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猪的脂肪和骨髓来源间充质干细胞培养特性比较 被引量:2
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作者 尹巧香 王恒 +1 位作者 裴志勇 赵玉生 《生物医学工程与临床》 CAS 2013年第6期523-527,共5页
目的明确小型猪的脂肪来源间充质干细胞(A_r_MSCs)和猪的骨髓来源间充质干细胞(BM—MSCsl体外培养特性的异同。方法广西巴马小型猪,雌雄不限,猪龄4~6个月,体质量20~30kg。AT-MSCs来源于小型猪腹股沟皮下组织.BM—MSCs来源于小... 目的明确小型猪的脂肪来源间充质干细胞(A_r_MSCs)和猪的骨髓来源间充质干细胞(BM—MSCsl体外培养特性的异同。方法广西巴马小型猪,雌雄不限,猪龄4~6个月,体质量20~30kg。AT-MSCs来源于小型猪腹股沟皮下组织.BM—MSCs来源于小型猪的骨髓组织。培养AT-MSCs和BM—MSCs并观察它们的细胞形态。流式细胞仪检测Arr_MSCs和BM—MSCs的表面标志物(CD29、CD34、CD45、CD90)。分别观察Arr-MSCs和BM—MSCs的细胞生长分化能力;实时聚合酶链反应(PCR)检测基因表达。结果流式细胞仪检测结果表明,A.r_MSCs和BM—MSCs均表达CD29[分别为(99.06±0.30)%、(99.94±0.05)%]、CD90[分别为(97.404-0.40)%、(97.43±1J29)%1阳性,CD34、CD45阴性。AT-MSCs传代需培养5~7d,而BM—MSCs需培养7~10d。与BM—MSCs比较,AT—MSCs具有更强的生长分化能力。实时PCR检测基因表达结果显示.AT—MSCs和BM—MSCs均能分化心肌特异标志物a—skeletalactin和Troponin—I.二者差异无统计学意义.表明AT—MSCs和BM—MSCs均具备多项分化潜能.结论AT—MSCs是小型猪干细胞移植治疗的理想选择. 展开更多
关键词 间充质干细胞 脂肪组织 骨髓 培养特性
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钙调神经磷酸酶抑制剂对过氧化氢诱导的干细胞凋亡的影响 被引量:2
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作者 尹巧香 王恒 +1 位作者 裴志勇 赵玉生 《生物医学工程与临床》 CAS 2014年第1期74-79,共6页
目的比较钙调神经磷酸酶(CaN)抑制剂FK-506和环孢菌素A(CsA)保护脂肪组织来源干细胞(AT-DSCs)抗凋亡作用及可能机制。方法采用过氧化氢(H2O2)[分浓度0(对照组)、50、100、200、300、400μmol/L H2O26组]体外诱导AT-DSCs凋亡模型,凋亡模... 目的比较钙调神经磷酸酶(CaN)抑制剂FK-506和环孢菌素A(CsA)保护脂肪组织来源干细胞(AT-DSCs)抗凋亡作用及可能机制。方法采用过氧化氢(H2O2)[分浓度0(对照组)、50、100、200、300、400μmol/L H2O26组]体外诱导AT-DSCs凋亡模型,凋亡模型的评价采用磷脂酰丝氨酸结合蛋白-异硫氰酸荧光素(AnnexinV-FITC)/碘化丙啶(PI)双染流式细胞术和线粒体内跨膜电位测定法;观察AT-DSCs凋亡细胞形态;AT-DSCs细胞活性检测采用CCK-8试剂;细胞色素C的表达采用Western blot分析。结果与对照组比较,引起细胞凋亡率最高的是浓度100μmol/L H2O2(15.60%±8.50%vs 4.50%±0.88%;P<0.01);但CaN抑制剂FK-506(质量浓度1mg/mL)(9.8%±1.3%vs17.0%±1.6%,P<0.01)和CsA(质量浓度1mg/mL)(12.2%±1.2%vs 17.0%±1.6%,P<0.01)预处理后细胞凋亡率均明显下降,细胞存活率明显提高(P<0.01)。Western blot结果显示,CaN抑制剂FK-506(质量浓度1 mg/mL)和CsA(质量浓度1 mg/mL)可完全抑制H2O2诱导的细胞色素C释放。结论 CaN抑制剂能保护H2O2诱导的干细胞凋亡。可能机制是CaN抑制剂能抑制细胞凋亡,提高细胞存活率,下调细胞色素C的释放。 展开更多
关键词 钙调神经磷酸酶 干细胞 细胞凋亡 抑制剂
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