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应用特异性引物检测中国不同地区旋毛虫DNA 被引量:1
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作者 徐克诚 姚春雨 +1 位作者 于连富 王虹 《中国动物检疫》 CAS 1998年第5期1-3,共3页
根据Jean-Dupouy-Camer所报道1.7kb基因序列而设计合成的引物,对中国九个地区的旋毛虫株的肌组织旋毛虫DNA进行了聚合酶链反应(PCR)。扩增产物经琼脂糖凝胶电泳分析,可见中国猪源旋毛虫均扩增出特异性... 根据Jean-Dupouy-Camer所报道1.7kb基因序列而设计合成的引物,对中国九个地区的旋毛虫株的肌组织旋毛虫DNA进行了聚合酶链反应(PCR)。扩增产物经琼脂糖凝胶电泳分析,可见中国猪源旋毛虫均扩增出特异性的602bp和230bp大小的DNA条带,而中国犬源和猫源以及正常对照肌组织DNA均未扩增出特异性片段。本法对中国猪源旋毛虫可检测到0.02条旋毛虫DNA,具有高度的特异性和敏感性。 展开更多
关键词 旋毛虫 DNA 聚合酶链反应
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大肠杆菌肠毒素ST_1-LT_B融合基因的高效表达 被引量:15
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作者 许崇波 卫广森 +6 位作者 王卓 于凤芹 冯书章 王文成 马成国 李尚波 张万林 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第3期249-253,共5页
用限制性核酸内切酶EcoRⅠ和HindⅢ双酶切含大肠杆菌肠毒素ST1—LTB融合基因的质粒pXSLT1,回收084kb的ST1—LTB融合基因,再将载体pET—28b(+)用EcoRⅠ和HindⅢ双酶切,然后将其与... 用限制性核酸内切酶EcoRⅠ和HindⅢ双酶切含大肠杆菌肠毒素ST1—LTB融合基因的质粒pXSLT1,回收084kb的ST1—LTB融合基因,再将载体pET—28b(+)用EcoRⅠ和HindⅢ双酶切,然后将其与ST1—LTB融合基因连接,转化至受体菌BL21(DE3)中。经EcoRⅠ、HindⅢ、BamHⅠ酶切反应鉴定重组子质粒,得到了理想重组质粒pXETSLT1。重组菌株BL21(DE3)(pXETSLT1)经IPTG诱导后,其表达产物经SDS—PAGE和ELISA检测,结果表明重组菌株可以高效表达ST1—LTB融合蛋白,该融合蛋白占菌体总蛋白的3321%,而且无天然ST1生物毒性。 展开更多
关键词 大肠杆菌 ST1-LTB 融合基因 融合蛋白 表达
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大肠杆菌耐热性肠毒素Ⅰ融合基因的构建及其免疫原性研究 被引量:19
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作者 许崇波 卫广森 +4 位作者 冯书章 刘子 刘晓明 黄培堂 岳军明 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 1997年第4期330-335,共6页
用限制性核酸内切酶BamHI和Bg1Ⅱ双酶切质粒pBST2-6,获得了大肠杆菌耐热性肠毒素Ⅰ(ST1)基因,再将含LacZ基因(编码β-半乳糖苷酶)的载体pUC18用BamHI酶切、碱性磷酸酶处理,然后与ST1基因通... 用限制性核酸内切酶BamHI和Bg1Ⅱ双酶切质粒pBST2-6,获得了大肠杆菌耐热性肠毒素Ⅰ(ST1)基因,再将含LacZ基因(编码β-半乳糖苷酶)的载体pUC18用BamHI酶切、碱性磷酸酶处理,然后与ST1基因通过T4DNA连接酶连接,转化至受体菌DH5α中。通过菌落原位杂交筛选,共筛选出53个ST1基因探针杂交阳性的重组子,对其中一个重组子DH5α(pXST1)进行限制性核酸内切酶酶切分析和核苷酸序列分析,证明重组质粒pXST1含有2个正向串连在一起的ST1基因,而且融合在LacZ基因的上游,具有正确的阅读框架。又DH5α(pXST1)菌株能在含X-Gal的LB平板上长成蓝色菌落,而且ELISA也检测到ST1融合蛋白,这表明该菌株能表达具有β-半乳糖苷酶活性的大肠杆菌ST1—β-半乳糖苷酶融合蛋白。免疫实验结果表明,重组菌株DH5α(pXST1)安全无毒,表达的ST1融合蛋白能够诱发BALB/c鼠产生抗体,该抗体具有中和天然ST1肠毒素的毒性作用,这表明DH5α(pXT1)可以作为预防幼畜腹泻的菌苗候选株。 展开更多
关键词 怕杆菌 融合基因 基因克隆 免疫原性
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大豆连作对土壤酶活性的影响 被引量:29
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作者 傅慧兰 杨振明 +2 位作者 邹永久 王树起 韩丽梅 《植物营养与肥料学报》 CAS CSCD 1996年第4期374-377,共4页
大豆是黑龙江竹重要农作物之一。由于种植面积增加很快,大豆连作面积不断扩大,致使土壤养分失调,病虫害加剧,大豆生长发育受阻,产量下降。有关大豆连作减产的原因报道很多,但结论不尽一致。 土壤酶活性是土壤肥力和生产力的指标之一,国... 大豆是黑龙江竹重要农作物之一。由于种植面积增加很快,大豆连作面积不断扩大,致使土壤养分失调,病虫害加剧,大豆生长发育受阻,产量下降。有关大豆连作减产的原因报道很多,但结论不尽一致。 土壤酶活性是土壤肥力和生产力的指标之一,国内外报道较多。但目前对大豆连作情况下土壤酶活性变化的报道不多。为此我们从1989年开始开展了有关问题的探讨。 一、材料与方法 试验采用田间小区和盆栽模拟相结合的方法进行。供试土壤为中层黑土。基础肥力为:有机碳1.54%。 展开更多
关键词 大豆 连作 土壤酶活性
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河南牛、鼠源狂犬病毒G基因主要功能区的比较分析 被引量:6
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作者 钱爱东 侯世宽 +4 位作者 刘清河 张茂林 李红卫 涂长春 殷震 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第4期355-360,共6页
本研究对从我国河南牛狂犬病疫区分离的狂犬病病毒牛源毒BRV和鼠源毒MRV的糖蛋白(G)基因膜外主要功能区进行反转录—聚合酶链反应(RT-PCR)扩增、克隆、测序和两者的比较分析。分别得到了每个毒株G基因膜外区742b... 本研究对从我国河南牛狂犬病疫区分离的狂犬病病毒牛源毒BRV和鼠源毒MRV的糖蛋白(G)基因膜外主要功能区进行反转录—聚合酶链反应(RT-PCR)扩增、克隆、测序和两者的比较分析。分别得到了每个毒株G基因膜外区742bp的cDNA片段(位于G基因405~1146号碱基)和推导的氨基酸序列,它含有可以诱导产生中和抗体的多个抗原决定簇和决定毒力及与神经细胞受体结合位点。计算机的比较分析表明两者在这一基因片段的同源性很低,核苷酸和氨基酸序列的同源性分别为81.1%和85.4%,主要抗原决定簇AgⅡ的202位和AgⅢ的332位氨基酸两者不同,并且MRV在202位形成糖基化位点。研究结果证明BRV和MRV是亲缘关系较远的毒株,甚至有型或亚型的差别,两者的核苷酸和氨基酸序列均有较大差异,BRV不可能是MRV在短时间内演化而来的毒株。 展开更多
关键词 狂犬病毒 糖蛋白基因 比较
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不同砧木对嫁接黄瓜生理影响的研究 被引量:25
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作者 王玉彦 贾卫国 +2 位作者 申斯乐 蒋先华 于广建 《中国蔬菜》 北大核心 1995年第2期31-34,共4页
不同砧木对嫁接黄瓜生理影响的研究王玉彦,贾卫国,申斯乐,蒋先华,于广建(中国人民解放军农牧大学农学农机系长春130062)(东北农业大学园艺系)黄瓜嫁接栽培,是目前保护地黄瓜生产中,受到高度重视的一项新技术。我国从6... 不同砧木对嫁接黄瓜生理影响的研究王玉彦,贾卫国,申斯乐,蒋先华,于广建(中国人民解放军农牧大学农学农机系长春130062)(东北农业大学园艺系)黄瓜嫁接栽培,是目前保护地黄瓜生产中,受到高度重视的一项新技术。我国从60年代开始研究此项技术,80年代初... 展开更多
关键词 黄瓜 砧木 嫁接 生理学
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伪狂犬病病毒Fa株gI和gp63基因缺失株的构建 被引量:13
7
作者 颜其贵 郭万柱 +2 位作者 余光开 王琴 娄高明 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 1997年第6期562-566,共5页
用限制性核酸内切酶NcoI消化含有伪狂犬病病毒(PRV)Fa侏BamHI-7片段的质粒PPB7,以低融点琼脂糖回收目的片段,经连接并转化E.coliDH5d,获得缺失3gI和部分gp63基因的重组质粒PPB7-1。将... 用限制性核酸内切酶NcoI消化含有伪狂犬病病毒(PRV)Fa侏BamHI-7片段的质粒PPB7,以低融点琼脂糖回收目的片段,经连接并转化E.coliDH5d,获得缺失3gI和部分gp63基因的重组质粒PPB7-1。将PRVFa与PPB7-1DNA共同转染PK15单层细胞,待出现50%以上细胞病变时收获病毒,并以蚀斑法得到纯化重组病毒株,命名为PFDI/D63。小鼠试验证实缺失株对小鼠具有一定的免疫原性。 展开更多
关键词 伪狂犬病病毒 基因缺失 重组
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伪狂犬病毒DNA限制性内切酶分析 被引量:8
8
作者 汪铭书 郭万柱 +5 位作者 冯炳芳 王印 娄高明 费恩阁 宣华 韩素文 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 1995年第2期134-138,共5页
应用5种限制性核酸内切酶(BamHI、KpnI,SalI、BglⅡ和HindⅢ)建立了伪狂犬病毒闽A株DNA的内切酶图谱,并与Buk株、Shope株、Norden株、S株,台湾NTU株进行比较,认为闽A株与美国或欧洲... 应用5种限制性核酸内切酶(BamHI、KpnI,SalI、BglⅡ和HindⅢ)建立了伪狂犬病毒闽A株DNA的内切酶图谱,并与Buk株、Shope株、Norden株、S株,台湾NTU株进行比较,认为闽A株与美国或欧洲毒株无关,而与台湾株同源,表明核酸限制性内切酶分析在伪狂犬病病毒研究中是一种毒株鉴别、分子流行病学调查的有用工具。 展开更多
关键词 伪狂犬病毒 限制性 内切酶分析 DNA
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牛体外成熟卵母细胞冷冻保存的研究 被引量:9
9
作者 冯怀亮 孙青原 +3 位作者 李子义 杨庆章 刘国艺 秦鹏春 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 1995年第6期481-486,共6页
本实验探讨了用6种不同方法冷冻保存的牛体外成熟卵母细胞体外受精后的发育潜力及其冷冻损伤。尽管用不同方法冷冻的牛卵母细胞多数(86.1%)形态正常,仅体外受精后的受精率(30.0%)和卵裂率(7.4%)明显低于对照组(... 本实验探讨了用6种不同方法冷冻保存的牛体外成熟卵母细胞体外受精后的发育潜力及其冷冻损伤。尽管用不同方法冷冻的牛卵母细胞多数(86.1%)形态正常,仅体外受精后的受精率(30.0%)和卵裂率(7.4%)明显低于对照组(69.0%和52.9%),卵裂后继续发育的能力严重受损。在6种冷冻方法中,1.6M丙二醇分步平衡、程序冷冻效果最好,受精率和卵裂率分别达36.4%和13.5%。冷冻后卵母细胞发育潜力下降的原因是皮质颗粒胞吐引起的透明带变硬及亚细胞结构损伤。玻璃化法冷冻的卵母细胞损伤较轻,是值得进一步研究的一种方法。 展开更多
关键词 卵母细胞 冷冻保存
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补饲与不补饲条件下3种放牧率对高寒草地牧草与家畜生产的影响 被引量:10
10
作者 沈景林 张光圣 +2 位作者 周学东 王占凤 罗刚 《草业学报》 CSCD 1996年第4期11-17,共7页
通过补饲和不补饲条件下放牧率对高寒草地牧草和家畜生产影响的研究,结果表明,3种放牧率对草地牧草产量影响不大,组间差异不显著(P>0.05)。放牧率影响羯羊体重。在补饲条件下,羯羊日增长量随放牧率减小而增加,组间差异显著(P<0.0... 通过补饲和不补饲条件下放牧率对高寒草地牧草和家畜生产影响的研究,结果表明,3种放牧率对草地牧草产量影响不大,组间差异不显著(P>0.05)。放牧率影响羯羊体重。在补饲条件下,羯羊日增长量随放牧率减小而增加,组间差异显著(P<0.05);不补饲使羯羊减重,羯羊日减重量随放牧率减小而降低。同时,放牧率影响羯羊肉用性能和肉的品质。在补饲条件下,草地生物学效率明显高于不补饲组,且中组比低、高组高,草地生产能力最大。由此得出,高寒草地以中等放牧率为最佳,即1.8只/hm^2,且补饲效果最明显。 展开更多
关键词 放牧率 羯羊 转化效率 高寒草地
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兽用新型抗菌药物──恩诺沙星 被引量:53
11
作者 应翔宇 杨永胜 《中国兽药杂志》 北大核心 1995年第3期53-56,共4页
兽用新型抗菌药物──恩诺沙星应翔宇,杨永胜(中国人民解放军农牧大学兽医研究所,长春130062)恩诺沙星(Enrofloxacin)作为动物专用抗菌药已广泛用于各种动物感染性疾病的预防和治疗。它对包括假单胞菌属在内的... 兽用新型抗菌药物──恩诺沙星应翔宇,杨永胜(中国人民解放军农牧大学兽医研究所,长春130062)恩诺沙星(Enrofloxacin)作为动物专用抗菌药已广泛用于各种动物感染性疾病的预防和治疗。它对包括假单胞菌属在内的大多数革兰氏阴性菌、部分革兰氏阳性... 展开更多
关键词 兽药 抗菌药物 思诺沙星
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硒对免疫功能影响的研究进展 被引量:27
12
作者 龚伟 王哲 +1 位作者 张乃生 李毓义 《动物医学进展》 CSCD 1998年第4期16-18,共3页
硒可以从多方面影响机体的免疫功能。机体缺硒时,T、B淋巴细胞增殖与分化以及对丝裂原的反应受到抑制;淋巴细胞分泌的淋巴因子减少;T细胞和NK细胞在体外杀伤癌细胞的能力下降;吞噬细胞吞噬和杀灭病原体的能力受到严重影响;机... 硒可以从多方面影响机体的免疫功能。机体缺硒时,T、B淋巴细胞增殖与分化以及对丝裂原的反应受到抑制;淋巴细胞分泌的淋巴因子减少;T细胞和NK细胞在体外杀伤癌细胞的能力下降;吞噬细胞吞噬和杀灭病原体的能力受到严重影响;机体的抗病力和生产能力明显降低。补给足量的硒,则可提高机体的免疫功能。目前,有关硒增强免疫作用的机制主要有硒抗氧化学说、硒与表面介导的应答控制学说、硒影响淋巴细胞酶系学说及硒的免疫作用自由基机制。 展开更多
关键词 免疫 家畜免疫学
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猪感染牛病毒性腹泻病毒的研究进展 被引量:15
13
作者 王新平 周绪斌 《动物医学进展》 CSCD 1998年第1期1-4,共4页
本文就猪感染牛病毒性腹泻病毒(BVDV)的发生,临床症状与病理变化,猪感染BVDV的传染来源以及猪感染BVDV和猪瘟病毒的鉴别诊断等方法作了综述性介绍。
关键词 猪病 牛病毒性腹泻 病毒感染 BVDV
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猪伪狂犬病病毒JL株的分离与鉴定 被引量:4
14
作者 娄高明 韩文瑜 +2 位作者 张玉静 赵建军 邹啸环 《中国动物检疫》 CAS 1998年第2期14-16,共3页
猪伪狂犬病病毒JL株的分离与鉴定娄高明韩文瑜张玉静赵建军邹啸环(中国人民解放军农牧大学长春130062)伪狂犬病(PR)是由疱疹病毒科α疱诊病毒亚科猪疱疹病毒I型引起的一种以发热、脑脊髓炎为主要症状的急性传染病[1]... 猪伪狂犬病病毒JL株的分离与鉴定娄高明韩文瑜张玉静赵建军邹啸环(中国人民解放军农牧大学长春130062)伪狂犬病(PR)是由疱疹病毒科α疱诊病毒亚科猪疱疹病毒I型引起的一种以发热、脑脊髓炎为主要症状的急性传染病[1]。猪是本病的主要宿主和带毒者。本病... 展开更多
关键词 猪病 伪狂犬病病毒 分离 鉴定
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干旱对苹果叶片形态解剖结构的影响 被引量:10
15
作者 马兰青 王丽雪 +3 位作者 王有年 姚允聪 张福仁 梁艳荣 《北京农学院学报》 1996年第2期27-31,共5页
扫描电子显微镜观察结果看出,抗旱力不同的种类,品种的苹果叶片解剖结构差别不大,气孔结构大致相同,气孔密度没有明显差异;经干旱胁迫处理后,抗旱力强的种类气孔明显下陷。
关键词 干旱 苹果 解剖结构 叶片
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N-羟甲基中卟啉诱导产生抗体的酶学性质研究 被引量:2
16
作者 冯雁 高姝娟 +3 位作者 高贵 刘锡煜 杨同书 刘玙 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 1995年第4期549-552,共4页
以N-羟甲基中卟啉为半抗原,通过动物免疫、细胞融合等技术筛选得到的细胞株11D~1,该细胞株产生的抗体具有结合铁中卟啉的能力,且表现出过氧化物酶活力。进一步研究表明,该抗体对半抗原及铁中卟啉的亲和力分别为:1.1×... 以N-羟甲基中卟啉为半抗原,通过动物免疫、细胞融合等技术筛选得到的细胞株11D~1,该细胞株产生的抗体具有结合铁中卟啉的能力,且表现出过氧化物酶活力。进一步研究表明,该抗体对半抗原及铁中卟啉的亲和力分别为:1.1×10^(-6)mol/L和2.1×10^(-6)mol/L;抗体-铁中卟啉复合物催化反应时,对底物过氧化氢的K_m=13.0mmol/L,K_(cat)=86min^(-1),与自然催化速度相比,活力提高1.8×10~4(mol/L)^(-1)。 展开更多
关键词 羟甲基 卟啉 抗体酶 过氧化物酶
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犬腺病毒SY-45株不同大小蚀斑特性研究 被引量:2
17
作者 范泉水 夏咸柱 +6 位作者 邱薇 黄耕 何洪彬 余春 乔军 武银莲 殷震 《动物医学进展》 CSCD 2001年第4期86-87,99,共3页
应用蚀斑方法将 SY- 4 5毒株经过 3次蚀斑纯化直到蚀斑大小相对稳定。从不同大小的蚀斑中挑选出三种蚀斑 ,大斑直径约 3mm (简称 LP)、中斑约 2 mm(简称 MP)、小斑约 1 mm(简称 SP)。分别在 MDCK细胞上增殖并进行了三种不同大小斑毒对... 应用蚀斑方法将 SY- 4 5毒株经过 3次蚀斑纯化直到蚀斑大小相对稳定。从不同大小的蚀斑中挑选出三种蚀斑 ,大斑直径约 3mm (简称 LP)、中斑约 2 mm(简称 MP)、小斑约 1 mm(简称 SP)。分别在 MDCK细胞上增殖并进行了三种不同大小斑毒对犬的毒力、免疫原性和在 MDCK细胞上产毒量比较 ,以筛选最佳的疫苗株 ,试验结果表明用不同大小蚀斑病毒大剂量人工感染易感犬后 ,所有的试验犬临床症状和病理解剖学和病理组织学表现均正常 ;对挑选的 4窝 CAV HI抗体效价小于等于 1 :2的健康幼犬进行免疫试验 ,测定血清的中和抗体效价和血凝抑制抗体效价 ,结果表明 :大斑毒的免疫原性要稍高于中斑毒 ,而明显高于小斑毒 ;不同大小蚀斑毒在 MDCK细胞上产毒量差异很大 ,大斑毒可达 1 0 7TCID50 / m L、小斑毒达 1 0 6 TCID50 /ml、小斑毒达 1 0 4 .5TCID50 / m L。综合所有试验结果表明 :大斑毒株具有产毒量高、安全性好、免疫原性强的优点 ,是较为理想的疫苗株。 展开更多
关键词 犬传染性喉气管炎病毒 犬2型腺病毒 蚀斑特性
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瘟病毒间的差异及起源 被引量:7
18
作者 王新平 周绪斌 《动物医学进展》 CSCD 1997年第2期1-4,共4页
牛病毒性腹泻病毒(BVDV)与猪瘟病毒(HCV)和边界病病毒(BDV)共同构成黄病毒科瘟病毒属中的成员,它们引起的传染病给养牛、养猪和养羊业造成巨大的经济损失。这三种病毒在抗原性等众多方面虽然有许多相似之处,但又有差异。
关键词 瘟病毒 差异 起源
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封闭渔场收入优化的捕捞规划模型 被引量:2
19
作者 王玉杰 张大克 王千 《运筹与管理》 CSCD 1999年第1期111-114,共4页
运用定量的手段,对封闭渔场可获最大净收入现值的捕捞规划问题进行了分析,建立了制定捕捞规划的理论模型,并给出了模型中参数的具体计算方法。
关键词 封闭渔场 最大净收入现值 捕捞规划 数学模型
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青霉素脂质体对耐药金黄色葡萄球菌的抑菌效果观察 被引量:3
20
作者 杨永胜 刘明远 《中国兽药杂志》 北大核心 1996年第1期30-31,共2页
本实验在国内首次观察了青霉素脂质体对耐药金黄色葡萄球菌的抑菌效果及其对外源性β-内酰胺酶的耐受性。结果:青霉素脂质体对耐药菌的最低抑菌浓度(MIC)为240IU/ml,最低杀菌浓度(MBC)为260IU/ml,游离青... 本实验在国内首次观察了青霉素脂质体对耐药金黄色葡萄球菌的抑菌效果及其对外源性β-内酰胺酶的耐受性。结果:青霉素脂质体对耐药菌的最低抑菌浓度(MIC)为240IU/ml,最低杀菌浓度(MBC)为260IU/ml,游离青霉素的MIC为1200IU/ml,MBC为1600IU/ml;空白脂质体几乎无抑菌作用。青霉素脂质体对外源性β-内酰胺酶具有很强的耐受性。结果表明,青霉素制成脂质体制剂后可大大提高其对耐药菌株的抗菌能力,原因之一是它能保护青霉素免受β-内酰胺酶的水解破坏。 展开更多
关键词 青霉素 脂质体制剂 金黄色葡萄球菌 抑菌效果
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