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结核分枝杆菌Ag85A/ESAT-6嵌合型质粒DNA疫苗和抗结核药物联合治疗小鼠耐药结核病的效果研究
被引量：
9
1
作者
梁艳
吴雪琼
+5 位作者
张俊仙
阳幼荣
王兰
李洪敏
李忠明
史迎昌
《中国防痨杂志》
CAS
2007年第5期382-385,共4页
目的研究结核分枝杆菌Ag85A/ESAT-6嵌合型质粒DNA疫苗和抗结核药物联合治疗小鼠耐药结核病的效果。方法用结核分枝杆菌高耐利福平低耐异烟肼临床分离株HB240尾静脉注射BALB/c小鼠1个月后,将小鼠随机分成2组,第1组用利福平(RFP)、异烟肼(...
目的研究结核分枝杆菌Ag85A/ESAT-6嵌合型质粒DNA疫苗和抗结核药物联合治疗小鼠耐药结核病的效果。方法用结核分枝杆菌高耐利福平低耐异烟肼临床分离株HB240尾静脉注射BALB/c小鼠1个月后,将小鼠随机分成2组,第1组用利福平(RFP)、异烟肼(INH)治疗12周,第2组用RFP、INH和结核分枝杆菌Ag85A/ESAT-6嵌合型质粒DNA疫苗(免疫5次)联合治疗12周;治疗结束后4和8周,分别取肺、肝和脾观察病理改变、称取质量、作菌落计数。结果治疗结束后4和8周,第2组小鼠体质量均超过第1组,但无显著性差异(P>0.05)。治疗结束后4周,第2组肺、脾脏指数(0.017,0.011)均略低于第1组(0.020,0.012)(P>0.05);治疗结束后8周,第2组肺、肝脏指数(0.021,0.047)均略低于第1组(0.022,0.048)(P>0.05);而第2组脾脏指数(0.008)显著低于第1组(0.012)(P<0.05)。治疗结束后4周,第2组有4例脾脏未见明显病变,第1组仅1例脾脏未见明显病变;治疗结束后8周,第2组有1例肺门淋巴结肿大,而第1组有3例;第2组有5例脾脏未见明显病变,第1组仅2例脾脏未见明显病变。治疗结束后4周,第2组肺菌落计数和脾菌落计数比第1组显著减少,分别减少70%和80%。结论DNA疫苗和抗结核药物联合治疗小鼠耐药结核病疗效高于单纯化疗。
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关键词
DNA疫苗
分枝杆菌
结核
在线阅读
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职称材料
结核分枝杆菌Ag85A/ESAT-6嵌合基因DNA疫苗与抗痨药物联合治疗小鼠结核病
被引量：
3
2
作者
梁艳
吴雪琼
+9 位作者
李宁
张俊仙
阳幼荣
余琦
白雪娟
宋晶莹
刘瑞
李忠明
王兰
史迎昌
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第9期864-867,共4页
目的研究结核分枝杆菌Ag85A/ESAT-6嵌合基因DNA疫苗及其与抗痨药物联合治疗小鼠结核病的效果。方法用结核分枝杆菌临床分离的利福平和异烟肼敏感株HB240-1尾静脉注射17～19g的6～8周龄雌性BALB/c小鼠后,将小鼠随机均匀地分为5组,感染后...
目的研究结核分枝杆菌Ag85A/ESAT-6嵌合基因DNA疫苗及其与抗痨药物联合治疗小鼠结核病的效果。方法用结核分枝杆菌临床分离的利福平和异烟肼敏感株HB240-1尾静脉注射17～19g的6～8周龄雌性BALB/c小鼠后,将小鼠随机均匀地分为5组,感染后第3d开始,分别用pVAX1空载体(A组)、利福平和异烟肼(B组)、利福平、异烟肼和Ag85A/ESAT-6嵌合基因DNA疫苗(C组)、Ag85A/ESAT-6嵌合基因DNA疫苗(D组)、HSP65基因DNA疫苗(E组)治疗40d,每组10只小鼠。治疗结束后2w,分别取肺、肝和脾观察病理改变、称取重量、做菌落计数。结果小鼠感染5w后,肺内菌量可达到1.8×106CFU,脾内菌量达到1.7×106CFU。治疗结束后2w,B组和C组肺、脾脏器重量指数显著低于D组和E组,D组和E组脾脏器重量指数低于A组,但差别不显著。A组肺脏病变程度最重,病变范围80%～100%,干酪样坏死灶为弥漫性;D组和E组肺脏病变范围50%,干酪样坏死灶为片状;B组和C组肺脏病变程度较轻,病变范围较小,干酪样坏死灶为点状。A组脾脏9只重度肿大;B组和C组脾脏未见明显病变;D组和E组脾脏各有4只重度肿大。与A组相比,E组、D组、B组和C组肺脏菌落数分别减少了45%、50%、98.9%、99%;脾脏菌落数依次减少了50%、55%、99.2%、98.4%。与pVAX1空载体治疗组相比,各治疗组均有不同程度的疗效,Ag85A/ESAT-6嵌合基因疫苗组与HSP65基因疫苗组疗效相当。结论Ag85A/ESAT-6嵌合基因DNA疫苗组联合化疗的疗效明显强于Ag85A/ESAT6嵌合基因DNA疫苗单独应用。
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关键词
DNA疫苗
分枝杆菌
结核病
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职称材料
esat6-卡介苗重组疫苗的构建及鉴定
被引量：
2
3
作者
张灵霞
吴雪琼
董恩军
《实用医学杂志》
CAS
北大核心
2009年第4期517-520,共4页
目的:获得结核分枝杆菌esat6-卡介苗重组疫苗。方法:通过基因工程重组技术将结核分枝杆菌保护性抗原esat6的编码基因与穿梭质粒载体pYUB295重组,通过电穿孔技术导入卡介苗中,应用PCR扩增、PAGE电泳鉴定重组卡介苗。结果:通过PCR扩增获得...
目的:获得结核分枝杆菌esat6-卡介苗重组疫苗。方法:通过基因工程重组技术将结核分枝杆菌保护性抗原esat6的编码基因与穿梭质粒载体pYUB295重组,通过电穿孔技术导入卡介苗中,应用PCR扩增、PAGE电泳鉴定重组卡介苗。结果:通过PCR扩增获得300bp左右的esat6基因,与穿梭质粒载体pYUB295重组后,通过PCR扩增、限制性内切酶酶切、DNA测序鉴定表明成功地构建了esat6基因pYUB295重组质粒。将重组质粒通过电穿孔导入卡介苗,重组卡介苗在抗性培养基上生长良好。pYUB295-esat6-卡介苗重组疫苗基因组DNA的PCR扩增以及培养上清液的PAGE电泳表明esat6-卡介苗重组疫苗构建正确,esat6蛋白在卡介苗中分泌表达。结论:成功构建了esat6-卡介苗重组疫苗。
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关键词
分枝杆菌
结核
卡介苗
重组疫苗
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职称材料
题名
结核分枝杆菌Ag85A/ESAT-6嵌合型质粒DNA疫苗和抗结核药物联合治疗小鼠耐药结核病的效果研究
被引量：
9
1
作者
梁艳
吴雪琼
张俊仙
阳幼荣
王兰
李洪敏
李忠明
史迎昌
机构
中国人民解放军总医院第二附属医院结核病研究所
出处
《中国防痨杂志》
CAS
2007年第5期382-385,共4页
基金
WHO基金资助项目(V25-181-202)
中国人民解放军总医院创新基金资助项目
文摘
目的研究结核分枝杆菌Ag85A/ESAT-6嵌合型质粒DNA疫苗和抗结核药物联合治疗小鼠耐药结核病的效果。方法用结核分枝杆菌高耐利福平低耐异烟肼临床分离株HB240尾静脉注射BALB/c小鼠1个月后,将小鼠随机分成2组,第1组用利福平(RFP)、异烟肼(INH)治疗12周,第2组用RFP、INH和结核分枝杆菌Ag85A/ESAT-6嵌合型质粒DNA疫苗(免疫5次)联合治疗12周;治疗结束后4和8周,分别取肺、肝和脾观察病理改变、称取质量、作菌落计数。结果治疗结束后4和8周,第2组小鼠体质量均超过第1组,但无显著性差异(P>0.05)。治疗结束后4周,第2组肺、脾脏指数(0.017,0.011)均略低于第1组(0.020,0.012)(P>0.05);治疗结束后8周,第2组肺、肝脏指数(0.021,0.047)均略低于第1组(0.022,0.048)(P>0.05);而第2组脾脏指数(0.008)显著低于第1组(0.012)(P<0.05)。治疗结束后4周,第2组有4例脾脏未见明显病变,第1组仅1例脾脏未见明显病变;治疗结束后8周,第2组有1例肺门淋巴结肿大,而第1组有3例;第2组有5例脾脏未见明显病变,第1组仅2例脾脏未见明显病变。治疗结束后4周,第2组肺菌落计数和脾菌落计数比第1组显著减少,分别减少70%和80%。结论DNA疫苗和抗结核药物联合治疗小鼠耐药结核病疗效高于单纯化疗。
关键词
DNA疫苗
分枝杆菌
结核
Keywords
DNA vaccine
Muhi-drug resistance
Mycobacterium tuberculosis
分类号
R52 [医药卫生—内科学]
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职称材料
题名
结核分枝杆菌Ag85A/ESAT-6嵌合基因DNA疫苗与抗痨药物联合治疗小鼠结核病
被引量：
3
2
作者
梁艳
吴雪琼
李宁
张俊仙
阳幼荣
余琦
白雪娟
宋晶莹
刘瑞
李忠明
王兰
史迎昌
机构
中国人民解放军总医院第二附属医院结核病研究所
出处
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第9期864-867,共4页
基金
WHO基金资助项目(V25-181-202)
国家自然科学基金资助项目(30070730)
中国人民解放军总医院创新基金(O6ZY31)
文摘
目的研究结核分枝杆菌Ag85A/ESAT-6嵌合基因DNA疫苗及其与抗痨药物联合治疗小鼠结核病的效果。方法用结核分枝杆菌临床分离的利福平和异烟肼敏感株HB240-1尾静脉注射17～19g的6～8周龄雌性BALB/c小鼠后,将小鼠随机均匀地分为5组,感染后第3d开始,分别用pVAX1空载体(A组)、利福平和异烟肼(B组)、利福平、异烟肼和Ag85A/ESAT-6嵌合基因DNA疫苗(C组)、Ag85A/ESAT-6嵌合基因DNA疫苗(D组)、HSP65基因DNA疫苗(E组)治疗40d,每组10只小鼠。治疗结束后2w,分别取肺、肝和脾观察病理改变、称取重量、做菌落计数。结果小鼠感染5w后,肺内菌量可达到1.8×106CFU,脾内菌量达到1.7×106CFU。治疗结束后2w,B组和C组肺、脾脏器重量指数显著低于D组和E组,D组和E组脾脏器重量指数低于A组,但差别不显著。A组肺脏病变程度最重,病变范围80%～100%,干酪样坏死灶为弥漫性;D组和E组肺脏病变范围50%,干酪样坏死灶为片状;B组和C组肺脏病变程度较轻,病变范围较小,干酪样坏死灶为点状。A组脾脏9只重度肿大;B组和C组脾脏未见明显病变;D组和E组脾脏各有4只重度肿大。与A组相比,E组、D组、B组和C组肺脏菌落数分别减少了45%、50%、98.9%、99%;脾脏菌落数依次减少了50%、55%、99.2%、98.4%。与pVAX1空载体治疗组相比,各治疗组均有不同程度的疗效,Ag85A/ESAT-6嵌合基因疫苗组与HSP65基因疫苗组疗效相当。结论Ag85A/ESAT-6嵌合基因DNA疫苗组联合化疗的疗效明显强于Ag85A/ESAT6嵌合基因DNA疫苗单独应用。
关键词
DNA疫苗
分枝杆菌
结核病
Keywords
DNA vaccine
Mycobacterium
tuberculosis
分类号
R378.91 [医药卫生—病原生物学]
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职称材料
题名
esat6-卡介苗重组疫苗的构建及鉴定
被引量：
2
3
作者
张灵霞
吴雪琼
董恩军
机构
中国人民解放军总医院第二附属医院结核病研究所
出处
《实用医学杂志》
CAS
北大核心
2009年第4期517-520,共4页
文摘
目的:获得结核分枝杆菌esat6-卡介苗重组疫苗。方法:通过基因工程重组技术将结核分枝杆菌保护性抗原esat6的编码基因与穿梭质粒载体pYUB295重组,通过电穿孔技术导入卡介苗中,应用PCR扩增、PAGE电泳鉴定重组卡介苗。结果:通过PCR扩增获得300bp左右的esat6基因,与穿梭质粒载体pYUB295重组后,通过PCR扩增、限制性内切酶酶切、DNA测序鉴定表明成功地构建了esat6基因pYUB295重组质粒。将重组质粒通过电穿孔导入卡介苗,重组卡介苗在抗性培养基上生长良好。pYUB295-esat6-卡介苗重组疫苗基因组DNA的PCR扩增以及培养上清液的PAGE电泳表明esat6-卡介苗重组疫苗构建正确,esat6蛋白在卡介苗中分泌表达。结论:成功构建了esat6-卡介苗重组疫苗。
关键词
分枝杆菌
结核
卡介苗
重组疫苗
Keywords
Mycobacterium tuberculosis
BCG vaccine
Recombinant vaccine
分类号
R392 [医药卫生—免疫学]
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职称材料
题名
作者
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被引量
操作
1
结核分枝杆菌Ag85A/ESAT-6嵌合型质粒DNA疫苗和抗结核药物联合治疗小鼠耐药结核病的效果研究
梁艳
吴雪琼
张俊仙
阳幼荣
王兰
李洪敏
李忠明
史迎昌
《中国防痨杂志》
CAS
2007
9
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职称材料
2
结核分枝杆菌Ag85A/ESAT-6嵌合基因DNA疫苗与抗痨药物联合治疗小鼠结核病
梁艳
吴雪琼
李宁
张俊仙
阳幼荣
余琦
白雪娟
宋晶莹
刘瑞
李忠明
王兰
史迎昌
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2008
3
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职称材料
3
esat6-卡介苗重组疫苗的构建及鉴定
张灵霞
吴雪琼
董恩军
《实用医学杂志》
CAS
北大核心
2009
2
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