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题名棉蚜抗氧化乐果品系的羧酸酯酶基因突变
被引量:14
- 1
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作者
郭惠琳
高希武
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机构
中国农业大学农学及生物技术学院昆虫学系
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出处
《昆虫学报》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第2期194-202,共9页
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基金
国家重点基础研究发展规划"973"项目 (G2000016207)
国家自然科学基金项目 (30170621
39970496)
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文摘
用氧化乐果对室内敏感品系棉蚜Aphis gossypii (Glover) 进行抗性选育, 经24代筛选, 抗性指数达到124 7倍。以α_乙酸萘酯 (α_NA) 为底物, 比较了氧化乐果敏感和抗性品系棉蚜羧酸酯酶的比活力, 发现抗性品系羧酸酯酶比活力明显小于敏感品系。对这两个品系的羧酸酯酶基因进行了克隆, 通过对抗性和敏感品系羧酸酯酶基因核苷酸序列及推导的氨基酸序列比较, 发现抗性品系有4个氨基酸残基发生了替代 (His104→Arg, Ala128→Val, Thr333→Asp, Lys484→Arg)。对其蛋白质三维结构分析推测只有His104→Arg的替代是位于其活性中心。棉蚜氧化乐果敏感和抗性品系羧酸酯酶基因 cDNA全长的GenBank登录号分别为AY485216和AY485214。
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关键词
棉蚜
抗药性
羧酸酯酶基因
克隆
基因突变
氧化乐果
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Keywords
Aphis gossypii
resistance
carboxylesterase gene
cloning
gene mutation
omethoate
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分类号
Q965.9
[生物学—昆虫学]
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题名蛋白质沉淀剂对棉铃虫谷胱甘肽S_转移酶的部分纯化
被引量:3
- 2
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作者
汤方
张常忠
梁沛
史雪岩
高希武
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机构
中国农业大学农学及生物技术学院昆虫学系
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出处
《昆虫学报》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第2期172-178,共7页
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基金
国家重点基础研究发展规划"973"项目 (G2000016207)
国家自然科学基金项目 (30471153
30170621)
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文摘
通过用聚乙烯亚胺(PEI)、硫酸铵、聚乙二醇(PEG)沉淀技术和GSH-Sepharose 4B亲和柱对棉铃虫Helicoverpa armigera(Hübner)幼虫中谷胱甘肽S-转移酶进行了部分纯化研究.结果表明PEG10000和PEG20000的纯化效果优于硫酸铵的沉淀效果.通过PEI沉淀去核酸后,再用硫酸铵沉淀,中肠和脂肪体GST活性分布在70%~75%和60%~65%沉淀段,比活力分别为1081.49和596.41 nmol/(min·mg),纯化倍数分别为2.53和2.2.在6种PEG中,PEG10000和PEG20000的纯化效果较好.在中肠和脂肪体中PEG10000沉淀的GST活性峰分别在40%~45%和30%~40%,GST比活力分别为795.11和1 080.18 nmol/(min·mg),纯化倍数分别是2.4和3.97.PEG20000沉淀中肠和脂肪体GST的活性峰分别在25%~40%和25%~45%,比活力分别是767.57和945.96 nmol/(min·mg),纯化倍数分别是2.81和3.05.用GSH-Sepharose 4B纯化中肠GST,GST比活力达到5 888.44nmol/(min·mg),纯化倍数达到107.38.
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关键词
棉铃虫
谷胱甘肽S-转移酶
硫酸铵沉淀
聚乙烯亚胺沉淀
聚乙二醇沉淀
GSH—Sephamse
4B亲和柱
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Keywords
Helicoverpa armigera
glutathione S-transferases
ammonium sulfate fractionation
polyethylene imine fractionation
polyethyleneglycol fractionation
GSH-Sepharose 4B
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分类号
Q965.9
[生物学—昆虫学]
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题名棉铃虫细胞色素P450 CO差光谱的测定
被引量:7
- 3
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作者
于彩虹
高希武
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机构
中国农业大学农学及生物技术学院昆虫学系
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出处
《昆虫学报》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第2期301-304,共4页
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基金
国家重点基础研究发展规划"973"项目 (G2000016207)
国家自然科学基金项目(29832050
39970496)
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文摘
采用经典的CO差光谱方法测定棉铃虫Helicoverpa armigera细胞色素P450含量时发现,同一样品的多次平行测定结果间差异显著.进一步研究表明测定时通入CO后的间隔时间不同,计算出的P450含量存在1~16倍的差异.多次连续扫描结果表明A450nm-490nm与通入CO后到扫描的时间间隔呈钟形曲线,说明CO与P450的结合需要一定的时间,以A450nm-490nm最大值计算P450含量最为准确.
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关键词
棉铃虫
细胞色素P450
CO差光谱
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Keywords
Helicoverpa armigera
cytochrome P450
CO difference spectra
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分类号
Q965
[生物学—昆虫学]
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