室构建成的ＧＦＰ－ｐ１６融合基因表达载体ｐＣｐ１６Ｇ和ｐＣＧｐ１６分别导入ＢＨＫ、ＨｅＬａ细胞中，研究它们在真核细胞中荧光蛋白的表达。结果表明，外源脂质体对ＢＨＫ、ＨｅＬａ等真核细胞无... 展开更多; 关键词 HELA细胞表达载体融合基因荧光蛋白脂质体转染真核细胞 p16基因 GFP基因外源基因细胞基因; 全文增补中

用富集文库克隆人胰岛素基因组基因被引量：1: 6; 作者寿思明朱宝利齐顺章《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 1999年第2期194-199,共6页; 通过构建可富集人胰岛素基因的λ噬菌体文库，克隆了人胰岛素基因组基因．首先从中国人血液白细胞中提取到人基因组ＤＮＡ，用ＥｃｏＲⅠ和ＢｇｌⅡ对基因组ＤＮＡ进行全酶切，经０．４％琼脂糖凝胶电泳，特异回收９．５ｋｂ左右的ＤＮ... 展开更多; 关键词基因文库人胰岛素基因序列分析; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名促红细胞生成素基因表达载体的构建及其在CHO细胞中表达的研究被引量：2: 1; 作者崔振中沈恒刘维全刘朋朋齐顺章; 机构中国农业大学生物学院动物生化室北京医科大学基础医学院神经科学中心; 出处《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 1998年第6期691-696,共6页; 基金国家自然科学基金; 文摘用从基因文库中所克隆的促红细胞生成素（ＥＰＯ）基因组基因，构建了３种由不同启动子调控的表达载体——ｐＯＰ１３／ＥＰＯ，ｐＲＳＶ／ＥＰＯ，ｐＣＭＶ／ＥＰＯ，在这３个表达载体的构建过程中对基因的转录起始效率、内含子的剪接、５′非翻译区和３′非翻译区对基因表达的影响等因素都加以考虑．用脂质体转染法分别将上述３个载体导入ＣＨＯ细胞，经瞬时表达，用ＥＬＩＳＡ方法检测，表达量分别为１９０ｍＩＵ／ｍｌ、１６０ｍＩＵ／ｍｌ、４４７ｍＩＵ／ｍｌ．用表达载体ｐＯＰ１３／ＥＰＯ转染ＣＨＯ－Ｋ１２细胞，在４００μｇ／ｍｌ的Ｇ４１８浓度下筛选稳定表达细胞克隆，获得了表达量约为１６０ＩＵ／１０６细胞（４８ｈ）的Ｃ１０细胞株．表达产物经Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ检测发现了ＥＰＯ阳性条带．用ＴＦ－１细胞对ＥＰＯ进行了生物活性检测，初步证实所表达的ＥＰＯ有生物活性．; 关键词促红细胞生成素 CHO细胞瞬时表达稳定表达; Keywords Erythropoietin CHO cell Transient expression Stable expression; 分类号 Q753 [生物学—分子生物学] Q57 [生物学—生物化学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名人促红细胞生成素基因组基因的克隆及全序列分析被引量：1: 2; 作者崔振中寿思明朱宝利刘朋朋齐顺章; 机构中国农业大学生物学院动物生化室北京医科大学神经科学研究中心; 出处《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 1998年第6期684-690,共7页; 基金国家自然科学基金; 文摘为了克隆到全长的人促红细胞生成素基因，从而在真核系统中及转基因动物乳腺中进行表达，从一个中国人的血细胞中提取基因组ＤＮＡ，构建了不完全基因组噬菌体文库，文库效价为５×１０４．这种文库的构建方法是用ＢａｍＨⅠ对基因组ＤＮＡ进行完全酶切，回收１０．５ｋｂ左右的酶切片段，插入到λ－噬菌体ＥＭＢＬ３载体中．筛选文库所使用的探针是用ＰＣＲ方法从基因组ＤＮＡ模板中扩增的５５６ｂｐ的ＥＰＯ基因片段．从该文库中筛选到了一个含有完整ＥＰＯ基因的插入片段长度为１２．５ｋｂ的阳性克隆．经全序列分析证实，所克隆的ＥＰＯ基因编码正确，但在５′－侧翼及第一内含子处与国外发表的序列相比较，发现两处核苷酸差异，这两个核苷酸的差异改变了５′－调控区的两个小的开放阅读框——ＯＲＦ１和ＯＲＦ３，其在基因表达调探方面的作用值得进一步探讨．; 关键词基因文库促红细胞生成素 PCR 序列分析 EPO 人; Keywords Gene library,Erythropoietin,PCR,Sequencing; 分类号 Q523 [生物学—生物化学] Q57 [生物学—生物化学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名GFP-pl6融合基因表达载体的构建: 3; 作者李华刘维全崔振中金春元王太一; 机构中国医科大学实验动物学部解放军农牧大学军事兽医研究所病毒室中国农业大学生物学院动物生化室; 出处《中国实验动物学报》 CAS CSCD 1997年第2期125-128,共4页; 文摘本文报道了以ＧＦＰ（绿色荧光蛋白）基因为报告基因，ｐｌ６基因为目的基因，将ｐｌ６基因分别插入ＧＦＰ基因的上游和下游，构建成ＧＦＰ－ｐｌ６融合基因表达载体ｐＣｐｌ６Ｇ和ｐＣＧｐ１６，并通过酶切、电泳技术对重组体进行了鉴定。; 关键词融合基因表达载体转基因动物模型 P16基因 GFP基因 CG 构建目的基因重组体绿色荧光蛋白; Keywords GFP gene pl6 gene Fusion gene Expressionvector; 分类号 Q78 [生物学—分子生物学] Q786 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名GFP转基因指示系统建立的研究被引量：5: 4; 作者李华刘维全涂长春崔振中莫日根苟鸿鹰王太一; 机构中国医科大学实验动物学部解放军农牧大学军事兽医研究所病毒室中国农业大学生物学院动物生化室; 出处《中国实验动物学报》 CAS CSCD 1998年第1期51-55,共5页; 文摘ＧＦＰ（绿色荧光蛋白）是存在于发光水母体内的一种吸收蓝光或紫外光（３９５ｎｍ）后能够发出绿色荧光的天然蛋白质。本文报道了将ＧＦＰ表达质粒导入ＢＨＫ、ＤＫ、ＲＫ等真核细胞，建立ＧＦＰ真核细胞转基因指示系统。研究表明，ＧＦＰ在ＢＨＫ、ＤＫ、ＲＫ等传代细胞中表达的最佳条件是３３℃，ｐＨ７．２、５％ＣＯ２和转染后４８ｈ观察等。并对野生型ＧＦＰ和突变型ＧＦＰ的发光强度进行了比较，结果表明，在相同条件下。; 关键词突变型 GFP 真核细胞体内转染野生型观察水母绿色荧光蛋白转基因; Keywords GFP gene Transgenic Reporter system; 分类号 Q78 [生物学—分子生物学] R735.7 [医药卫生—肿瘤]; 全文增补中

题名GFP-p16融合基因表达载体在BHK HeLa细胞中荧光蛋白表达的研究: 5; 作者李华王禄增刘维全崔振中王太一; 机构中国医科大学实验动物学部解放军农牧大学军事兽医研究所病毒室中国农业大学生物学院动物生化室; 出处《中国实验动物学杂志》 1998年第1期10-13,共4页; 文摘本文报道了通过脂质体转染技术将本室构建成的ＧＦＰ－ｐ１６融合基因表达载体ｐＣｐ１６Ｇ和ｐＣＧｐ１６分别导入ＢＨＫ、ＨｅＬａ细胞中，研究它们在真核细胞中荧光蛋白的表达。结果表明，外源脂质体对ＢＨＫ、ＨｅＬａ等真核细胞无损伤，经斑点杂交检测证明，外源基因可以通过脂质体转染技术整合到细胞基因组中。研究结果还表明，ｐ１６基因与ＧＦＰ基因的３′端连接，可以保持ＧＦＰ的荧光特性，表达荧光蛋白，而与ＧＦＰ基因的５′端连接，则不能表达荧光。; 关键词 HELA细胞表达载体融合基因荧光蛋白脂质体转染真核细胞 p16基因 GFP基因外源基因细胞基因; 分类号 Q78 [生物学—分子生物学] R379.5 [医药卫生—病原生物学]; 全文增补中

题名用富集文库克隆人胰岛素基因组基因被引量：1: 6; 作者寿思明朱宝利齐顺章; 机构中国农业大学生物学院动物生化室; 出处《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 1999年第2期194-199,共6页; 文摘通过构建可富集人胰岛素基因的λ噬菌体文库，克隆了人胰岛素基因组基因．首先从中国人血液白细胞中提取到人基因组ＤＮＡ，用ＥｃｏＲⅠ和ＢｇｌⅡ对基因组ＤＮＡ进行全酶切，经０．４％琼脂糖凝胶电泳，特异回收９．５ｋｂ左右的ＤＮＡ片段．将该片段与λＥＭＢＬ３／ＢａｍＨⅠ臂连接，构建成一个特殊的人基因组λ噬菌体文库（富集文库），效价为２×１０４．同时采用ＰＣＲ方法及用引物Ⅰ：５′ＧＧＡＣＡＧＧＣＴＡＣＡＴＣＡＧＧＡＡＧＡＧＧ３′，引物Ⅱ：５′ＣＴＧＣＧＴＣＴＡＡＴＴＧＣＡＧＴＡＧＴＴＣ３′，从人基因组ＤＮＡ中扩增出一段含胰岛素基因的１．３６ｋｂＤＮＡ片段，做为放射性标记探针，对文库进行了噬菌斑原位杂交筛选，从１×１０４个噬菌斑中筛选到一个含人胰岛素基因组基因的阳性克隆，并进一步完成了亚克隆和该基因１７３２ｂｐＤＮＡ序列的测定．; 关键词基因文库人胰岛素基因序列分析; Keywords Human insulin gene,Sequencing,Gene library,Enrichment; 分类号 Q78 [生物学—分子生物学] Q578 [生物学—生物化学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	促红细胞生成素基因表达载体的构建及其在CHO细胞中表达的研究	崔振中沈恒刘维全刘朋朋齐顺章	《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD	1998	2	在线阅读下载PDF 职称材料
2	人促红细胞生成素基因组基因的克隆及全序列分析	崔振中寿思明朱宝利刘朋朋齐顺章	《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD	1998	1	在线阅读下载PDF 职称材料
3	GFP-pl6融合基因表达载体的构建	李华刘维全崔振中金春元王太一	《中国实验动物学报》 CAS CSCD	1997	0	在线阅读下载PDF 职称材料
4	GFP转基因指示系统建立的研究	李华刘维全涂长春崔振中莫日根苟鸿鹰王太一	《中国实验动物学报》 CAS CSCD	1998	5	全文增补中
5	GFP-p16融合基因表达载体在BHK HeLa细胞中荧光蛋白表达的研究	李华王禄增刘维全崔振中王太一	《中国实验动物学杂志》	1998	0	全文增补中
6	用富集文库克隆人胰岛素基因组基因	寿思明朱宝利齐顺章	《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD	1999	1	在线阅读下载PDF 职称材料