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禽脑脊髓炎病毒单克隆抗体的制备及鉴定 被引量:4
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作者 杨建民 秦卓明 +2 位作者 苏敬良 赵继勋 赵德明 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期191-194,共4页
选用AEV(VR株 )CEF适应毒制备抗原 ,免疫Balb/c小鼠。应用杂交瘤技术以间接ELISA方法筛选获得一株分泌抗AEV(VR)单克隆抗体的杂交瘤细胞。制备细胞上清及腹水进行单抗特性鉴定 ,经染色体计数、免疫球蛋白类及亚类测定、特异性试验、稳... 选用AEV(VR株 )CEF适应毒制备抗原 ,免疫Balb/c小鼠。应用杂交瘤技术以间接ELISA方法筛选获得一株分泌抗AEV(VR)单克隆抗体的杂交瘤细胞。制备细胞上清及腹水进行单抗特性鉴定 ,经染色体计数、免疫球蛋白类及亚类测定、特异性试验、稳定性试验、SDS PAGE电泳 ,表明该杂交瘤细胞染色体数目介于 90~ 110之间 ,该单克隆抗体亚类为IgG2a,分子量为 142KD ,ELISA测定细胞上清效价为 1∶1× 10 4 ,腹水效价为 1∶1× 10 6,与其它病原无交叉反应 ,抗体分泌稳定。 展开更多
关键词 禽脑脊髓炎 单克隆抗体 制备 鉴定
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鸡毒支原体DNA限制性内切酶分析 被引量:2
2
作者 郭建华 陈德威 +1 位作者 陈明勇 张冰 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第6期560-563,共4页
应用限制性内切酶BamHI、EcoRI和HindⅢ消化鸡毒支原体DNA,其电泳图谱能区别鸡毒支原体各株,比十二烷基磺酸钠—聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS—PAGE)更敏感,表明限制性内切酶分析为鉴别鸡毒支原体毒株,进行分... 应用限制性内切酶BamHI、EcoRI和HindⅢ消化鸡毒支原体DNA,其电泳图谱能区别鸡毒支原体各株,比十二烷基磺酸钠—聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS—PAGE)更敏感,表明限制性内切酶分析为鉴别鸡毒支原体毒株,进行分子流行病学调查及确定在商品代鸡中是否疫苗株代替了MG野毒株提供了非常有用的工具。 展开更多
关键词 鸡毒支原体 限制性内切酶 DNA
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单抗捕捉ELISA检测AEV抗体方法的研究 被引量:5
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作者 杨建民 秦卓明 +2 位作者 苏敬良 赵继勋 郝永新 《动物医学进展》 CSCD 2002年第1期72-75,共4页
本研究初步建立了检测AEV抗体的单抗捕捉ELISA 方法。AEV腹水单抗(腹水效价为1 ∶1×106)最佳稀释度为1∶200,AEV抗原工作浓度为16.08 μg/mL,血清稀释度为1∶1 00, 兔抗鸡酶标抗体... 本研究初步建立了检测AEV抗体的单抗捕捉ELISA 方法。AEV腹水单抗(腹水效价为1 ∶1×106)最佳稀释度为1∶200,AEV抗原工作浓度为16.08 μg/mL,血清稀释度为1∶1 00, 兔抗鸡酶标抗体工作浓度为1∶500。经阻断试验、交叉试验、重复试验,以及与进口试剂 盒 进行平行检测40份血清,总符合率为92.5%,表明该方法特异性强、重复性好、敏感性高, 是一种有应用前景的方法。 展开更多
关键词 禽脑脊髓炎 单克隆抗体 单抗捕捉ELISA 抗体检测
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鸡毒支原体S6株基因文库的构建 被引量:6
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作者 郭建华 陈德威 杨百亮 《中国兽药杂志》 北大核心 1998年第1期6-8,共3页
用限制性内切酶EcoRI对鸡毒支原体MGS6进行酶切消化,并在表达载体噬菌体λgt11中构建了MGS6的基因文库。按照对载体LacZ基因的插入失活作用结果,所得到的噬菌体中大约有69%是重组子。本试验结果说明所构建的... 用限制性内切酶EcoRI对鸡毒支原体MGS6进行酶切消化,并在表达载体噬菌体λgt11中构建了MGS6的基因文库。按照对载体LacZ基因的插入失活作用结果,所得到的噬菌体中大约有69%是重组子。本试验结果说明所构建的基因文库含有MGS6的全部基因组,从而为研究MG分子生物学提供了基础。 展开更多
关键词 鸡毒支原体 基因文库 基因工程
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鸡依阿华支原体病 被引量:2
5
作者 郭建华 陈德威 陈明勇 《中国家禽》 北大核心 1997年第10期37-38,共2页
鸡依阿华支原体病郭建华陈德威陈明勇(中国农业大学实验动物所北京100094)依阿华支原体(Mi)是重要的鸡支原体之一,引起鸡和火鸡的胚胎死亡和孵化率降低,并使鸡和火鸡产生轻度以至中度的气囊炎及腿部畸形。在东欧、西欧、... 鸡依阿华支原体病郭建华陈德威陈明勇(中国农业大学实验动物所北京100094)依阿华支原体(Mi)是重要的鸡支原体之一,引起鸡和火鸡的胚胎死亡和孵化率降低,并使鸡和火鸡产生轻度以至中度的气囊炎及腿部畸形。在东欧、西欧、北美、日本、以色列、巴基斯坦、印度... 展开更多
关键词 鸡病 依阿华支原体病 病原学 流行病学 抗原
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应用PPA—ELISA检测鸡毒支原体血清抗体 被引量:3
6
作者 郭建华 陈明勇 陈德威 《畜牧兽医杂志》 1998年第1期5-6,共2页
应用PPA—ELISA检测鸡毒支原体血清抗体,其结果与血凝抑制试验和ELISA符合率为100%,是一种特异、敏感、简单、快速的检测方法。
关键词 鸡毒支原体 PPA-ELISA 血清抗体
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鸡毒支原体DNA提取和纯化的研究
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作者 郭建华 陈德威 +1 位作者 杨百亮 赵良仓 《山西农业大学学报》 CAS 1998年第2期110-111,共2页
本文报道了鸡毒支原体DNA提取和纯化过程。应用不同方法自鸡毒支原体培养物中共提取10批鸡毒支原体DNA。DNA片段大小均一,在琼脂糖凝胶电泳中呈一条带,DNA溶液的OD260/OD280接近1.8。用限制性核酸内场酶... 本文报道了鸡毒支原体DNA提取和纯化过程。应用不同方法自鸡毒支原体培养物中共提取10批鸡毒支原体DNA。DNA片段大小均一,在琼脂糖凝胶电泳中呈一条带,DNA溶液的OD260/OD280接近1.8。用限制性核酸内场酶BamHI切割,呈清晰的DNA条带。 展开更多
关键词 鸡毒支原体 琼脂糖凝胶电泳 酶切图谱
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抗禽脑脊髓炎病毒单克隆抗体的研究——禽脑脊髓炎病毒抗原的培养和纯化
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作者 杨建民 秦卓明 +3 位作者 傅纳 苏敬良 赵继勋 张中直 《甘肃畜牧兽医》 2002年第2期1-2,共2页
为获得用于制备AEV单克隆抗体的抗原 ,将禽脑脊髓炎病毒 (AEVVR)接种于鸡胚成纤维细胞 (CEF)盲传 ,通过间接免疫荧光试验 (IFA)监测AEV增殖情况 ,以第六代CEF培养物作为种毒扩大培养 ,将其培养物经差速离心后的半提纯物接种 6日龄SPF鸡... 为获得用于制备AEV单克隆抗体的抗原 ,将禽脑脊髓炎病毒 (AEVVR)接种于鸡胚成纤维细胞 (CEF)盲传 ,通过间接免疫荧光试验 (IFA)监测AEV增殖情况 ,以第六代CEF培养物作为种毒扩大培养 ,将其培养物经差速离心后的半提纯物接种 6日龄SPF鸡胚、1日龄SPF鸡 ,再将半提纯物经密度梯度离心后进行PAGE -SDS电泳 ,电镜观察。结果证实 。 展开更多
关键词 禽脑脊髓炎病毒 鸡胚成纤维细胞 培养 纯化 单克隆抗体 抗原
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“云南省蛋鸡产蛋加固工程”项目研究报告
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作者 李炬 彭克高 +4 位作者 杨德明 李万猛 段新华 张国中 赵继勋 《中国家禽》 北大核心 2005年第11期32-34,共3页
云南省近两年产蛋鸡普遍存在无明显产蛋高峰、高峰期产蛋下降、产蛋高峰持续时间短等产蛋异常问题.基于这种现象,开展了"云南省蛋鸡产蛋加固工程"项目的试验,以梅里亚公司系列疫苗为基础,科学设定蛋鸡免疫程序,并对鸡群重点... 云南省近两年产蛋鸡普遍存在无明显产蛋高峰、高峰期产蛋下降、产蛋高峰持续时间短等产蛋异常问题.基于这种现象,开展了"云南省蛋鸡产蛋加固工程"项目的试验,以梅里亚公司系列疫苗为基础,科学设定蛋鸡免疫程序,并对鸡群重点免疫疫病的抗体进行动态追踪监测. 展开更多
关键词 加固工程 云南省 研究报告 项目 产蛋高峰 梅里亚公司 产蛋下降 产蛋异常 持续时间 免疫程序 产蛋鸡 高峰期 疫苗 抗体 疫病 鸡群
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