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丹参酮ⅡA对尾吊大鼠发生废用性骨质疏松症防治作用的研究 被引量:10
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作者 王玺 李凯 +2 位作者 冯康虎 高玉海 陈克明 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2020年第12期3302-3307,共6页
目的探讨丹参酮ⅡA对尾吊大鼠发生废用性骨质疏松症的防治作用。方法 2月龄SPF级wistar雌性大鼠30只,正常饲养1周后随机分为对照组、尾吊组、丹参酮ⅡA组,每组10只。尾吊组、丹参酮ⅡA组均采用尾吊法建立模型,丹参酮ⅡA组给予丹参酮ⅡA ... 目的探讨丹参酮ⅡA对尾吊大鼠发生废用性骨质疏松症的防治作用。方法 2月龄SPF级wistar雌性大鼠30只,正常饲养1周后随机分为对照组、尾吊组、丹参酮ⅡA组,每组10只。尾吊组、丹参酮ⅡA组均采用尾吊法建立模型,丹参酮ⅡA组给予丹参酮ⅡA 11 mg/kg灌胃,对照组和尾吊组则给予等体积蒸馏水,每周称体质量1次。4周后麻醉处死大鼠,采血并取出胫骨、股骨及椎骨,检测胫骨、椎骨骨密度,进行股骨、椎骨骨生物力学实验,测定血清的骨代谢生化指标,观察并分析椎骨的VG、HE染色结果。结果各组大鼠体质量无统计学差异(P>0.05);丹参酮ⅡA组离体骨密度以及骨生物力学参数较尾吊组均有所改善(P<0.05,P<0.05);丹参酮ⅡA组骨钙素(osteocalcin,OC)水平较尾吊组明显增加(P<0.01),抗酒石酸酸性磷酸酶5b(tartrate-resistant acid phosphatase 5b,TRACP 5b)水平较尾吊组明显降低(P<0.05);丹参酮ⅡA组椎体双荧光间距,骨小梁数量、厚度较尾吊组均有显著增加(P<0.05,P<0.01),骨小梁间距则明显减少(P<0.05);丹参酮ⅡA组椎体成骨细胞数量较尾吊组明显增多(P<0.01)。结论丹参酮ⅡA可能是通过促进骨形成,抑制骨吸收,对尾吊模型造成的废用性骨质疏松症发挥防治作用的。 展开更多
关键词 丹参酮ⅡA 废用性骨质疏松 骨密度 骨形态计量学
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低频脉冲电磁场对大鼠成骨细胞骨形成的影响及作用机制 被引量:7
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作者 王媛媛 葸慧荣 +2 位作者 石文贵 周建 陈克明 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期21-27,共7页
目的观察低频脉冲电磁场(PEMFs)对大鼠成骨细胞(ROBs)骨形成的影响,探讨了环磷酸腺苷(cAMP)/蛋白激酶A (PKA)/环磷腺苷效应结合蛋白(CREB)信号通路的作用机制。方法取新生Wistar大鼠颅骨,通过多次酶消化法获得ROBs并进行传代融合。采用5... 目的观察低频脉冲电磁场(PEMFs)对大鼠成骨细胞(ROBs)骨形成的影响,探讨了环磷酸腺苷(cAMP)/蛋白激酶A (PKA)/环磷腺苷效应结合蛋白(CREB)信号通路的作用机制。方法取新生Wistar大鼠颅骨,通过多次酶消化法获得ROBs并进行传代融合。采用50 Hz 0. 6 m T PEMFs处理3、6、9 d后,检测ROBs内的碱性磷酸酶(ALP)浓度;处理0、15、30、60、90、120 min后,检测ROBs内骨形成相关因子(RUNX2)和成骨相关转录因子(OSX)蛋白表达,cAMP浓度,p-PKA、p-CREB和CREB蛋白表达。观察p-CREB核转位情况。采用RNA干扰法干扰IFT88后,检测ROBs内RUNX2、OSX、p-PKA和p-CREB蛋白表达情况。结果 PEMFs处理ROBs 3、6、9 d后,ALP活性值分别为24. 356±4. 911、37. 688±2. 151和39. 922±5. 486,均明显高于相应对照组的18. 531±2. 401 (P=0. 0121)、33. 675±4. 366 (P=0. 0324)和36. 574±1. 339 (P=0. 0134)。PEMFs处理30 (P=0. 0042和P=0. 0058)、60 (P=0. 0097和P=0. 0079)、90 min (P=0. 0083和P=0. 0098)时,ROBs内的RUNX2和OSX活性均显著高于未处理组; PEMFs处理30(P=0. 0012)和60 min (P=0. 0035)时,ROBs内的cAMP浓度明显高于未处理时; PEMFs处理15 (P=0. 0018)、30 (P=0. 0087)、90 (P=0. 0250)和120 min (P=0. 0350)时,ROBs内的p-PKA水平明显高于未处理组; PEMFs处理15 (P=0. 0075)、30 (P=0. 0017)、60 (P=0. 0074)和90 min (P=0. 0096)时,ROBs内的p-CREB水平明显高于未处理组。PEMFs处理ROBs 15 min后,CREB发生磷酸化并聚集于细胞核内。将PKA、p-PKA与初级纤毛共定位染色,结果发现p-PKA定位于初级纤毛上。RNA干扰去除初级纤毛后,干扰组的p-PKA (F=78. 602,P=0. 0270)和p-CREB (F=76. 082,P=0. 0089)蛋白表达量及RUNX2 (F=41. 064,P=0. 0230)和OSX (F=57. 524,P=0. 0310)蛋白表达量均明显低于未干扰组。结论 PEMFs可能是通过初级纤毛相关的cAMP/PKA/CREB信号通路促进ROBs骨形成。 展开更多
关键词 低频脉冲电磁场 大鼠成骨细胞 初级纤毛 环磷酸腺苷 蛋白激酶A 环磷腺苷效应结合蛋白
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不同类型低频电磁场抵抗失重引起的骨流失 被引量:6
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作者 李文苑 田永辉 +3 位作者 高玉海 朱保应 葸慧荣 陈克明 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期11-20,共10页
目的研究和比较50 Hz 0. 6 m T低频脉冲电磁场(PEMFs)和50 Hz 1. 8 m T正弦交变电磁场(SEMFs)防止尾吊大鼠骨量下降的效果,为失重引起的骨流失防治提供理论参考和科学依据。方法采用尾吊模型大鼠在地面模拟微重力,将40只SD大鼠随机分为... 目的研究和比较50 Hz 0. 6 m T低频脉冲电磁场(PEMFs)和50 Hz 1. 8 m T正弦交变电磁场(SEMFs)防止尾吊大鼠骨量下降的效果,为失重引起的骨流失防治提供理论参考和科学依据。方法采用尾吊模型大鼠在地面模拟微重力,将40只SD大鼠随机分为对照组、后肢悬吊(HLS)组、HLS+PEMFs组和HLS+SEMFs组4组,每组10只。HLS+PEMFs组和HLS+SEMFs组分别采用50 Hz 0. 6 m T的PEMFs和50 Hz 1. 8 m T的SEMFs两种电磁场进行治疗,每天干预90 min,4周后处死大鼠。采用双能X射线吸收测定法检测大鼠股骨和椎骨骨密度(BMD),AG-IS型生物力学仪检测生物力学强度,ELISA法检测血清骨钙素(OC)、抗酒石酸酸性磷酸酶5b (Tracp 5b)浓度、甲状旁腺激素(PTH)和环磷酸腺苷(cAMP)的含量,Micro-CT和HE染色观察骨组织微结构。结果 HLS组股骨(P=0. 000)和椎骨(P=0. 001)的BMD显著低于对照组; HLS+PEMFs组股骨(P=0. 001)和椎骨(P=0. 039)的BMD显著高于HLS组; HLS+SEMFs组股骨的BMD明显高于HLS组(P=0. 003),但椎骨的BMD与HLS组差异无统计学意义(P=0. 130); HLS+PEMFs组和HLS+SEMFs组股骨(P=0. 818)和椎骨(P=0. 614)的BMD差异均无统计学意义。HLS组股骨和椎骨的最大载荷(P=0. 000,P=0. 009)和弹性模量(P=0. 015,P=0. 009)显著低于对照组; HLS+PEMFs组股骨(P=0. 038)和椎骨(P=0. 087)的最大载荷显著高于HLS组,但弹性模量与HLS组相比差异无统计学意义(P=0. 324,P=0. 091); HLS+SEMFs组股骨和椎骨的最大值载荷(P=0. 190,P=0. 222)和弹性模量(P=0. 512,P=0. 437)与HLS组相比差异均无统计学意义。HLS+PEMFs组和HLS+SEMFs组股骨(P=0. 585,P=0. 948)和椎骨(P=0. 668,P=0. 349)的最大载荷和弹性模量差异均无统计学意义。HLS组的血清OC水平显著低于对照组(P=0. 000),HLS+PEMFs组(P=0. 000)和HLS+SEMFs组(P=0. 006)的OC水平显著高于HLS组。HLS组的血清Tracp 5b浓度显著高于对照组(P=0. 011),HLS+PEMFs组(P=0. 459)和HLS+SEMFs组(P=0. 469)与对照组相比差异无统计学意义; HLS+PEMFs组(P=0. 056)和HLS+SEMFs组(P=0. 054)的血清Tracp 5b浓度与HLS组相比差异无统计学意义。HLS组的PTH (P=0. 000)和cAMP浓度(P=0. 000)显著低于对照组; HLS+PEMFs组和HLS+SEMFs组的PTH (P=0. 000,P=0. 000)和cAMP浓度(P=0. 000,P=0. 000)显著高于HLS组。HLS组股骨松质骨与对照组相比非常稀疏,且体积较小。而对照组、HLS+PEMFs组和HLS+SEMFs组的松质骨密度和体积很接近。与对照组相比,HLS组大鼠的BMD (P=0. 000)、骨体积(BV)/组织体积(TV)(P=0. 000)、骨小梁数量(Tb. N)(P=0. 000)和骨小梁厚度(Tb. Th)(P=0. 000)最低,骨小梁离散程度(Tb. Sp)(P=0. 000)和骨表面积(BS)/BV (P=0. 000)最大;与HLS组相比,HLS+PEMFs组和HLS+SEMFs组的Tb. Sp (P=0. 000,P=0. 000)和BS/BV (P=0. 000,P=0. 000)显著降低,BMD (P=0. 000,P=0. 000)、BV/TV(P=0. 001,P=0. 004)、Tb. Th (P=0. 000,P=0. 001)和Tb. N (P=0. 000,P=0. 001)显著升高。HLS+PEMFs组和HLS+SEMFs组的骨小梁厚度差异有统计学意义(P=0. 024)。HLS组(P=0. 000)、HLS+PEMFs组(P=0. 000)和HLS+SEMFs组(P=0. 000)骨小梁表面成骨细胞密度明显低于对照组,HLS+PEMFs组(P=0. 000)和HLS+SEMFs组(P=0. 000)明显高于HLS组。HLS组骨内膜成骨细胞密度显著低于对照组(P=0. 000),HLS+PEMFs组(P=0. 000)和HLS+SEMFs组(P=0. 000)显著高于HLS组,HLS+PEMFs组又显著高于HLS+SEMFs组(P=0. 041)。HLS组相比对照组骨髓腔中产生大量脂肪空洞,但治疗组中脂肪球明显减少,几乎与对照组没有差别。HLS组每mm2骨髓中的脂肪细胞数目是对照组的4倍(P=0. 000),HLS+PEMFs组(P=0. 000)和HLS+SEMFs组(P=0. 000)显著低于HLS组,HLS+PEMFs组和HLS+SEMFs组间差异无统计学意义(P=0. 086)。结论 50 Hz 0. 6 m T的PEMFs和50 Hz 1. 8 m T的SEMFs治疗可以有效提高尾吊大鼠的BMD和生物力学值,促进大鼠血液中骨形成标记物的浓度,可能通过影响PTH含量激活cAMP通路,进一步提高成骨细胞含量,防止骨微结构的恶化,是良好的电磁场治疗方法。其中PEMFs治疗更显著,可防止约50%的BMD和最大载荷值的降低,通过促进骨形成更好地提高尾吊大鼠骨量。 展开更多
关键词 低频脉冲电磁场 正弦交变电磁场 微重力 尾吊大鼠 骨形成 骨重建
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7-甲氧基-4’-羟基异黄酮促进大鼠成骨细胞成骨性分化的作用机制 被引量:1
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作者 宋明甲 文益民 +2 位作者 吴晓燕 柴晓亮 周建 《医药导报》 CAS 北大核心 2019年第6期730-734,共5页
目的探讨7-甲氧基-4’-羟基异黄酮(MHIF)促进成骨细胞成熟矿化是否与NO/cGMP/sGC信号通路相关。方法检测成骨细胞经不同浓度(0,10^(-4),10^(-5),10^(-6),10^(-7),10^(-8) mol·L^(-1)) MHIF处理后骨钙素和碱性磷酸酶确定最适药物浓... 目的探讨7-甲氧基-4’-羟基异黄酮(MHIF)促进成骨细胞成熟矿化是否与NO/cGMP/sGC信号通路相关。方法检测成骨细胞经不同浓度(0,10^(-4),10^(-5),10^(-6),10^(-7),10^(-8) mol·L^(-1)) MHIF处理后骨钙素和碱性磷酸酶确定最适药物浓度。使用一氧化合成酶阻断剂N-单甲基-L-精氨酸(L-NMA)处理成骨细胞,观察MHIF对骨钙素和碱性磷酸酶影响,一氧化氮(NO)和3`-5`-环鸟苷-磷酸(cGMP)的含量;应用蛋白质印迹检测细胞中蛋白可溶性的鸟氨酸环化酶和蛋白激酶G的表达水平。结果经10^(-6 ) mol·L^(-1) MHIF处理后成骨细胞中碱性磷酸酶活性和骨钙素的含量升高,预先使用L-NMA处理成骨细胞后,MHIF提高成骨细胞中碱性磷酸酶活性和骨钙素含量的作用受到抑制,MHIF提高一氧化氮合酶(NOS)、NO、cGMP、sGC和PKG表达均受到抑制。结论 MHIF可通过NO/cGMP/sGC信号通路促进体外培养成骨细胞成熟与矿化。 展开更多
关键词 7-甲氧基-4’-羟基异黄酮 成骨细胞 骨钙素 N-单甲基-L-精氨酸
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