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我国重点养猪区域伪狂犬病野毒感染血清学调查报告被引量：19: 1; 作者王科文杨汉春《养猪》 2010年第2期45-47,共3页; 2005年4月至2007年4月,笔者从华北、东北、华中、华东、华南5个养猪区域,随机选择102个免疫伪狂犬病病毒gE基因缺失疫苗的猪场,按不同生产阶段5%比例随机采集血清样本共5746份,利用商品化gE抗体鉴别诊断试剂盒进行了猪场伪狂犬病野毒感... 展开更多; 关键词伪狂犬病血清学调查野毒感染潜伏感染; 在线阅读下载PDF 职称材料

猪圆环病毒2型的分离与鉴定被引量：30: 2; 作者吕艳丽杨汉春 +2 位作者郭鑫陈艳红查振林《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2004年第2期14-18,共5页; 利用 PCR方法 ,从疑似断奶猪多系统衰竭综合征 (PMWS)的自然病例的淋巴结和脾脏中扩增出了预期长度的猪圆环病毒 2型 (Porcine Circovirus type 2 ,PCV 2 )的 DNA片段 ,并用限制性内切酶对 PCR产物进行了酶切鉴定。将经 PCR扩增和酶切... 展开更多; 关键词猪圆环病毒2型分离鉴定多系统衰竭综合征淋巴结脾脏; 在线阅读下载PDF 职称材料

我国规模化猪场主要繁殖障碍性病毒病的血清学调查被引量：13: 3; 作者陈艳红郭鑫 +3 位作者赵荣茂马良张家龙杨汉春《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2007年第6期33-35,共3页; 关键词猪繁殖障碍规模化猪场血清学调查病毒病猪繁殖与呼吸综合征病毒性疾病猪圆环病毒2型集约化养猪; 在线阅读下载PDF 职称材料

重组N蛋白间接ELISA检测猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体被引量：12: 4; 作者刘平黄杨汉春 +3 位作者高云郭鑫郑洁陈艳红《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2003年第4期10-13,共4页; 用纯化的猪繁殖与呼吸综合征病毒重组 N蛋白作为包被抗原 ,建立了检测猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体的间接EL ISA方法 ,并确定了 EL ISA最佳工作条件 :抗原包被浓度为 0 .2 7μg/ m l,37℃ 1h加 4℃过夜 ,血清 (1∶ 4 0 )和酶标兔抗猪Ig ... 展开更多; 关键词重组N蛋白 ELISA检测猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体; 在线阅读下载PDF 职称材料

猪繁殖与呼吸综合征病毒BJ-4株ORF3基因的原核表达被引量：4: 5; 作者谷红杨汉春 +2 位作者郭鑫陈艳红查振林《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2004年第11期3-5,共3页; 通过 PCR方法从重组质粒 p GEM- ORF3扩增得到缺失 N端疏水序列的基因片段 d ORF3(deleting ORF3)。将d ORF3克隆至原核高效表达载体 p GEX- 4 T- 2 ,在 E.coli BL 2 1细胞中成功表达了猪繁殖与呼吸综合征病毒 (PRRSV)重组蛋白GST- d OR... 展开更多; 关键词猪繁殖与呼吸综合征病毒基因原核表达重组蛋白重组质粒; 在线阅读下载PDF 职称材料

密码子优化的PRRSV GP5基因DNA疫苗在鼠体内免疫效力的评价被引量：3: 6; 作者侯艳红周艳君 +3 位作者闫丽萍田志军杨汉春童光志《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第8期605-610,共6页; 为了提高表达含有猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)GP5基因DNA疫苗的死疫效应,本研究通过人工合成的方法将GP5基因的密码子改造为猪体嗜好的密码子,并将其作为免疫原基因,连同野生型... 展开更多; 关键词猪繁殖与呼吸综合征病毒 GP5基因密码子优化 DNA免疫; 在线阅读下载PDF 职称材料

表达猪CD3 ε蛋白重组腺病毒的构建及免疫原性测定被引量：1: 7; 作者孙栋郭鑫 +2 位作者杨汉春陈艳红查振林《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2008年第6期17-19,共3页; 关键词重组腺病毒 CD3 免疫原性测定单克隆抗体 T细胞亚群抗体制备猪; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名我国重点养猪区域伪狂犬病野毒感染血清学调查报告被引量：19: 1; 作者王科文杨汉春; 机构美国辉瑞动物保健品有限公司中国农业大学农业部预防兽医学重点实验室; 出处《养猪》 2010年第2期45-47,共3页; 文摘 2005年4月至2007年4月,笔者从华北、东北、华中、华东、华南5个养猪区域,随机选择102个免疫伪狂犬病病毒gE基因缺失疫苗的猪场,按不同生产阶段5%比例随机采集血清样本共5746份,利用商品化gE抗体鉴别诊断试剂盒进行了猪场伪狂犬病野毒感染的血清学调查。结果表明,gE野毒抗体阳性猪场占87.25%,样本阳性率为28.53%,阳性猪场样本阳性率为33.06%。另外,通过分析,揭示了阳性猪场各生产阶段的感染特点。; 关键词伪狂犬病血清学调查野毒感染潜伏感染; 分类号 S858.285.3 [农业科学—临床兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名猪圆环病毒2型的分离与鉴定被引量：30: 2; 作者吕艳丽杨汉春郭鑫陈艳红查振林; 机构中国农业大学农业部预防兽医学重点实验室; 出处《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2004年第2期14-18,共5页; 文摘利用 PCR方法 ,从疑似断奶猪多系统衰竭综合征 (PMWS)的自然病例的淋巴结和脾脏中扩增出了预期长度的猪圆环病毒 2型 (Porcine Circovirus type 2 ,PCV 2 )的 DNA片段 ,并用限制性内切酶对 PCR产物进行了酶切鉴定。将经 PCR扩增和酶切鉴定为 PCV2阳性的组织样品匀浆液接种到无 PCV污染的 PK15细胞中传代 ,经间接免疫荧光检查 ,在接毒细胞内观察到了特异性免疫荧光 ;用接毒细胞制备超薄切片 ,在电镜下观察到了直径大约为 17nm的圆形病毒样粒子和大量不同形态的胞浆内包涵体。由此表明分离出的病毒为猪圆环病毒 2型。; 关键词猪圆环病毒2型分离鉴定多系统衰竭综合征淋巴结脾脏; Keywords porcine circovirus type 2 PCV2 isolation identification; 分类号 S858.28 [农业科学—临床兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名我国规模化猪场主要繁殖障碍性病毒病的血清学调查被引量：13: 3; 作者陈艳红郭鑫赵荣茂马良张家龙杨汉春; 机构中国农业大学农业部预防兽医学重点实验室; 出处《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2007年第6期33-35,共3页; 基金国家重点基础研究发展计划"973"项目(2005CB523200)资助; 关键词猪繁殖障碍规模化猪场血清学调查病毒病猪繁殖与呼吸综合征病毒性疾病猪圆环病毒2型集约化养猪; 分类号 S852.65 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名重组N蛋白间接ELISA检测猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体被引量：12: 4; 作者刘平黄杨汉春高云郭鑫郑洁陈艳红; 机构中国农业大学农业部预防兽医学重点实验室; 出处《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2003年第4期10-13,共4页; 基金国家"8 63"课题"猪重大疫病分子诊断试剂盒研究"(2 0 0 1AA2 490 11) 北京自然科学基金资助项目 (5 992 0 10 ); 文摘用纯化的猪繁殖与呼吸综合征病毒重组 N蛋白作为包被抗原 ,建立了检测猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体的间接EL ISA方法 ,并确定了 EL ISA最佳工作条件 :抗原包被浓度为 0 .2 7μg/ m l,37℃ 1h加 4℃过夜 ,血清 (1∶ 4 0 )和酶标兔抗猪Ig G(1∶ 4 0 0 )分别在 37℃温育 30 m in,底物溶液 37℃显色 15 min。经重复性试验、交叉试验、阻断试验等试验结果表明该方法重复性好、特异性强、灵敏度高 ;与美国 IDEXX试剂盒相比较 ,特异性和敏感性分别为 97.6 %和 92 .1% ,无显著性差异。用已建立的方法检测临床血清样本 187份 ,总阳性率为 30 .5 %。; 关键词重组N蛋白 ELISA检测猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体; Keywords porcine reproductive and respiratory syndrome recombinant nucleoprotein ELISA.; 分类号 S858.28 [农业科学—临床兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名猪繁殖与呼吸综合征病毒BJ-4株ORF3基因的原核表达被引量：4: 5; 作者谷红杨汉春郭鑫陈艳红查振林; 机构中国农业大学农业部预防兽医学重点实验室; 出处《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2004年第11期3-5,共3页; 基金教育部优秀青年教师资助计划; 文摘通过 PCR方法从重组质粒 p GEM- ORF3扩增得到缺失 N端疏水序列的基因片段 d ORF3(deleting ORF3)。将d ORF3克隆至原核高效表达载体 p GEX- 4 T- 2 ,在 E.coli BL 2 1细胞中成功表达了猪繁殖与呼吸综合征病毒 (PRRSV)重组蛋白GST- d ORF3,表达产物以包涵体的形式存在 ,表达量为 30 .6 % ,Western- Blot结果表明重组蛋白可被 PRRSV阳性血清所识别。表达的重组蛋白为进一步研究 PRRS病毒次要结构蛋白; 关键词猪繁殖与呼吸综合征病毒基因原核表达重组蛋白重组质粒; Keywords PRRSV ORF3 gene prokaryotic expression; 分类号 S852.65 [农业科学—基础兽医学] Q786 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名密码子优化的PRRSV GP5基因DNA疫苗在鼠体内免疫效力的评价被引量：3: 6; 作者侯艳红周艳君闫丽萍田志军杨汉春童光志; 机构中国农业大学农业部预防兽医学重点实验室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室; 出处《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第8期605-610,共6页; 基金国家重点基础研究发展规划项目(973)(2005CB523200) 国家自然科学基金(30470072)项目资助; 文摘为了提高表达含有猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)GP5基因DNA疫苗的死疫效应,本研究通过人工合成的方法将GP5基因的密码子改造为猪体嗜好的密码子,并将其作为免疫原基因,连同野生型GP5基因,分别插入表达载体pIRES1neo中,构建重组质粒pIR-optiGP5和pIR-GP5.将这两种质粒分别转染293T细胞,转染后48 h,采用间接免疫荧光和Western blot方法检测GP5基因的体外表达情况,结果两种检测方法显示重组质粒pIR-optiGP5的蛋白表达量明显多于pIR-GP5。为了评价DNA免疫质粒pIR-optiGP5的免疫效果,选取30只6～8周龄雌性BALB/c小鼠,将pIRES1neo、pIR-GP5、pIR-optiGP5分别以100μg/只剂量,进行肌肉多点注射,共免疫3次,每次间隔2周,同时,利用间接免疫荧光技术、流式细胞技术、淋巴细胞特异性增殖试验等方法检测其体液免疫和细胞免疫水平。结果显示:DNA免疫质粒pIR-optiGP5在二免后即可检测到荧光抗体,而pIR-GP5在三免后才能检测到;且发现用pIR-optiGP5质粒免疫小鼠,其CD4^+、CD8^+ T淋巴细胞百分数及特异性刺激指数均高于pIR-GP5免疫小鼠,推测经过密码子优化的GP5基因其蛋白在小鼠体内得到了较高水平的表达,并诱导了较强的免疫应答,这为进一步研究和设计有效的PRRSV DNA疫苗提供了新的思路。; 关键词猪繁殖与呼吸综合征病毒 GP5基因密码子优化 DNA免疫; Keywords porcine reproductive and respiratory syndrome virus GP5 gene codon optimization DNA immunization; 分类号 S852.4 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名表达猪CD3 ε蛋白重组腺病毒的构建及免疫原性测定被引量：1: 7; 作者孙栋郭鑫杨汉春陈艳红查振林; 机构中国农业大学农业部预防兽医学重点实验室; 出处《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2008年第6期17-19,共3页; 基金国家自然科学基金项目(30371072); 关键词重组腺病毒 CD3 免疫原性测定单克隆抗体 T细胞亚群抗体制备猪; 分类号 Q782 [生物学—分子生物学] TN912.231 [电子电信—通信与信息系统]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	我国重点养猪区域伪狂犬病野毒感染血清学调查报告	王科文杨汉春	《养猪》	2010	19	在线阅读下载PDF 职称材料
2	猪圆环病毒2型的分离与鉴定	吕艳丽杨汉春郭鑫陈艳红查振林	《中国兽医杂志》 CAS 北大核心	2004	30	在线阅读下载PDF 职称材料
3	我国规模化猪场主要繁殖障碍性病毒病的血清学调查	陈艳红郭鑫赵荣茂马良张家龙杨汉春	《中国兽医杂志》 CAS 北大核心	2007	13	在线阅读下载PDF 职称材料
4	重组N蛋白间接ELISA检测猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体	刘平黄杨汉春高云郭鑫郑洁陈艳红	《中国兽医杂志》 CAS 北大核心	2003	12	在线阅读下载PDF 职称材料
5	猪繁殖与呼吸综合征病毒BJ-4株ORF3基因的原核表达	谷红杨汉春郭鑫陈艳红查振林	《中国兽医杂志》 CAS 北大核心	2004	4	在线阅读下载PDF 职称材料
6	密码子优化的PRRSV GP5基因DNA疫苗在鼠体内免疫效力的评价	侯艳红周艳君闫丽萍田志军杨汉春童光志	《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心	2007	3	在线阅读下载PDF 职称材料
7	表达猪CD3 ε蛋白重组腺病毒的构建及免疫原性测定	孙栋郭鑫杨汉春陈艳红查振林	《中国兽医杂志》 CAS 北大核心	2008	1	在线阅读下载PDF 职称材料