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HBx诱导p16^(INK4a)高甲基化在Chang细胞株恶性转化倾向中的作用
被引量：
1
1
作者
吕文平
周开伦
+4 位作者
高彬
陈永亮
向昕
苏明
董家鸿
《北京大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第6期932-936,共5页
目的:探讨乙型肝炎病毒X(HBx)蛋白对p16INK4a表达和甲基化的影响,以及其在肝细胞癌早期发生中的作用机制。方法:采用脂质体法将真核表达载体pcDNA3.1B-HBx和pcDNA3.1B质粒分别稳定转染Chang细胞,构建表达HBx的细胞株Chang-HBx和不表达HB...
目的:探讨乙型肝炎病毒X(HBx)蛋白对p16INK4a表达和甲基化的影响,以及其在肝细胞癌早期发生中的作用机制。方法:采用脂质体法将真核表达载体pcDNA3.1B-HBx和pcDNA3.1B质粒分别稳定转染Chang细胞,构建表达HBx的细胞株Chang-HBx和不表达HBx的细胞株Chang-vector;半定量RT-PCR和Western blot法分别在mRNA和蛋白质水平上检测Chang-HBx、Chang-vector和Chang细胞株中的p16INK4a表达;甲基化特异性PCR检测HBx对细胞中p16INK4a启动子甲基化的影响;CCK-8溶剂检测3种细胞株的增殖曲线,流式细胞仪观察3种细胞的细胞周期和细胞凋亡率,重复3次。结果:成功构建了Chang-HBx和Chang-vector稳定细胞株,Chang-HBx细胞生长速度增快,Chang-HBx细胞的S期平均比率明显高于Chang-vector细胞和Chang细胞(28.96%vs.21.53%,P<0.001;28.96%vs.21.5%,P<0.001),而且Chang-HBx细胞的细胞凋亡率平均值明显低于Chang-vector细胞和Chang细胞(2.71%vs.3.69%,P<0.001;2.71%vs.3.36%,P<0.001)。初步机制研究证实HBx蛋白介导肝细胞的p16INK4a高甲基化,进而导致p16INK4a在mRNA和蛋白水平上表达均下降。结论:HBx通过诱导p16INK4a高甲基化下调后者的表达水平,可能在Chang细胞的恶性转化倾向中发挥作用。
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关键词
癌
肝细胞
乙型肝炎病毒X蛋白
基因
p16
甲基化
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职称材料
题名
HBx诱导p16^(INK4a)高甲基化在Chang细胞株恶性转化倾向中的作用
被引量：
1
1
作者
吕文平
周开伦
高彬
陈永亮
向昕
苏明
董家鸿
机构
中国人民解放军总医院海南分院肝胆外科
海南
省
人民
医院
肝胆
外科
出处
《北京大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第6期932-936,共5页
基金
国家自然科学基金(30772493)资助~~
文摘
目的:探讨乙型肝炎病毒X(HBx)蛋白对p16INK4a表达和甲基化的影响,以及其在肝细胞癌早期发生中的作用机制。方法:采用脂质体法将真核表达载体pcDNA3.1B-HBx和pcDNA3.1B质粒分别稳定转染Chang细胞,构建表达HBx的细胞株Chang-HBx和不表达HBx的细胞株Chang-vector;半定量RT-PCR和Western blot法分别在mRNA和蛋白质水平上检测Chang-HBx、Chang-vector和Chang细胞株中的p16INK4a表达;甲基化特异性PCR检测HBx对细胞中p16INK4a启动子甲基化的影响;CCK-8溶剂检测3种细胞株的增殖曲线,流式细胞仪观察3种细胞的细胞周期和细胞凋亡率,重复3次。结果:成功构建了Chang-HBx和Chang-vector稳定细胞株,Chang-HBx细胞生长速度增快,Chang-HBx细胞的S期平均比率明显高于Chang-vector细胞和Chang细胞(28.96%vs.21.53%,P<0.001;28.96%vs.21.5%,P<0.001),而且Chang-HBx细胞的细胞凋亡率平均值明显低于Chang-vector细胞和Chang细胞(2.71%vs.3.69%,P<0.001;2.71%vs.3.36%,P<0.001)。初步机制研究证实HBx蛋白介导肝细胞的p16INK4a高甲基化,进而导致p16INK4a在mRNA和蛋白水平上表达均下降。结论:HBx通过诱导p16INK4a高甲基化下调后者的表达水平,可能在Chang细胞的恶性转化倾向中发挥作用。
关键词
癌
肝细胞
乙型肝炎病毒X蛋白
基因
p16
甲基化
Keywords
Carcinoma
hepatocelluar
Hepatitis B virus X protein
Genes
p16
Methylation
分类号
R735.7 [医药卫生—肿瘤]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
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1
HBx诱导p16^(INK4a)高甲基化在Chang细胞株恶性转化倾向中的作用
吕文平
周开伦
高彬
陈永亮
向昕
苏明
董家鸿
《北京大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2012
1
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