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结核分枝杆菌19-kDa蛋白在大肠杆菌中的表达
1
作者
韩慧新
李邦印
+1 位作者
吴雪琼
张灵霞
《中国全科医学》
CAS
CSCD
2006年第13期1057-1059,共3页
目的 通过基因工程技术获得重组结核分枝杆菌19-kDa蛋白。方法 应用PCR技术扩增结核分枝杆菌H37 Rv19-kDa DNA序列；以质粒pET24b为表达载体，构建19-kDa重组质粒，然后转化大肠杆菌BL21（DE3）；在异丙基硫代-13-D-半乳糖苷（IPTG）诱...
目的 通过基因工程技术获得重组结核分枝杆菌19-kDa蛋白。方法 应用PCR技术扩增结核分枝杆菌H37 Rv19-kDa DNA序列；以质粒pET24b为表达载体，构建19-kDa重组质粒，然后转化大肠杆菌BL21（DE3）；在异丙基硫代-13-D-半乳糖苷（IPTG）诱导下，分别对不同诱导时间的表达产物进行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE），凝胶经考马斯亮蓝染色检测蛋白。结果重组质粒pET24b-19-kDa测序表明与报道的序列相同。它在大肠杆菌BL21（DE3）细胞内以可溶性形式表达。不同IPTG诱导时间实验表明重组结核分枝杆菌19-kDa蛋白诱导3～4h重组蛋白在大肠杆菌中的表达量最高。结论 pET24b-19-kDa大肠杆菌工程株可高表达结核分枝杆菌重组19-kDa蛋白。
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关键词
结核
分枝杆菌
19-kDa
克隆
基因表达
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职称材料
题名
结核分枝杆菌19-kDa蛋白在大肠杆菌中的表达
1
作者
韩慧新
李邦印
吴雪琼
张灵霞
机构
中国人民解放军总医院第二附属医院结核病研究室
出处
《中国全科医学》
CAS
CSCD
2006年第13期1057-1059,共3页
基金
国家自然科学基金资助项目(30471648)
文摘
目的 通过基因工程技术获得重组结核分枝杆菌19-kDa蛋白。方法 应用PCR技术扩增结核分枝杆菌H37 Rv19-kDa DNA序列；以质粒pET24b为表达载体，构建19-kDa重组质粒，然后转化大肠杆菌BL21（DE3）；在异丙基硫代-13-D-半乳糖苷（IPTG）诱导下，分别对不同诱导时间的表达产物进行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE），凝胶经考马斯亮蓝染色检测蛋白。结果重组质粒pET24b-19-kDa测序表明与报道的序列相同。它在大肠杆菌BL21（DE3）细胞内以可溶性形式表达。不同IPTG诱导时间实验表明重组结核分枝杆菌19-kDa蛋白诱导3～4h重组蛋白在大肠杆菌中的表达量最高。结论 pET24b-19-kDa大肠杆菌工程株可高表达结核分枝杆菌重组19-kDa蛋白。
关键词
结核
分枝杆菌
19-kDa
克隆
基因表达
Keywords
Tuberculosis
Mycobacterium
19-kDa
Cloning
Gene expression
分类号
R378.911 [医药卫生—病原生物学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
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1
结核分枝杆菌19-kDa蛋白在大肠杆菌中的表达
韩慧新
李邦印
吴雪琼
张灵霞
《中国全科医学》
CAS
CSCD
2006
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