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TLR4调节炎症反应和自噬影响对乙酰氨基酚肝损伤后的肝细胞再生 被引量：1
1
作者 乔亚琴 沈海涛 +1 位作者 董萍 路燕 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2024年第10期1689-1695,共7页
目的探讨Toll受体4(TLR4)在对乙酰氨基酚(APAP)诱导的人正常肝细胞(L02)损伤后肝细胞再生中的作用以及其可能机制。方法体外培养L02细胞,利用CCK-8法检测细胞活力,筛选出APAP最佳作用浓度和作用时间、TLR4抑制剂(TAK-242)作用浓度。West... 目的探讨Toll受体4(TLR4)在对乙酰氨基酚(APAP)诱导的人正常肝细胞(L02)损伤后肝细胞再生中的作用以及其可能机制。方法体外培养L02细胞,利用CCK-8法检测细胞活力,筛选出APAP最佳作用浓度和作用时间、TLR4抑制剂(TAK-242)作用浓度。Western blot法检测核因子-κB(NF-κB)、微管相关蛋白轻链3(LC3)、螯合体1(p62)、受体相互作用蛋白激酶1(RIP1)、受体相互作用蛋白激酶3(RIP3)、信号转导和转录激活因子3(STAT3)、磷酸化信号转导和转录激活因子3(p-STAT3)、增殖细胞核抗原(PCNA)、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)蛋白表达水平。qRT-PCR法检测TLR4、NF-κB、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-6、IL-1β、PCNA、Cyclin D1、细胞增殖核抗原(Ki67)mRNA表达水平。结果根据CCK-8结果,选择APAP 5 mmol/L作用L02细胞24、36、48 h模拟体外肝脏损伤及损伤后再生模型,TAK-242100 nmol/L于APAP给药前2 h预处理抑制TLR4。与对照组相比,APAP 24 h组的NF-κB、RIP1、p-STAT3、PCNA、Cyclin D1蛋白水平和TNF-α、IL-1β、PCNA mRNA水平升高;APAP 36 h组的NF-κB、RIP1、RIP3、p-STAT3、PCNA、Cyclin D1蛋白水平和TLR4、NF-κB、TNF-α、IL-1β、PCNA、Cyclin D1 mRNA水平升高;APAP 48 h组的NF-κB、RIP1、p-STAT3、PCNA、Cyclin D1蛋白水平和TLR4、NF-κB、TNF-α、IL-1β、IL-6、PCNA、Cyclin D1、Ki67 mRNA水平升高。相较于同时间点APAP组,APAP+TAK-24224 h组和48 h组的NF-κB、RIP1、RIP3、p-STAT3、PCNA、Cyclin D1蛋白水平和TLR4、NF-κB、TNF-α、IL-1β、IL-6、PCNA、Cyclin D1、Ki67 mRNA水平明显降低;APAP+TAK-24236 h组的NF-κB、PCNA蛋白水平和TLR4、NF-κB、TNF-α、IL-1β、IL-6、PCNA、Ki67 mRNA水平也明显低于APAP 36 h组。与对照组相比,APAP组自噬激活,而APAP+TAK-242组自噬被抑制。结论TLR4可能影响TLR4/NF-κB通路,上调炎症因子和自噬水平,促进APAP诱导的L02细胞肝损伤后的肝细胞再生。 展开更多
关键词 对乙酰氨基酚 Toll受体4 肝再生 自噬 炎症 肝损伤
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