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脂多糖诱导SD大鼠膝关节成纤维样滑膜细胞炎症模型建立及特征分析
被引量：
8
1
作者
熊翱
熊仁平
+3 位作者
彭艳
李宇
江旭
许建中
《中国实验动物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第4期436-446,共11页
目的建立Sprague Dawley (SD)大鼠的正常膝关节滑膜细胞原代培养方法及脂多糖(Lipopolysaccharides,LPS)诱导成纤维样滑膜细胞(fibroblast-like synoviocytes,FLS)炎症模型。方法选取80~120 g SPF级幼年SD大鼠,分离其滑膜组织,原代培养...
目的建立Sprague Dawley (SD)大鼠的正常膝关节滑膜细胞原代培养方法及脂多糖(Lipopolysaccharides,LPS)诱导成纤维样滑膜细胞(fibroblast-like synoviocytes,FLS)炎症模型。方法选取80~120 g SPF级幼年SD大鼠,分离其滑膜组织,原代培养至第3代,用组织化学染色法和Ed U法检测FLS蛋白标志物vimentin和增殖功能。同时,用滑膜组织作对照,检测第3代至第8代原代培养FLS的特征蛋白表达,筛选具有生理功能的高纯度且可用于后续实验的FLS细胞。LPS诱导FLS炎症后,检测LPS制激FLS不同时间点的IL-1β和TNF-α的mRNA和蛋白表达,根据实验结果确定LPS成功诱导FLS炎症模型的时间点。最后,检测FLS被LPS诱导前后的细胞因子、增殖功能和特征蛋白的表达,为分析FLS炎症模型提供实验数据。结果采用0.2%I型胶原酶消化法,成功培养了FLS原代细胞。经检测蛋白标志物vimentin,第3代FLS纯度达98%以上。通过FLS特征蛋白检测,筛选出具有生理功能且可用作后续实验的FLS为第3代至第7代原代细胞。通过对LPS诱导后的FLS的细胞因子和特征蛋白分析,确定1μg/m L LPS诱导FLS细胞3 h,能复制出FLS炎症模型。结论 LPS诱导的FLS炎症模型可作为体外研究炎性关节病的细胞模型。
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关键词
成纤维样滑膜细胞
原代培养
波形蛋白
炎性关节病
模型
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职称材料
题名
脂多糖诱导SD大鼠膝关节成纤维样滑膜细胞炎症模型建立及特征分析
被引量：
8
1
作者
熊翱
熊仁平
彭艳
李宇
江旭
许建中
机构
郑州大学第一附属医院骨科
中国人民解放军陆军特色医学中心野战外科研究部
出处
《中国实验动物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第4期436-446,共11页
基金
国家自然科学基金项目(81701915)。
文摘
目的建立Sprague Dawley (SD)大鼠的正常膝关节滑膜细胞原代培养方法及脂多糖(Lipopolysaccharides,LPS)诱导成纤维样滑膜细胞(fibroblast-like synoviocytes,FLS)炎症模型。方法选取80~120 g SPF级幼年SD大鼠,分离其滑膜组织,原代培养至第3代,用组织化学染色法和Ed U法检测FLS蛋白标志物vimentin和增殖功能。同时,用滑膜组织作对照,检测第3代至第8代原代培养FLS的特征蛋白表达,筛选具有生理功能的高纯度且可用于后续实验的FLS细胞。LPS诱导FLS炎症后,检测LPS制激FLS不同时间点的IL-1β和TNF-α的mRNA和蛋白表达,根据实验结果确定LPS成功诱导FLS炎症模型的时间点。最后,检测FLS被LPS诱导前后的细胞因子、增殖功能和特征蛋白的表达,为分析FLS炎症模型提供实验数据。结果采用0.2%I型胶原酶消化法,成功培养了FLS原代细胞。经检测蛋白标志物vimentin,第3代FLS纯度达98%以上。通过FLS特征蛋白检测,筛选出具有生理功能且可用作后续实验的FLS为第3代至第7代原代细胞。通过对LPS诱导后的FLS的细胞因子和特征蛋白分析,确定1μg/m L LPS诱导FLS细胞3 h,能复制出FLS炎症模型。结论 LPS诱导的FLS炎症模型可作为体外研究炎性关节病的细胞模型。
关键词
成纤维样滑膜细胞
原代培养
波形蛋白
炎性关节病
模型
Keywords
fibroblas-like synoviocytes
primary culture
vimentin
inflammatory joint disease
model
分类号
Q95-33 [生物学—动物学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
脂多糖诱导SD大鼠膝关节成纤维样滑膜细胞炎症模型建立及特征分析
熊翱
熊仁平
彭艳
李宇
江旭
许建中
《中国实验动物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2020
8
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