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禽白血病J亚群病毒GP85蛋白单克隆抗体的制备与鉴定被引量：1: 1; 作者王彬李晓齐 +3 位作者曹红陈福勇王永强郑世军《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2015年第11期23-26,29,共5页; 为制备能够区分禽白血病A亚群和J亚群病毒的单克隆抗体,将J亚群病毒gp85基因构建到原核表达载体上,并在大肠杆菌BL21中表达携带His标签的禽白血病J亚群GP85融合蛋白,用复性纯化的融合蛋白作为免疫原免疫BALB/c小鼠。4次免疫后取免疫小... 展开更多; 关键词禽白血病病毒 GP85 单克隆抗体; 在线阅读下载PDF 职称材料

传染性囊病病毒(IBDV)VP3蛋白单克隆抗体的制备与鉴定: 2; 作者王彬李淑芹 +3 位作者李晓齐曹红王永强郑世军《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2016年第8期25-28,共4页; 为制备抗IBDV VP3蛋白的单克隆抗体,以VP3-His蛋白免疫BALB/c小鼠,经4次免疫、融合、亚克隆,筛选出1株能够稳定分泌抗VP3蛋白单克隆抗体的细胞株,命名为4H8F7C10。经间接ELISA方法检测,小鼠的腹水效价为2.05×106,单克隆抗体的解离... 展开更多; 关键词 IBDV 单克隆抗体 VP3蛋白; 在线阅读下载PDF 职称材料

禽呼肠孤病毒σB蛋白单克隆抗体的制备及鉴定被引量：5: 3; 作者陈祥吴海洋 +3 位作者王永强李晓齐曹红郑世军《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2015年第6期3-6,I0001,共5页; 为了制备禽呼肠孤病毒(ARV)σB蛋白的单克隆抗体,以实验室保存的融合蛋白His-σB为免疫原免疫BALB/c小鼠,经过融合、筛选、亚克隆后,获得2株能稳定分泌抗σB蛋白单克隆抗体的特异性杂交瘤细胞株,分别命名为3C3、4H11。经间接ELISA方法测... 展开更多; 关键词禽呼肠孤病毒 σ-B蛋白单克隆抗体; 在线阅读下载PDF 职称材料

鸡传染性贫血病毒VP2蛋白单克隆抗体的制备及鉴定被引量：2: 4; 作者陈延飞覃尧 +4 位作者李夏莹王永强李晓齐曹红郑世军《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2015年第4期3-6,9,共5页; 为制备CIAV VP2单克隆抗体,将原核表达的His-VP2融合蛋白作为免疫原免疫BALB/c小鼠。经4次免疫后,取小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞(SP2/0)融合。将原核表达的GST-VP2融合蛋白作为包被抗原,利用间接ELISA筛选阳性克隆。阳性细胞株经3次亚克隆后... 展开更多; 关键词鸡传染性贫血病毒 VP2蛋白原核表达单克隆抗体; 在线阅读下载PDF 职称材料

禽IL-2单克隆抗体的制备与鉴定被引量：1: 5; 作者付梦姣王永强 +2 位作者曹红李晓齐郑世军《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2016年第11期6-9,13,共5页; 为制备禽源IL-2的单克隆抗体,首先构建chIL-2的原核表达载体并进行表达,用HIS-IL-2蛋白免疫BALB/c小鼠,经3次免疫后,取小鼠脾与骨髓瘤细胞sp2/0融合,应用间接ELISA方法筛选阳性杂交瘤,最终获得3株稳定分泌chIL-2抗体的杂交瘤,分别命名为... 展开更多; 关键词禽源IL-2 原核表达单克隆抗体; 在线阅读下载PDF 职称材料

鸡白介素10(chIL-10)单克隆抗体的制备及鉴定被引量：1: 6; 作者高俊峰柳亚楠 +3 位作者王永强曹红李晓齐郑世军《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2016年第12期3-6,共4页; 为制备鸡白介素10(chIL-10)单克隆抗体,以常规分子生物学技术从禽细胞系MDCC-MSB1克隆chIL-10基因,将去信号肽chIL-10基因亚克隆至原核表达载体p ET-30a,并在大肠杆菌中表达,纯化后作为免疫原免疫BALB/c小鼠。经4次免疫后,取小鼠脾细胞... 展开更多; 关键词鸡IL-10 原核表达单克隆抗体; 在线阅读下载PDF 职称材料

传染性囊病病毒VP5蛋白单克隆抗体的制备及鉴定: 7; 作者孙晓霞蔺文成 +3 位作者李晓齐曹红王永强郑世军《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2016年第12期10-13,共4页; 传染性囊病病毒(Infectious Bursal Disease Virus,IBDV)的非结构蛋白VP5在病毒感染细胞的不同阶段发挥着抑制或诱导细胞凋亡的重要作用。为制备抗血清I型IBDV VP5蛋白的单克隆抗体,取经His-VP5蛋白免疫4次的BALB/c小鼠的脾细胞与骨髓... 展开更多; 关键词传染性囊病病毒 VP5蛋白原核表达单克隆抗体; 在线阅读下载PDF 职称材料

禽呼肠孤病毒(ARV)p10蛋白单克隆抗体的制备与鉴定: 8; 作者何至远吴海洋 +3 位作者王永强李晓齐曹红郑世军《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2015年第4期20-23,26,共5页; 为了深入研究禽呼肠孤病毒(ARV)的致病机理,从其基因组中克隆病毒非结构蛋白p10基因,并将其与原核表达载体连接,转入大肠杆菌BL21中,使其表达携带His标签的p10融合蛋白,经镍柱纯化得到高纯度重组p10蛋白,以该蛋白为免疫原免疫BALB/c小鼠... 展开更多; 关键词禽呼肠孤病毒 p10蛋白原核表达单克隆抗体; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名禽白血病J亚群病毒GP85蛋白单克隆抗体的制备与鉴定被引量：1: 1; 作者王彬李晓齐曹红陈福勇王永强郑世军; 机构中国农业大学动物医学院农业生物技术国家重点实验室; 出处《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2015年第11期23-26,29,共5页; 基金国家自然科学基金(#31272543) 现代农业产业技术体系建设专项资金(#NYCYTX-41); 文摘为制备能够区分禽白血病A亚群和J亚群病毒的单克隆抗体,将J亚群病毒gp85基因构建到原核表达载体上,并在大肠杆菌BL21中表达携带His标签的禽白血病J亚群GP85融合蛋白,用复性纯化的融合蛋白作为免疫原免疫BALB/c小鼠。4次免疫后取免疫小鼠的脾细胞与骨髓瘤细胞(SP2/0)进行融合,经过3次亚克隆后获得1株稳定分泌针对GP85蛋白的杂交瘤细胞株,命名为386。经间接ELISA测定,小鼠腹水效价为6.4×10~5,亲和力解离常数(kD)为2.18×10^(-9),这株单抗的亚型为IgGl。通过Western Blot和IFA实验证实该株单抗是针对J亚群病毒蛋白GP85的特异性抗体。初步确定此株单克隆抗体的抗原识别区位于GP85蛋白N端的1-50位氨基酸。该株单抗的制备为ALV-J病毒抗原检测以及致病机理的研究奠定了基础。; 关键词禽白血病病毒 GP85 单克隆抗体; Keywords ALV GP85 monoclonal antibody; 分类号 S852.659.3 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名传染性囊病病毒(IBDV)VP3蛋白单克隆抗体的制备与鉴定: 2; 作者王彬李淑芹李晓齐曹红王永强郑世军; 机构中国农业大学动物医学院农业生物技术国家重点实验室; 出处《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2016年第8期25-28,共4页; 基金国家自然科学基金(31430085 31272543) 现代农业产业技术体系建设专项资金(NYCYTX-41); 文摘为制备抗IBDV VP3蛋白的单克隆抗体,以VP3-His蛋白免疫BALB/c小鼠,经4次免疫、融合、亚克隆,筛选出1株能够稳定分泌抗VP3蛋白单克隆抗体的细胞株,命名为4H8F7C10。经间接ELISA方法检测,小鼠的腹水效价为2.05×106,单克隆抗体的解离常数(k D)为9.67×10-8,此株抗体亚类为Ig G3。通过Western Blot和间接免疫荧光试验检测,该株单克隆抗体可以识别IBDV感染DF-1细胞产生的VP3蛋白。初步确定此株单克隆抗体的抗原识别区位于VP3蛋白N端的第50-90位氨基酸。此株单克隆抗体的制备为IBDV临床检测方法的建立以及致病分子机制的研究奠定了基础。; 关键词 IBDV 单克隆抗体 VP3蛋白; Keywords IBDV monoclonal antibody VP3; 分类号 S852.4 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名禽呼肠孤病毒σB蛋白单克隆抗体的制备及鉴定被引量：5: 3; 作者陈祥吴海洋王永强李晓齐曹红郑世军; 机构中国农业大学动物医学院农业生物技术国家重点实验室; 出处《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2015年第6期3-6,I0001,共5页; 基金国家自然科学基金31272543 与现代农业产业技术体系建设专项资金(#NYCYTX-41); 文摘为了制备禽呼肠孤病毒(ARV)σB蛋白的单克隆抗体,以实验室保存的融合蛋白His-σB为免疫原免疫BALB/c小鼠,经过融合、筛选、亚克隆后,获得2株能稳定分泌抗σB蛋白单克隆抗体的特异性杂交瘤细胞株,分别命名为3C3、4H11。经间接ELISA方法测定,2株单抗的亲和力解离常数分别为5.17×10-10和5.04×10-10,均为高亲和力抗体。2株单抗的重链类型分别为Ig G2a和Ig G2b。间接免疫荧光和Western Blot结果分析表明,该两株单抗均能特异性识别ARV感染DF-1细胞后产生的σB蛋白。以Western blot方法利用单抗检测不同截短的σB蛋白,初步确定3C3、4H11两株单抗抗原识别表位分别位于101 aa^120 aa之间和121 aa^140 aa之间。该单抗为检测ARV及研究ARVσB蛋白的生物学功能奠定了基础。; 关键词禽呼肠孤病毒 σ-B蛋白单克隆抗体; Keywords Avian reovirus crB protein monoclonal antibody; 分类号 S852.43 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名鸡传染性贫血病毒VP2蛋白单克隆抗体的制备及鉴定被引量：2: 4; 作者陈延飞覃尧李夏莹王永强李晓齐曹红郑世军; 机构中国农业大学动物医学院农业生物技术国家重点实验室; 出处《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2015年第4期3-6,9,共5页; 基金国家自然科学基金项目(#31272543) 现代农业产业技术体系建设专项资金(#NYCYTX-41); 文摘为制备CIAV VP2单克隆抗体,将原核表达的His-VP2融合蛋白作为免疫原免疫BALB/c小鼠。经4次免疫后,取小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞(SP2/0)融合。将原核表达的GST-VP2融合蛋白作为包被抗原,利用间接ELISA筛选阳性克隆。阳性细胞株经3次亚克隆后,获得3株稳定分泌抗CIAV VP2蛋白的杂交瘤细胞克隆,分别命名为3D7、3B8、2D3。经间接ELISA测定,以上3株杂交瘤细胞腹水效价分别为1:8.0×10~5、1:4.0×10~5,以及1:6.4×10~6,亲和力解离常数分别为7.34×10^(-11)、2.65×10^(-11),以及2.98×10^(-11)。IgG亚类分别为IgG1、IgG2b以及IgG2b。经Western Blot试验证明,3D7株单抗能特异地识别CIAV VP2蛋白,其识别的抗原表位区域为VP2 N-端的20~40 aa。经IFA试验证明,3株单抗均能识别天然的CIAVVP2蛋白。此单抗为研究CIAVVP2的生物学功能和CIAV致病机理奠定基础。; 关键词鸡传染性贫血病毒 VP2蛋白原核表达单克隆抗体; Keywords CIAV VP2 prokaryotic expression monoclonal antibody; 分类号 S852.65 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名禽IL-2单克隆抗体的制备与鉴定被引量：1: 5; 作者付梦姣王永强曹红李晓齐郑世军; 机构中国农业大学动物医学院农业生物技术国家重点实验室; 出处《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2016年第11期6-9,13,共5页; 基金现代农业产业技术体系建设专项资金(NYCYTX-41); 文摘为制备禽源IL-2的单克隆抗体,首先构建chIL-2的原核表达载体并进行表达,用HIS-IL-2蛋白免疫BALB/c小鼠,经3次免疫后,取小鼠脾与骨髓瘤细胞sp2/0融合,应用间接ELISA方法筛选阳性杂交瘤,最终获得3株稳定分泌chIL-2抗体的杂交瘤,分别命名为1C2,2F2和4B5。并对所获得单抗的特性进行了鉴定,结果表明,3株单抗亚型均为IgG1,抗体亲和力解离常数(K_d)分别为4.81×10^(-10)、1.36×10^(-10)、4.15×10^(-9),均为高亲和力抗体,经过Western Blot确定3株单抗分别识别chIL-2的不同区域,且均能特异性识别chIL-2。该单抗的制备为chIL-2的功能研究和应用奠定了基础。; 关键词禽源IL-2 原核表达单克隆抗体; Keywords chIL-2 prokaryotic expression monoclonal antibodies; 分类号 S852.4 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名鸡白介素10(chIL-10)单克隆抗体的制备及鉴定被引量：1: 6; 作者高俊峰柳亚楠王永强曹红李晓齐郑世军; 机构中国农业大学动物医学院; 出处《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2016年第12期3-6,共4页; 基金国家自然科学基金(31272543) 现代农业产业技术体系建设专项资金(NYCYTX-41); 文摘为制备鸡白介素10(chIL-10)单克隆抗体,以常规分子生物学技术从禽细胞系MDCC-MSB1克隆chIL-10基因,将去信号肽chIL-10基因亚克隆至原核表达载体p ET-30a,并在大肠杆菌中表达,纯化后作为免疫原免疫BALB/c小鼠。经4次免疫后,取小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞(SP2/0)融合。将原核表达的GST-chIL-10融合蛋白作为包被抗原,利用间接ELISA筛选阳性克隆。阳性细胞株经3次亚克隆后,获得3株稳定分泌chIL-10抗体的杂交瘤细胞克隆,分别命名为4B2、4F3以及1E3。经间接ELISA测定,以上3株杂交瘤细胞腹水效价为1∶3.2×10~6,亲和力解离常数(Kd)分别为1.05×10^(-9)、5.01×10^(-10)以及7.59×10^(-10)。抗体重链类型分别为Ig G2a、Ig G2a以及Ig G1。经Western Blot试验证明,3株单抗均能特异地识别原核或真核表达的chIL-10蛋白,4B2、4F3单抗识别的抗原表位区域为chIL-10 N端的1 aa^52 aa,1E3识别的是N端的52 aa^102 aa。这些单抗为鸡IL-10的检测及生物学功能研究奠定了基础。; 关键词鸡IL-10 原核表达单克隆抗体; Keywords chicken interleukin-10 prokaryotic expression monoclonal antibody; 分类号 S852.4 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名传染性囊病病毒VP5蛋白单克隆抗体的制备及鉴定: 7; 作者孙晓霞蔺文成李晓齐曹红王永强郑世军; 机构中国农业大学动物医学院农业生物技术国家重点实验室; 出处《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2016年第12期10-13,共4页; 基金国家自然科学基金(31272543) 现代农业产业技术体系建设专项资金(NYCYTX-41); 文摘传染性囊病病毒(Infectious Bursal Disease Virus,IBDV)的非结构蛋白VP5在病毒感染细胞的不同阶段发挥着抑制或诱导细胞凋亡的重要作用。为制备抗血清I型IBDV VP5蛋白的单克隆抗体,取经His-VP5蛋白免疫4次的BALB/c小鼠的脾细胞与骨髓瘤细胞(SP2/0)进行融合,3次亚克隆后获得2株能稳定分泌VP5蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为5EC7和2BE5。经间接ELISA测定,以上2株单抗的亲和力解离常数分别为1.14×10^(-10)和4.87×10^(-10),亚类分别为Ig G2a和Ig G1。通过Western Blot和间接免疫荧光试验检测,2株单抗均能识别IBDV感染DF-1细胞后产生的VP5蛋白。Western Blot试验表明,2株单抗识别的抗原表位区域为VP5 N-端的1~10 aa。该单抗为研究血清I型IBDV VP5蛋白的生物学功能及病毒致病机理奠定基础。; 关键词传染性囊病病毒 VP5蛋白原核表达单克隆抗体; Keywords Infectious Bursal Disease Virus VP5 prokaryotic expression monoclonal antibody; 分类号 S858.315.3 [农业科学—临床兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名禽呼肠孤病毒(ARV)p10蛋白单克隆抗体的制备与鉴定: 8; 作者何至远吴海洋王永强李晓齐曹红郑世军; 机构中国农业大学动物医学院农业生物技术国家重点实验室; 出处《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2015年第4期20-23,26,共5页; 基金国家自然科学基金(31272543) 现代农业产业技术体系建设专项资金(NYCYTX-41); 文摘为了深入研究禽呼肠孤病毒(ARV)的致病机理,从其基因组中克隆病毒非结构蛋白p10基因,并将其与原核表达载体连接,转入大肠杆菌BL21中,使其表达携带His标签的p10融合蛋白,经镍柱纯化得到高纯度重组p10蛋白,以该蛋白为免疫原免疫BALB/c小鼠,将免疫小鼠的脾细胞与骨髓瘤细胞(SP2/0)进行融合,经过3次亚克隆后获得2株能够稳定分泌针对p10蛋白的杂交瘤细胞株,分别命名为2B12与4H10。通过间接ELISA(Enzyme-linked immunosorbent assay)方法测定其腹水效价均为1:1.01×10~7,亲合力解离常数(kD)分别为3.91×10^(-10)、5.75×10^(-10),2株单抗的IgG亚型均为IgG2b。经Western Blot鉴定,该2株抗体均能特异性识别ARV感染DF-1细胞中的p10蛋白。这些单抗的制备为深入研究ARV的致病机理奠定了基础。; 关键词禽呼肠孤病毒 p10蛋白原核表达单克隆抗体; Keywords ARV p10 prokaryotic expression monoclonal antibody; 分类号 S852.659.4 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	禽白血病J亚群病毒GP85蛋白单克隆抗体的制备与鉴定	王彬李晓齐曹红陈福勇王永强郑世军	《中国兽医杂志》 CAS 北大核心	2015	1	在线阅读下载PDF 职称材料
2	传染性囊病病毒(IBDV)VP3蛋白单克隆抗体的制备与鉴定	王彬李淑芹李晓齐曹红王永强郑世军	《中国兽医杂志》 CAS 北大核心	2016	0	在线阅读下载PDF 职称材料
3	禽呼肠孤病毒σB蛋白单克隆抗体的制备及鉴定	陈祥吴海洋王永强李晓齐曹红郑世军	《中国兽医杂志》 CAS 北大核心	2015	5	在线阅读下载PDF 职称材料
4	鸡传染性贫血病毒VP2蛋白单克隆抗体的制备及鉴定	陈延飞覃尧李夏莹王永强李晓齐曹红郑世军	《中国兽医杂志》 CAS 北大核心	2015	2	在线阅读下载PDF 职称材料
5	禽IL-2单克隆抗体的制备与鉴定	付梦姣王永强曹红李晓齐郑世军	《中国兽医杂志》 CAS 北大核心	2016	1	在线阅读下载PDF 职称材料
6	鸡白介素10(chIL-10)单克隆抗体的制备及鉴定	高俊峰柳亚楠王永强曹红李晓齐郑世军	《中国兽医杂志》 CAS 北大核心	2016	1	在线阅读下载PDF 职称材料
7	传染性囊病病毒VP5蛋白单克隆抗体的制备及鉴定	孙晓霞蔺文成李晓齐曹红王永强郑世军	《中国兽医杂志》 CAS 北大核心	2016	0	在线阅读下载PDF 职称材料
8	禽呼肠孤病毒(ARV)p10蛋白单克隆抗体的制备与鉴定	何至远吴海洋王永强李晓齐曹红郑世军	《中国兽医杂志》 CAS 北大核心	2015	0	在线阅读下载PDF 职称材料